豚鼠过敏试验.ppt

豚鼠过敏试验The guinea pig allergic test,病原生物学与免疫学教研室Tel:03733831083,掌握豚鼠过敏实验的原理；,一、实验目的,熟悉超敏反应的分类。,二、原理,速发型超敏反应,细胞毒型超敏反应,免疫复合物型超敏反应,迟发型超敏反应,型超敏反应又称为速发型超敏反应，是由特异性的IgE抗体介导的，其主要特征为：出现快，消退也快；出现功能紊乱性疾病，不出现严重组织细胞损伤；有明显个体差异和遗传背景。,静息肥大细胞,激活后 5 分钟,激活后 60 分钟,荨麻疹,哮喘病发作患儿,先给豚鼠注射小量异种蛋白，经过一定的潜伏期，动物处于致敏状态。当第二次用较大剂量相同抗原注射豚鼠时，抗原激发豚鼠体内的肥大细胞或嗜碱性粒细胞，致使这些细胞释放多种生物活性介质，豚鼠迅速产生严重的过敏反应及至过敏性休克或死亡。,1.豚鼠：体重200g左右的幼小豚鼠；2.变应原：马血清、鸡蛋清；3.其他：生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒精、棉球等。,三、主要实验材料,四、实验步骤,1.取豚鼠三只，编号标记；抓取方法：先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部，抓住其肩胛下方，以拇指和食指抓住颈部将其轻轻提起。,2.致敏：按1：10分别稀释马血清，按照下表操作腹腔注射0.1ml。,第一次注射,1,2,3,马血清,生理盐水,马血清,3.发敏：按1：10分别稀释马血清，鸡蛋清，按照下表，心内注射2ml。,2-3周后第二次注射,1,2,3,鸡蛋清,马血清,马血清,豚鼠1在注射马血清1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃，症状严重者在数分钟内死亡。而豚鼠2、3无任何症状。,五、结果判断,将死亡豚鼠解剖，可见肺脏极度水肿，胀满整个胸腔。,1、心脏注射时，首先要固定好动物，然后于心跳最明显之处进针，感觉有搏动、注射器内有回血时再注射过敏原；2、由于动物个体反应性不同，有的反应较轻，可幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应，此称为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的，大约2周后又处于致敏状态。,六、注意事项,