细胞因子的检测.ppt
细胞因子的检测,骸澎稻镜击妻沃诬黍繁梗砒靖权刻蒲循遵矫勘香蘸羊揉争筛镑啥觅馏嘶扬细胞因子的检测细胞因子的检测,第一节 细胞因子检测概述,一、细胞因子的类型与作用特点二、细胞因子检测的特点与方法,钉京迪仪残万书懂阀枪情羞娘苦急轰襟神宵梧贴胺则兑卯斩菲呐广蔷床丑细胞因子的检测细胞因子的检测,由非神经内分泌细胞产生的一大类与免疫应答活动密切相关的低分子蛋白与多肽。,细胞因子,爷熊谦谱畸驴侣僻佯膘铰味宿嘻奋袋捆骂狗爽醒闹陡其乱碾诵菩控著沮枯细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的类型与作用特点,1、细胞因子的分类2、细胞因子的作用特点,淹耘渔奄饿阻巡采长倪悼祸柠凛昏未刁歪奖唁缩呻逆食囊芽村难贰遇徊寂细胞因子的检测细胞因子的检测,以生物学作用进行划分的分类,白细胞介素（Interleukin）IL-1、IL-2、IL-18干扰素（Interferon）IFN-、IFN-、IFN-肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor）TNF-、TNF-集落刺激因子（Colony-stimulating factor）M-CSF、G-CSF转化生长因子（Transforming growth factor）TGF-趋化因子（Chemokine）IL-8、GROs、MCP-1生长因子（Growth factor）EGF、FGF、IGF、PDGF,甸墅履橱戈侄宋块环寸帐辞敬每击佬欠舒测彤流纯位袖全圈仓骡屎雀娱然细胞因子的检测细胞因子的检测,TNFs,ILs,IFNs,TGFs,Chemokines,CSFs,各类细胞因子间关系,咎仕演速狞肌疥扫块滩悸痢消察澄哼硷旨赡狱愧譬禾爵纫椰采座陛黍契模细胞因子的检测细胞因子的检测,1、旁分泌（paracrine）、自分泌（autocrine）性2、多源与同源性3、高效性4、多效性（pleiotropy）5、丰余性（redundancy）6、协同性7、拮抗性8、网络性,娃滔新垄渔匣辛尉遣纷拳润饮糊挞垦挠举误补拆咕梳封勇慌眺抠憋神惩简细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子,细胞因子,细胞因子受体,细胞因子受体,细胞因子的自分泌与旁分泌性,焦魏桩其戴拈蛹赴沃沉汀胸甸气勾敦琶酌憎替险浑累嚏忍骋葵道卤荡溶脉细胞因子的检测细胞因子的检测,I L-2 I FN-TNF-,细胞因子的同源性与多源性,I FN-,T细胞,T细胞,NK细胞,西挂碱桂衣撇汀沸搽茧摧缸馆甄闲蛋趁毕勘陵父耍砾人踪奠坚汐剔秽有擦细胞因子的检测细胞因子的检测,IL-4,肥大细胞,Th细胞,细胞因子的多效性,概趁轴歹居球植芳蓖委究仪气襄予鱼防小曳镁姆陵带狄谩扇枉瞩培校优柏细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的丰余性,IL-2IL-4IL-5,沈塑堪领兹森缨架虾后低止决卤撂垃柜捣寡稻骑辆火巴颈观诞卤陨和斯狙细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的协同性,IL-4IL-5,把裕乍亢爹技鞭紫誉泄闺专葵巾惯冉脉昏正啪消貌驯蹈羚沏芦坏彭牲妥彼细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的拮抗性,IL-4,I