全波长仪器功能概述.ppt

Varioskan Flash仪器功能概述,Varioskan Flash,Varioskan 检测光路系统,Varioskan Flash 的光学部件结构,VF的光学结构由以下六个部件组成激发光部件产生用于荧光和光密度检测的特定波长的光测量部件产生高清晰的光束用于荧光和光密度检测，激发光参比检测器被整合入测量部件发射部件对特定波长荧光和基于扫描模式的发光信号进行读数光吸收测量模块检测穿过微孔的光密度信号荧光底读模块引导来自光谱扫描模块的激发和发射光在底部检测微孔板荧光灵敏的化学发光检测部件检测微孔板的光信号,激发光部件,光源使用氙闪灯作为光源，氙闪灯提供光密度和荧光检测所需的宽广的光谱范围，脉冲功率为100Hz,只在测量时才激活，短的光脉冲可以进行准确的时间分辨荧光检测。一次检测根据检测质量和检测速度的要求可包括1-1000次闪烁脉冲。衍射次序选择滤光片（截止滤光片）激发衍射次序滤光片实际就是Cut-off 滤光片，用于阻止不想要的单色器的谐波发射，正确的衍射次序滤光片是自动选择的。单色器单色器是基于衍射光栅，光栅的凹槽表面将不同颜色分散至不同的角度，通过光栅的转动来选择不同波长的光。带宽选择带宽是由单色器的狭缝宽度来设定的，二种带宽的选择（5nm和12nm)通过控制狭缝来产生。,干涉滤光片interference film 利用干涉原理只使特定光谱范围的光通过的光学薄膜。通常由多层薄膜构成。干涉滤光片种类繁多，用途不一，常见干涉滤光片分截止滤光片和带通滤光片两类截止滤光片能把光谱范围分成两个区，一个区中的光不能通过(截止区)，而另一区中的光能充分通过（通带区）。典型的截止滤光片有低通滤光片（只允许长波光通过）和高通滤光片（只允许短波光通过）它们均为多层介质膜，具有由高折射率层和低折射率层交替构成的周期性结构带通滤光片只允许较窄波长范围的光通过，常见的是法布里-珀罗型滤光片，具体结构为：玻璃衬底上涂一层半透明金属层，接着涂一层氟化镁隔层，再涂一层半透明金属层，两金属层构成了法布里-珀罗标准具的两块平行板。当两极的间隔与波长同数量级时，透射光中不同波长的干涉高峰分得很开，利用别的吸收型滤光片可把不允许透过的光滤掉，从而得到窄通带的带通滤光片，其通频带宽度远比普通吸收型滤光片要窄。另外还有全电介质的法布里-珀罗型滤光片 根据需要，带通滤光片的通频带可从红外到紫外。在可见光区，彩色电视摄像机中可利用这种滤光片把像分离成不同颜色；在红外区，常用于二氧化碳激光器、导弹制导系统及卫星传感器等,测量部件,测量光学部件是前表面的光镜系统，用于产生不受波长约束的，非常鲜明光束，在测量位F进行荧光和光密度检测。同时此测量部件收集进入发射读数通道的发射光。在测量光束进入微孔前，先由参比传感器测一下光束密度，参比传感器的数据用于校准结果，以补偿光源长时间闪烁和短时闪烁强度的波动。,发射光读数模块,发射光单色器通过二个顺序连接的衍射光栅单色器获得高纯度的光线，带宽12nm。发射衍射顺序滤光片用于阻止不想要的单色器产生的谐波发射发射光检测器通过光电倍增管将发射光信号转化为电子信号，动力学范围自动可调或根据测量条件手工调节。手工调节有4种选择：低、中低、中高、和高范围。除荧光检测，此模块也可用于化学发光光谱扫描。,光密度检测模块,光密度测量是将激发光模块作为光度测量的光源。光密度测量模块位于测量位F,荧光底读模块,此模块基于光纤将光由光谱扫描模块传输至底读模块。此底读光学部件位于测量位L。,化学发光检测模块,此模块是选项，位于仪器前部，自动进样器之间。连接至测量位L交叉干扰防护罩可阻止邻近孔的干扰，根据板的类型自动设定缝隙。有明确的缝隙选择可用于96、384和1536孔，大孔板还是使用96孔板的缝隙。,光吸收检测模式,光吸收检测模式原理,Varioskan Flash光吸收检测模式特点-光谱范围,光源：高能量氙灯通过双单色光发生器（Double Monochromator）进行分光，最大程度消除光栅分光过程中所产生的游离杂散光，确保所产生的光谱更纯波长范围200 1000 nm，波长连续可调，1nm递增量,光程校正技术-Pathlength correction,Path length,水平光路检测（分光光度计检测方式）使用比色皿 光程通常固定为1cm 光程与液体体积无关 OD 值只取决于液体浓度,A=c L,A=吸光度值=消光系数(摩尔吸光系数)C=浓度 L=光程(in cm),比尔定律,垂直光路检测（微孔板检测方式）使用微孔板光程与液体体积有关 OD值取决于液体体积和浓度,对于已知浓度的样品，其 c为常数（k=c）公式中k为Correction Factor以水相溶液为例，水在970998nm处有吸收峰（975nm为特征峰），A