植物组织培养基本操作图解.ppt

植物组培基本操作图解,植物组织培养的内容 植物组织培养包括以植物和它的离体器官、组织、细胞和原生质体为外植体的离体无菌培养，拥有几种不同水平的培养技术，即整体的、器官的、组织的、细胞和原生质的培养技术。（植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养）,植物组织培养中的重要概念愈伤组织：指由植物的一种组织或器官经历脱分化形成的原始胚样组织，它具有再分化成为完整植物体的潜能；外植体：植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等；,无菌和消毒：无菌操作要注意：每次操作前，将双手用酒精棉球擦拭消毒；解剖针、解剖刀等金属工具用火焰烧过灭菌，在酒精中冷却，再将酒精烧去方可使用；尽量减少无菌三角瓶和培养皿在空气中的暴露时间；所有无菌操作尽量快速完成，并请在酒精灯附近进行。,组 培 实 验 用 品,一、无菌苗的快速切繁,1、点着酒精灯，双手擦拭消毒，打开长有无菌苗的三角瓶，三角瓶瓶口使用前后需在酒精灯外焰上烧过灭菌。2、用灭菌的镊子轻轻捏出幼苗，放在无菌的培养皿中，用灭菌的剪刀将主茎剪成若干0.5-1cm的小段，要求每段至少包含一个生长点，接入盛有MS培养基的三角瓶中，每一个切段必须直接接触培养基，三角瓶口重新烧过灭菌，并重新封好。3、在光照培养箱中，25，16小时光照条件下培养4周，可长成完整植株。,1、点着酒精灯,2、双手擦拭消毒,3、剪刀灭菌,外焰,4、酒精中冷却,5、把酒精烧去,6、打开三角瓶铝箔纸的拿法a,8、瓶口在火焰上烧过,9、铝箔纸的放法,11、镊出苗,12、放入培养皿中,13、幼苗形态生长点,14、剪取茎段,15、剪好的苗,培养皿的拿法,16、茎段接种a,17、茎段接种b,18、接种好的苗a,19、接种好的苗b,20、重新封好瓶口a,21、重新封好瓶口b,22、重新封好瓶口c,二 愈伤组织的培养,、挑选生长健康的无菌叶或茎，在灭菌的培养皿中剪成0.5-1cm2的小块或相当大小的茎段(造成伤口),接种在盛有MS培养基的培养皿中将培养皿用封口膜封住。、在光照培养箱中，25下,16小时光照，培养两周，可形成愈伤组织。,1、将苗剪出伤口,2、剪好的叶片和茎段,3、打开培养皿,5、愈伤组织接种,6、培养皿封口,三、苗的茎尖培养,、取幼苗10株，剪取1cm左右的茎尖浸入70%的酒精1分钟消毒液中15分钟无菌水冲洗5次灭菌的滤纸上吸干放入灭菌的培养皿。、在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥，挑取带着两至三个叶原基的生长锥。移到盛有B5培养基的培育皿中，诱导愈伤组织形成，用封口膜将培养皿封好。、在恒温培养箱中，26下,培养六周，可形成簇生芽丛。,1、幼苗形态,2、剪取茎尖,茎尖,3、剪好的茎尖,4、倒入70%酒精处理1分钟,5、倒去酒精,6、倒入消毒液(一般为升汞）处理15分钟,7、倒去消毒液,8、无菌水冲洗5次,9、取出茎尖,10、在滤纸上吸干水分,11、双目解剖镜下解剖茎尖,显微解剖镜使用图解,目镜,放大倍数旋钮,物镜,解剖载物台,焦距旋钮,底光源开关,上光源调节旋钮,