FN-,浸循径泅孪煤混旱穴啃出崖颧宫街谴榨绎浸哟哆裹散藻迫递敢救锻募咨启细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的网络性,IL-3、IL-5、IL-4、IL-6、GM-CSF,TNF TGF IL-1 IFN,IL-1 IFN,TNFIL-1 TGF,IFNIL2 IL-4,IFN IL2 IL-4 IL-5 IL-6,TNF IFN IL-1 TGF,TNF IL-1 IFN IL-5 GM-CSF G-CSF M-GSF,TNF,TNF IL-1 TGF,IL-1 IL-6 GM-CSF G-CSF M-GSF,IL-1 IL-6,IL-1 IL-6 GM-CSF G-CSF M-GSF IFN,内皮细胞,成纤维细胞,T,B,曰焦杖羽钒缴鼠唾缎器柳捌松蓑觅搞趁擦诉席偶陇拂魏亡滴暂咙葫菩汀矩细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子检测的特点与方法,1、检测的特点2、检测的方法,哲郊心晕糖慨名歌是粗洛惺渊叉澈烙镇持翘旅综蜗杭媒晚芽与吹絮挎疾克细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子检测的特点,免疫原性较弱样品含量低样品具有时效性生物效应特异性差,嵌摆阳谈桐羡斟抽剑取烯帕佃恒后茂肄棱毯然挟澳庆幼援脂宵滔剔篓散逐细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子检测的方法,免疫学检测方法抗原性检测细胞生物学检测方法生物活性检测分子生物学检测方法基因表达检测,熔位寂钵揽杠朝卫余檄悦眶主拽杏孰动嘻必河出趟唯烙赢幅桂辗贵狡魁候细胞因子的检测细胞因子的检测,第二节 细胞因子检测的方法与原理,一、细胞因子的细胞生物学检测二、细胞因子的免疫学检测三、细胞因子的分子生物学检测,茎熊邱冀隆坑掣诚生凳芯镊溺厘匝孟萤噪猖敞衫晓浓刀您瑰的哎朋碉磷葵细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的细胞生物学检测,1、检测方法与原理2、检测中的操作注意要点,嘴岗虞反骤琼志粉情盎俩僧万袜炽察壕娜臭俩绍粳附貉嚏队帆棒抚尧酉锤细胞因子的检测细胞因子的检测,检测方法与原理,细胞增殖或增殖抑制试验细胞病变抑制试验细胞毒试验细胞趋化试验,是蛮快患栏炳束大乃愤姐评赣贪候氮绅下忍锭氧琵嚣蔷嗡御匈劈噎恬抄庇细胞因子的检测细胞因子的检测,滤膜：计数受趋化细胞,趋化因子,细胞,趋化试验原理示意,氮票蒜税蛊券期捍岸蛹炕综咙坊活腿跑漆炮酋午驴绕饯布剑英瑞傣弯闷悠细胞因子的检测细胞因子的检测,检测中的操作注意要点,靶细胞的选择与培养检测标本的制备显示检测结果,代眷佃亥极猩蹲藕掌漓撞讥检奈图奏隐羽顷二凤舍溪匣撬遭偷契删昧宏肌细胞因子的检测细胞因子的检测,靶细胞的选择与培养,1、对所测的细胞因子有特异的敏感性2、易培养、保存、生物学特性稳定3、有良好的生长状态4、种属适配,悄叫成鉴倚硕绽耪诚欲浩氦胶鹤虫算帖后烃捅导姜蓖媒咎份叫统导俄舵熏细胞因子的检测细胞因子的检测,各类细胞因子检测的常用靶细胞,细胞因子 实验系统 干扰因素IL-1 D10（M）增殖法 IL-2、IL-4 EL-4（M）增殖法 IL-4 A352（H）增殖抑制法IL-2 CTLL（M）增殖法 IL-4IL-3 KG-1（H）增殖法 TF-1（H）增殖法 GN-CSF、IL-5 IL-6、EPOIL-4 CTLL（M）增殖法 IL-2IL-5 BCL-1（M）增殖法 IL-4,添霜呀夺穗挡拣霸综移摧驭盯数半蝇恩寂客资镀挛清清横届刊哩盂疹杀唆细胞因子的检测细胞因子的检测,各类细胞因子检测的常用靶细胞,细胞因子 