H2O=A975 A900，可确定1cm光程下纯H2O的A（以水为例，纯H2O的浓度为C=1000/18）故可根据水相溶液中水的A来确定溶液的高度，即样本实际光程L）通过 L，将A校正为光程1cm条件下的A,A=c L,Pathlength correction光程校正技术原理,A=c L,A=A/L=c 1,Pathlength correction光程校正技术优越表现,1、将在微孔板上读出的OD值直接转换为1cm光 程下的OD值（分光光度值），无需通过标准品，在UV区可直接在微孔板上检测出核酸、蛋白的浓度，提高实验的平行性2、将传统酶标仪(Microplate Reader)的检测精度提高到微孔板分光光度计(Microplate Spectraphotometer)的水平,光吸收模式技术参数,荧光检测模式原理,Cuvette based and microplate fluorometer,Standard 90optics angles in a cuvette-based fluorometer,Typical Plate-Reading Fluorometer,Varioskan Flash荧光光路-四光栅,双激发光/双发射光（四光栅）设计方式：激发光采用双单色器进行分光，发射光同样采用双单色器进行分光该设计方式最大程度减少了游离杂散光的通过，产生最为纯的单色光，降低了杂散光干扰，避免了激发光反射光对发射光的干扰，大大提高了荧光实验的信噪比，,Ex,Ex,Em,Varioskan Flash荧光四光栅设计的优势,连续光谱荧光较滤光片荧光的优势,新的荧光染料，窄stokes Shift,1、适合于绝大多数荧光染料实验，无需更换滤光片2、可进行荧光光谱扫描，优化实验条件，选择最佳 激发/发射波长，提高实验的灵敏度3、可检测新型荧光染料（stokes shift较窄）和紫外 区荧光激发实验,连续光谱荧光较滤光片荧光的优势,半峰宽(HBW)wavelength range of 50%fluorescence excitation or emission attainment of filter 通常荧光滤光片的带宽在25-55nm 之间 为避免HBW的重合，滤光片式机器往往会选择并不位于最佳激发/发射位置的滤光片来提供波长，其结果造成荧光信号变弱，降低了检测灵敏度,同种荧光染料选择不同位置激发产生不同强度的发射光,Varioskan Flash荧光检测-孔扫描，顶部、底部读数,Microwell scanning,Varioskan Flash!AbsorbanceFluorescenceLuminometrymicrowell scanningtop and bottom reading,Varioskan Flash荧光光谱扫描-荧光实验优化,定量实验需确定荧光染料最适激发/发射波长对于已知荧光实验体系，通过光谱扫描可优化实验条件：许多荧光燃料对环境较敏感，如 buffer,pH 及温度的改变，因此需要优化实验条件，找出最佳波长用于多标记及 FRET 实验 检测样品及试剂纯度监测试剂或结合物的稳定性,Fig.2 pH dependence of 4-MeU Emission spectra,Fig.1.pH dependence of 4-MeU Excitation spectra,Varioskan Flash荧光检测器-光电倍增管（PMT）增益自动可调,AutoRange(自动调节)最广的读数范围和最好的灵敏度Manual range比自动设范围读数更快:High range 用于高浓度样品Low range范围较窄但灵敏度高Medium range 灵敏度处于二者间，因此所测浓度亦介于二者间,荧光模式技术参数,时间分辨荧光模式,Varioskan-TRF检测原理,蛋白活性分析时间分辨荧光技术,免疫分析(TRF-ELISA),多标记荧光模式,荧光共振能量转移FRET检测,Distance(),Transfer efficiency(%),时间分辨能量转移实验:Perkin Elmer LANCE,根据能量转移从Eu标记的抗体 到受体SA-APC的原理 使得受体发荧光,化学发光模式,化学发光检测模式原理,发光信号很微弱，需仪器具有很高的检测灵敏度，amol水平；荧光信号相对较强，一般检测器灵敏度在fmol水平,Luminesence:Chemi-luminescenceBio-luminescence,对于闪式反应类型（Flash type），仪器需配有自动加液装置全程跟踪快速动力学反应过程，保证数据的完整性有些实验需要先后加入两种液体，为保证无须中止测读即可进入下一反应，如dual-luciferase报告基因的实验。