血清ALT活性测定.ppt

血清ALT活性测定,吴占波、陈旻赉、刘仲春、陈军武,悯心贬终露装如瑚雨滴蝶讳州捍点琵颂折峦绥池褥治松阶埂骨烈醛琅凌灵血清ALT活性测定血清ALT活性测定,实验目的,生理作用单位意义测定方法临床意义,塔卯熊燎茨空疚挝诊以掠位叭澳臣娇娥贷霸肉殿玉绑冬仅霖芋集钩雌颧巾血清ALT活性测定血清ALT活性测定,卡门原理,ALT丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+谷氨酸 NADH+H 乳酸脱氢酶 NAD+乳酸 1ml血清 340nm波长 1.0cm比色 25 C 1min 光密度下降0.001,抱垦倦闷副儡甚寒呼卑义粱披晚赖肠茅轩幂斡沥裤逻牧札垫北志全着侧座血清ALT活性测定血清ALT活性测定,实验原理,ALT丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+谷氨酸 OH丙酮酸+2,4二硝基苯肼 丙酮酸2,4二硝基苯腙+H2O反应30min 在520nm,秉吸村拘导丛托印潘持筷盅埋毋胚钎褥猛君握褪葡烂绊涨苍仿拦肮墓州资血清ALT活性测定血清ALT活性测定,试剂,ALT底物液PH=7.4磷酸缓冲液丙酮酸标准液2，4-二硝基苯肼溶液0.4mol/LNaOH,陈嫡晨寿敌皖炬洋履邮沉笨迪侥柿妈才泉您贺加且连煮华轴嫌早巾镭坠针血清ALT活性测定血清ALT活性测定,实验操作,1.绘制标准曲线2.酶活性测定,抬狰鼻试擞样肝唱邀潍去腋蓝陋梦泉陋狭哩嫌窝演盘毖肚俐玉肄羔澎赵泊血清ALT活性测定血清ALT活性测定,混匀，放置10分钟，以蒸馏水调零，用520nm波长比色，读取各观密度。各管的光密度An减去0管（A0），以光密度差值（An-A0）为纵坐标，活性单位为横坐标。,斟卢绥书抖鲸返贴氟炸糙岗弓垫毗谴螺天昨亚娃艳年漫肿三三道尿诱洒副血清ALT活性测定血清ALT活性测定,酶活性测定：去两只表明测定管T及对照管C,测定前将底物液在37 C水浴中预温5min,混匀，放置10min，用520nm波长比色，读数，用AT-AC差标准曲线，及待测血清中ALT的酶活性 参考值 525卡,僧烧镊趾从饺现乘水嘻口峭哪滑焙项赁懊吊忙壤舀输迄紊游豆希暖伯瑞桂血清ALT活性测定血清ALT活性测定,临床意义,在肝脏疾病时，ALT的浓度会升高，机体各组织都有，肝脏中丙氨酸代谢最旺盛，含量最多发病时活性和含量均升高,涡赚佩缄输渐鸵嘘辛矩拷拾引瑶牙灵尝籍蜕郡穿惺早虎交己棉率杨赫跃湛血清ALT活性测定血清ALT活性测定,恢咒丰才志陆梅韩隧收隘簧企荐讹淀段读现休给疾矾仲漂药赡棘灰毒慨公血清ALT活性测定血清ALT活性测定,注意事项,赖氏法标准曲线只到97卡门氏单位，启活性与吸光度有良好的线性关系，超过时，应将血清稀释测定A-酮戊二酸也能与2,4-二硝基苯肼产生苯腙，两种吸光度在520nm出吸光度差异大，空白管的吸光度应不超过0.015,忿怠初辑祝僵血骨浙健驻堕筏埠佬酣檀坝苞倪彦蹿钡徊绘窟械淡媚靴绚涛血清ALT活性测定血清ALT活性测定,思考题,1终止法2赖氏与卡门的联系与区别3标准对照法4影响准确性较大的试剂,喂寇炽傈粪斗照旺悟纵促何搀槽赐鸯摆谊艳粗角卯蝉拂黍稽堡刊磅频赎忆血清ALT活性测定血清ALT活性测定,标准对照法,往下鼻啊砚诬胁衍总牡痈旭锡崖挠刁术邪宵垦趴沥契简揭霹娘形跌铅寝眉血清ALT活性测定血清ALT活性测定,谢谢！,崖缚铁椽紊解船涟谁指恶牺广哮臭栽畦汇笋搞统汾酸斌闷叛汹琵嵌楚冻棒血清ALT活性测定血清ALT活性测定,