《动物细胞工程》PPT课件.ppt

2.2 动物细胞工程,动物细胞培养,动物细胞融合,生产单克隆抗体,核移植技术,动物细胞工程技术,其他动物细胞工程技术的基础,2.2.1 动物细胞培养和核移植技术,动物细胞培养技术,（一）、概念 是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。,（二）、过程,转入培养液中进行原代培养,相关的概念：1 细胞贴壁：悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的特点 2 接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象 3 原代培养：人们通常将动物组织消化后的初次培养。,归纳：,取 的组织、器官,细胞悬浮液,酶,贴满瓶壁的细胞,单个细胞,动物胚胎或幼龄动物,胰蛋白,加入培养液培养,传代培养,原代培养,思考题：,1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？,因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。,成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。,3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？,催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。,4、细胞膜的主要成份是什么？,蛋白质和磷脂,5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？,能,6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？,7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？,注意时间的控制,不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,1、无菌、无毒的环境,保证细胞顺利的生长增殖,（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）,（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、动物血清等。）,（四）、动物细胞培养的条件,2、营养,3、温度和PH,哺乳动物：36.5 0.5,多数细胞PH:7.27.4,培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5%CO2）,4、气体环境：,细胞的全能性,大量的细胞,植物体或组织,培养结果,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物组织培养和动物细胞培养的比较,1、许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。2、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人移植。3、培养的动物细胞用于检测有毒物质。4、医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。,（五）、动物细胞培养技术的应用,（一）、概念：,将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.,克隆动物：用核移植的方法得到的动物。,动物细胞核移植,（二）、分类：,细胞分化程度低，恢复全能性容易,细胞分化程度高，恢复全能性困难,体细胞的核移植过程,（四）、体细胞核移植技术的应用前景,1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。,2、保护濒危物种,3、转基因克隆动物可以作为生物反应器来生产医用蛋白质，另外还可以作为组织器官的移植的供体,（五）、体细胞核移植技术存在的问题,1、成功率底下。2、绝大多数的克隆动物存在着畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。3、克隆动物的食品安全性问题存在着争议。,2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是（）A获得不死性的细胞 B10代以内细胞 C原代细胞 D传代细胞,1、动物细胞工程技术的基础是（）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,课堂反馈练习,3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（）A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过程中D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变,B,4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）,无毒的环境 无菌的环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O2，不需要CO2 CO2能调节培养液PH,A、B、C、D、,D,5、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。（2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是。,动物胚胎或幼龄动物,剪碎,胰蛋白,使细胞与培养液充分接触，便于培养,