,化学发光反应类型-Glow&Flash type,Need Injector,single-and dual-luciferase reporter genes（荧光素酶）,化学发光模式技术参数,Varioskan微孔板格式,光吸收模式下可读：6,12,24,48,96&384孔板荧光模式下可读：6,12,24,48,96，384&1536孔板；覆盖了从实验研发到高通量检测的各种应用-根据通量要求，优化实验测定至不同板型高密度（孔数）板，提高了通量并减少了试剂用量，允许了更多的实验重复-能直接测量细胞培养板，定区扫描功能可对每一孔进行多点测量，从而保证了整孔读数。这对基于细胞类实验尤为重要，因为细胞常常不均匀生长,Varioskan内置分液器,内置分液器，可分1 1000 l液量，递增量1 l，优化动力学测量分液体积:1 1000 l，1 l 增量 适用板型:6 384孔板分液管嘴尺寸:D.tip 0.25(0.25 mm)可分 1-20 lD.tip 0.40(0.40 mm)可分 5-1000 1、分液和测量同步进行，使快速动力学反应在一开始即可被测量，如酶动力学,Ca 2+通量2、动力学测量的时间很容易被控制，可以使实验自动化，如DNA 定量(Hoechst dyes,PicoGreen)3、方便处理有毒液体减少处理有毒液体的时间 4、结果可靠，无人为误差，可重复性高,分液速度可调，可优化实验结果!,Varioskan 分液器-Ca2+流实验,Varioskan 分液器优势,5-10%better,50%better,Varioskan温度控制装置,Upper heaterUniversal tray frame96-well adapter,孵育器主要由两部分组成:固定的上部加热器 可移的通用托板盘温度范围（室温+4）C to 45 C孔间的差异性：0.4 C孵育器支持 24-to 1536-孔板上部加热器比下部稍热，防止板盖水汽凝结（可带盖检测）使用通用托板盘和特别的板适配器，可进行孵育 使用任何托板盘和适配器都能用上部加热器进行加热,1.,2.,3.,Varioskan操作自动化,与机械臂兼容，方便系统全自动化机械臂专用的托板盘，其设计允许机械臂方便地取放板 机械臂从上、左、右及前方都能进入机械手爪可从正面或侧面抓握SkanIt 软件带有特别的远端控制界面，可与LIMS 及全自动系统整合,Varioskan应用概述,光吸收检测功能免疫诊断：ELISAs 蛋白质定量：A280,BCA，Brafold，Lowery 核酸定量：A260,DNA，RNA，A260/A280 细胞增殖、毒性实验：MTT,XTT 酶活、酶动力学实验：Vmax and Km计算，内毒素检测 细菌生长检测：Bacterial Growth Assay 蛋白活性检测,荧光（时间分辨荧光）检测功能 报告基因实验：荧光蛋白（GFP），GUS 分子探针标记实验：PicoGreen,OliGreen,Nanoorange Ca2+流、离子通道 蛋白质-配体结合：-lactoglobulin 定点突变检测：SNP-detection TRF测量：Basic TRF Measurements,化学发光检测功能报告基因分析：萤火虫荧光素酶（luciferase）、-ga1、-葡糖苷酸酶 或分泌性碱性磷酸酶等ATP检测：水母发光蛋白：DNA探针检测：几种基于acridinium ester的诊断DNA探针 被用于极为灵敏的诊断传染病的检测发光免疫分析(LIA,ILMA,发光ELISA)：体外诊断方面，将HPR 和AP的呈色底物变成发光底物时，可将酶反应的灵敏度提高100倍,分析控制软件-SkanIt Software,1、可视化操作流程和图列表结构性能，方便用户进行仪器设置和数据分析处理2、实时显示数据（光谱扫描和动力学实验）检测结果3、内置多种数据分析方法，如背景扣除、多点检测、曲线拟合、Cut-Off、动力学分析、光谱扫描实验中光谱叠加/扣除、Ratio/Inhibition,Effective Dose and Quality Control 等4、完全兼容OFFICE，实验室自动化LIMS系统5、生命科学研发版本（Research Edition）和遵照FDAs 21 CFR Part 11 法则药物研发版本（Drug Discovery Edition）,我们的竞争对手有那些?-Tecan Infinite M200,Safire 2-MD SpectraMax M2,M5-Biotek Synergy HT,2我们的优势在哪里?