血涂片制备染色及白细胞形态观察.ppt

血涂片制备染色及白细胞形态观察,根据不同的细胞种类及细胞的不同成分，对酸性及碱性染料的结合能力不同，而使各种细胞呈现出各自的特点。本实验使用吉姆萨染料：由天青(蓝)2号和酸性染料伊红混合配制而成。,掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态,原理,目的,器材 载玻片、推片、显微镜、微量吸管、移液枪试剂 姬姆萨染色液、磷酸缓冲液、甲醇标本 抗凝血,注意：操作中请穿实验服并带一次性手套操作。,血 涂 片制 备,推片（夹角保持30-45）,载玻片,血液（10微升）,将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄）,一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明,涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号,李四,B 1 2 3,血 涂 片 染色,稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜染色15min,PBS磷酸缓冲液漂洗（切勿先倒掉染液）,涂片经水洗干燥后即可镜检,李四123,涂片快速干燥后加甲醇固定2-3min,血涂片的观察,1.染色情况(满意、偏酸、偏碱）2.细胞分布情况,红细胞：淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米,嗜中性：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶。直径10-12微米,嗜酸性：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10-15微米。,嗜碱性：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。,淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。,单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米,1.你认为本次实验操作中需要注意的问题是什么？2.试描述一下你所看到的白细胞，包括细胞的形态/大小及染色情况。其中，你看到的红细胞又是一个什么情形？,分析讨论,