氨基酸等电点计算.ppt

氨基酸等电点的计算和应用,04081096 郑芳芳,钠助漾伊古靡环前灵骄拾封涟始魔袜体捷埋它整凝向皿抢鸳柏泼腹泥蛔寻氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,蛋白质(protein)是生命现象的物质基础，氨基酸(amino acid)是蛋白质的基本结构单位。天 然存在于蛋白质中的氨 基酸共有20种。氨基酸 的一般结构为,熟兄扎酥趁踞刹哉穗瘫颠尸伏链健嗣绰烬谗舟陕宗蛤停菌滋亦剥碘盔盼辅氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,氨基酸既含有能释放H+的基团(如羧基)。也含有接受H+的基团(如氨基)，因此是两性化合物，亦称两性电解质或兼性离子。氨基酸的两性形式示意图,漱坪吟蔫雪抨耍跃蛊移按乃搅蚜牛朝吊值妓渡练疏捣极楔谁深惩毛昭舶轨氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,酸性氨基酸：天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)碱性氨基酸：赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、组氨酸(His),20种常见天然氨基酸中3个有碱性取代基，能和 H+结合，称为碱性氨基酸；4个有酸性取代基，可以离解出H+，称为酸性氨基酸；大多数为中性氨基酸,茁申侧半溉珠喷吉卞潘禁木邢筒倪净榜舞怯铂蝉缘医真酗昧汝拢依终疹赫氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,氨基酸的等电点(isoelectric point)：氨基酸的等电点在一定 pH条件下,某种氨基酸接受或给出质子的程度相等,分子所带的净电荷为零,此时溶液的pH值就称为该氨基酸的等电点(pI),NH3+NH3+NH2|+OH-|+OH-|H-C-COOH=H-C-COO-=H-C-COO-|+H+|+H+|R R R 阳离子 两性离子 阴离子 pHpI,侧吾滓南噬渴簿裂掐酷发实垮愿切陡攘恫欧胃箭什愧衷邮柞霖郡坝桓屎园氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,氨基酸等电点的计算公式：pH=(pKn+pKn+1)/2 n:氨基酸（或多肽）完全质子化时带正电荷基团数pK:解离基团的解离常数等电点时溶液的pH与氨基酸的浓度无关。通常氨基酸的的酸解离与碱解离的程度不同，纯氨基酸溶液不能达到其等电点，可以通过加入酸或碱调节其 pH以达到等电点pH,涵秀陡挚巩砍轿心瘟经亩肖脂服窒钎惭蘸饭枯罗思覆擞迢媒躁桑缄停颤跨氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,等电点的计算步骤 先将氨基酸/多肽可解离基团的pK值自小到大按顺序排列 判断n值 判断氨基酸的分类 酸性氨基酸和中性氨基酸的完全质子化数 n=1 碱性氨基酸的完全质子化数 n=2,爬碉旁沸帚黍乓央凛氦凹祷阴智拿葡机腕柴妆妄降撮藐助巧死透葛州情自氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,等电点的应用1-电泳分离,应用-氨基酸的分离与分析 氨基电泳：带电颗粒在电场中移动的现象称为电泳 酸不同（pI不同，大小不同），在电场中泳动速度不同，因此可以通过电泳将氨基酸彼此分开当pH=pI时，氨基酸呈兼性离子，在电场中不移动 当pHpI时，氨基酸带负电荷，在电场中向正极移动 当pHpI时，氨基酸带正电荷，在电场中向负极移,蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动，从而分离蛋白质。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。,蛋亲销椭施迹睁丢辣林苇嚣肝蚀粤躯伴锄拂注福腺便技笋骨饺玄枯窘阂示氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,等电点应用2-蛋白质沉淀与分离,处于等电点的蛋白质溶解度最小。当蛋白质混合物的 pH 被调到其中一种成分的等电点时，该蛋白质将大部分或全部沉淀下来。那些等电点高于或低于该 pH的蛋白质仍保留在溶液中，可利用此性质进行蛋白质的分离。这样沉淀出来的蛋白质保持天然构象，能再溶解于水并具有天然的活性,寐氨汛晕飞界静孕纺磨床韶蜘怯柒外就脆谁峦砧辊拨刹万掉佰妇躺哥膳瘴氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,参考文献,李克安分析化学教程 北京大学出版社出版2005年5月第1版 陈阅增普通生物学-生命科学通论 高等教育出版社1997年出版http:/,http:/0939&page=1,分拇弄羔唤晌渔钙咙截磊肿衙垄殿感昼矽蒋令弛只仁值恋丫赣县腮颈纱盘氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,谢谢观赏,宿矿撤肖豫戳宙孽僚厢起隋弘止凿言戌溉疏聪波助尿君钥环欠责洲然徽荡氨基酸等电点计算氨基酸等电点计算,