-品质非凡的光学系统(四光栅,高能氙灯,石英光纤等)-在紫外荧光检测方面的极佳性能-独一无二的optical response compensation,可获得real spectral-光吸收检测的极佳性能,如基线噪音控制功能-极佳的化学发光检测性能,如低电流光子计数的光电倍增管,高敏模式,扫描模式-Up to 3 dispensers,Varioskan Flash,Infinite M200 价低,4 光栅,4 种检测技术，完全模块化设计,2个自动进样器如何竞争?-在Tecan之前介绍产品并教育客户-VF的指标要好很多，M200光密度检测分辨率只能达到0.01-M200有四个光栅，但质量如何?他们的光纤是玻璃的.-客户总想得到与他所付相当的产品,建议客户向Tecan询Safire2的价格,就可以知道为什么同样带4个光栅，并有2个进样器，而Safire2不带自动进样器，但价格仅是Safire2的一半f?-所有Tecan 产品列出的技术指标都是“典型值”,Varioskan Flash vs Infinite M200,Varioskan benefitsThe photometric performance of Varioskan is superior to SafireHigh concentration measurements Varioskan covers wider absorbance range,Fig.1.Varioskan vs.Safire:Absorbance linearity series,450 nm,384 well plate,Fig.2.Varioskan vs.Safire:Absorbance linearity series,405 nm,96 well plate,Varioskan Flash vs Safire2,Varioskan benefitsLow concentration measurementsGreat stability is needed for low absorbance readings Varioskan zero-level stability is considerably better,Varioskan vs.Safire:Baseline spectra:Empty Greiner UV-Star 96-well plate,Varioskan Flash vs Safire2,Varioskan Flash vs Infinite M200,Varioskan Flash vs Infinite M200,Varioskan Flash vs Infinite M200,Varioskan Flash vs Infinite M200,MD SpectraMax M5 在多功能检测仪器方面的强大品牌优势 文献和应用指导很多 5个功能(incl.FP),相同的价格水平如何竞争?-强调4个光栅 vs 2+cut-off滤光片,更好的信噪比 S/N，在消除光漂移方面可提高100万倍、更灵活的波长选择，不需要优化滤光片和光栅组合、在光谱扫描时不会有假峰、扫描速度快6倍紫外荧光检测方面的性能更好无自动进样器,无法检测钙离子和闪烁化学发光反应FP?应用范围有限,对客户是否必须?如不能在荧光检测方面得到好的结果，又怎能相信FP结果的可靠性?,Varioskan Flash vs MD SpectraMax M5,Performing same demonstration at customer site,Following to MolrecularDeviceApplicationnote#32Fluorescein 10nM(PBS ph8.5)200ulEx 485nmcut off filter 530nm scaning range 500-580nm MD said maximum S/N179 on 545nm,Data from National Institute of Health Science,Japan,GFP gene expression experiment,Instrument：Varioskan(Thermo)Ex：485nm Em：527nm bandwidth：12nm Yellow:Sample;white:Blank，Blank：0.061 SD：0.007 CV%：10.9,Instrument：Varioskan Ex：485nm Em：527nm bandwidth：5nm Yellow:Sample;white:BlankBlank：0.061 SD：0.017 CV%：28.7,Data from the Pharmaceutical Institute,Chinese Academy of Medical,GFP gene expression experiment,Instrument：Gemini XS(MDC)Ex:485nm Em:527nm bandwidth:9nmYellow:Sample;white:Blank，blank：2.074 SD：0.523 CV%：25.2,Data from the Pharmaceutical Institute,Chinese Academy of Medical,Varioskan Flash vs MD SpectraMax M5,Varioskan Flash vs MD SpectraMax M5,Varioskan Flash vs MD SpectraMax M5,i 应用Promega的DLR，推荐使用2个分液器（化学发光）,Varioskan Flash vs MD SpectraMax M5,Varioskan Flash vs Biotek Synergy,Biotek Synergy2 低价,多功能，2个自动进样器,SQ(super quiet)xenon lamp and DPR(Double Parabolic Reflector)xenon lamphTRF=CisBios product family for TR-FRET reagents and kits我们如何竞争?-在BioTek 之前介绍产品并教育客户-Synergy 并不是光栅多功能仪器,他只有一个光栅用于光吸收检测,我们并不认为他是竞争对手-发现客户的预算和真正的需求非常重要,我们可提供超强的功能，从而使我们的性价比更高。,Multiskan Spectrum,我们的竞争对手有哪些?-MD SpectraMax 190&384-Biotek Quant,Powerwave-Tecan Infinite M200我们的优势在哪里?-强大的比色杯功能 双比色杯，同时检测样本和空白 只有MSS可使用标准 50ul比色杯 只有 MSS带比色杯检测搅拌功能-读板的类型更多(6-384)-重要技术指标都优于竞争对手,MSS的光学系统,光源使用氙闪灯作为光源，氙闪灯提供光密度和荧光检测所需的宽广的光谱范围，脉冲功率为300Hz,只在测量时才激活。一次检测根据检测质量的要求可包括1-64次闪烁脉冲。10年左右 2万多人民币衍射次序选择滤光片激发衍射次序滤光片实际就是Cut-off 滤光片，用于阻止不想要的单色器的谐波发射，正确的衍射次序滤光片是自动选择的。单色器单色器是基于衍射光栅，光栅的凹槽表面将不同颜色分散至不同的角度，通过光栅的转动来选择不同波长的光。带宽选择带宽是由单色器的狭缝宽度来设定的，2nm带宽通过控制狭缝宽度来产生。光纤光由石英光纤传到测量部件，4根光纤通到微孔板光学部件，2根光纤通到比色杯部件。测量部件下部测量部件集中光束并传到样品，光穿过样品后由上部测量部件收集进入检测器。,Multiskan Spectrum,与MD竞争-强大的比色杯检测功能 双光束同时检测样本和空白 标准 50ul cuvette 只能用于 MSS 搅拌功能用于比色杯检测-检测更多的微孔板类型(6-384)-更好的温控功能-光程校准功能更好 Recommend the model With Cuvette first!Control the Price You Offered!,Molecular Devices SPECTRAmax Plus 384(MDC)可用于比色杯读数，但比色杯基座是单光束的，空白和样本的检测分开进行，并不来源于同一束光，因此检测结果会有误差Multiskan Spectrum带有双光束比色杯基座，同时检测样本和空白，并对样本自动减空白，读数无误差，方便用户使用。方便客户的使用，有一些其他品牌的分光光度计需要先插入空白比色杯做 空白校准，然后取出空白杯放入样品杯进行检测，而MSS的操作则更方便 和快速双光束操作在比色杯动力学检测中有很大的优势，在每次的检测中，空 白都可以自动被扣除只能检测 96-和384-孔板Multiskan Spectrum 可检测 6-384 孔板，在细胞生物学研究领域648孔板的使用相当普遍，特别是在用光度法检测细胞增殖和细胞凋亡时，培养的细胞都是放在大孔板内的。配合软件所提供的大孔板区域多点扫描功能，可对细胞的不均匀生长进行精确的检测。,Molecular Devices SPECTRAmax Plus 384(MDC)必须同时用微孔板和比色杯对样本检测以后才可计算光程校准因子。在975nm处检测结果对温度相当敏感，微孔板和比色杯的结果不具有可比性，变异太大。因此MD采用了在1000nm处进行检测来确定光程校准因子的方法，但1000nm已是仪器光谱范围的极限，在此极限检测的结果是非常不稳定的，由此而计算的光程校准因子当然也就存在很大误差。MSS 只需要检测微孔板就可计算光程校准因子，不存在975nm的结果不稳定的问题，另外在仪器中内置了17种常用溶解核酸和蛋白溶剂的光程校准因子，极大方便了用户在高通量核酸蛋白检测领域的应用，同时也确保了光程校准因子的准确性。,Molecular Devices SPECTRAmax Plus 384(MDC)不能使用50ul比色杯，因此对极低量样本的处理能力不强，当然它可以放在微孔板中检测，但涉及光程校准及溶剂种类的问题，操作较麻烦。MSS可在比色杯中直接检测50ul样品，在核酸样品量很少，浓度又比较低，不宜稀释的情况下操作更方便。MSS可在微孔板动力学检测的间隔之间可进行快速比色杯检测MD无此功能MSS具有比色杯搅拌功能,可进行温度调节的比色杯基座MD无此功能,Multiskan Spectrum,与BioTek竞争-Quant无温度控制功能-MSS的指标更好，如带宽&波长准确性-Biotek需手工计算光程校准因子-检测更多板的类型(6-384)-更好的比色杯检测功能 双光束比色杯检测功能 标准比色杯50-1000ul vs 2ml Biocell 比色杯检测中的搅拌功能 Recommend the model without cuvette for better price!,Bio-Tek POWERWAVE XS无专门的比色杯基座，不能使用标准比色杯，只能用专配的BIOCELL（如右图）。这种杯子放在适配板上，使用承载酶标板的载板架进出仪器，无法对极微量核酸样品（50ul)进行检测。而且这种比色杯只能从Bio-Tek公司购买，对用户的使用非常不便。软件内不带光程校准因子，需用户手工输入。Multiskan Spectrum可使用标准比色杯，而且适用于50ul的比色杯。如客户处已有标准石英比色杯，则不需要象Bio-Tek公司一样要求客户购买专用的耗材，让客户使用已有的杯子就可以了。节约客户的时间和金钱。MSS软件内自带17种核酸常用溶剂的光程校准因子，方便用户使用。,Bio-Tek Bio-Cell 适配板组件,Bio-Tek POWERWAVE XSBio-cell 部分为单光束检测，一束光同时穿过8个样本，期间光的损耗造成结果的不稳定。Multiskan Spectrum带有双光束比色杯基座，同时检测样本和空白，并对样本自动减空白，读数无误差，数据稳定，方便用户使用。Bio-Tek整个产品系列最小带宽为2.4nm。其中只有PowerWave 可检测6384孔板，其他型号只能检测96和384孔板。MSS的带宽为2nm,检测更精确。能检测板的类型最多，为6384孔板。MSS可在微孔板动力学检测的间隔之间可进行快速比色杯检测BIO-TEK无此功能MSS具有比色杯搅拌功能,可进行温度调节的比色杯基座BIO-TEK无此功能,Multiskan Spectrum 优势总结,光谱范围广所有的检测方法从紫外到可见都可适用任何板的类型6 384孔板灵活、通用适合各种实验室双比色杯基座实时减空白，特别是在做动力学检测时，空白随时间变化的情况下在光谱扫描时，同时扫描样本和空白并自动减空白 在微孔板动力学检测的间隔之间可进行快速比色杯检测非常灵活&二台仪器的功能合二为一搅拌功能,可进行温度调节的比色杯基座为了达到更好的温度控制，可直接在比色杯中进行动力学检测可命名和保存光程校准因子在进行程序设置时，方便地选择其中的光程校准因子用于所做实验,光吸收、荧光检测模式比较多功能酶标仪性能,FI performance,Abs,Filters,Double Monochromator,Quadruple Monochromator,Elisa Reader,Microplate Scanning,Infinite M200,SpectraMaxM2,Varioskan Flash,Thermo,Tecan,MDC,Bio-Tek,PE,Victory,Microplate Spectra-photometer,Safire2,Synergy HT,Varioskan,Genios/pro,Infinite F200,SpectraMaxM5,荧光、化学发光检测模式比较多功能酶标仪性能,FI performance,Lumi,Filters,Double Monochromator,Quadruple Monochromator,AP,HRP,Luminor,fmol ATP,Infinite M200,SpectraMaxM5,Varioskan Flash,Thermo,Tecan,MDC,Bio-Tek,PE,Victory3,amol ATP,Safire2,Synergy HT,Infinite F200,SpectraMaxM2,