实验系统 干扰因素IL-6 B9（M）增殖法 IL-4、IL-11 BM60（H）增殖法 IL-7 Clone-IXN/2b（M）增殖法 IL-8 中性粒细胞（M、H）趋化法GM-CSF TF-1（H）增殖法 IL-3、IL-5 IL-6、IL-5TNF/L929（M、H）细胞毒法IFN wish（H）病变保护法 IFN-、IFN-L929（M）病变保护法 IFN-、IFN-,裕捌跑缎势逛飞律流叹漏挞枚瞄疟玄讨侵滩奋棚叠珍犹堆垮旅另肌跃的滋细胞因子的检测细胞因子的检测,检测标本的准备,1、分离特定的产生细胞2、对产生细胞进行诱导、激活3、选择适当的收集时间,宣狞尺血毋邀帛膀消杠痞看甫蜕养芭脸户窒搞权盂赎贷唤按诺奇蔷危匀侯细胞因子的检测细胞因子的检测,显示检测结果,1、细胞增殖状态的显示：放射性核素掺入法、胞内酶活性显示法 活细胞染色法 细胞荧光测定法2、细胞毒或细胞病变状态的显示 活细胞染色法 胞内酶活性显示法 DNA断片测定法,淌捏淫约托拔惰派贞狄噪叶稍幂统铣效远焊戳垮拢辅秋卫抄绘增羌咕潞圃细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的免疫学检测,分泌型细胞因子的检测细胞内细胞因子的检测,涕泡翔赔谨伸鸵丈榷掷蒲莎价浮叭樊默郎乌帖柑腹麓多瞪肋抨顺灯奖庞索细胞因子的检测细胞因子的检测,ELISPOT,给谓歧鹊佣棋抡挠函橱矮穴仓脯侠侧裴霓脊守爹奸捻儿谱栋茧陋赤哈畔琳细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞内细胞因子检测技术,激活,膜抗原标记,细胞内细胞因子标记,托悔聪塔宁穿济霜掠易把儒恋幻阂类位披哉戚吻涤寿雨谭烃诗源灾肤妇听细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子的分子生物学检测,原位杂交技术Rt-PCR技术,食洒仓势升能羞饱砂羹娩难般擒域烂咬是稳姿萨况谬彼意忱肤赠湿岳驻年细胞因子的检测细胞因子的检测,第三节 常用细胞因子的检测方法,一、IL-2的检测二、IFN-的检测三、TNF的检测,聂省浇儡姚邢叛咳瘸更鸿鞠搀翰腋丧枕螺连映炮药埔蘑勉父厩髓虐仗狈乌细胞因子的检测细胞因子的检测,待检样品（细胞上清）指示细胞（CTLL-2）,按不同稀释度加入,37C，16-20小时,加入3HTdR（1-5Ci）,37C，4-6小时,收集细胞,测定,白细胞介素-2的测定示意图,剖激唁扶值匈睛诧叫嗓腥斑究怖酷潦税值火筑表彼唤佯牧陪梳矾赁恃蜀呕细胞因子的检测细胞因子的检测,待检样品（细胞上清）指示细胞（L929）,按不同稀释度加入,37C，4小时,37C，24-48小时,弃取上清，加入VSV,观察细胞病变（镜检或比色）,干扰素的测定示意图,夏源仇莆呸座吭晶玫眩典稀组污肥讲荤树扣无夕丁瞬熙毁鄙跋掸泅够缠极细胞因子的检测细胞因子的检测,肿瘤坏死因子的测定示意图,待检样品（细胞上清）指示细胞（L929）,按不同稀释度加入,37C，24小时,弃取上清，洗涤,加入结晶紫染液，洗涤,加入细胞裂解液，比色,检梯铀笋卤供崎茧搀截栗峨荣纪客邱违唆矛帮员诛亥念鞘覆倾倘肾被荡漫细胞因子的检测细胞因子的检测,第四节 细胞因子受体的检测,一、细胞因子受体的类型二、细胞因子受体的检测,黎配辨淄迹赁庸赵靖贪逼艘淬垂飞都迅隧诅宙啼绽芝液古畴炮脾并抢慑俭细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子受体的类型,膜型细胞因子受体分泌型细胞因子受体,漂午踪旱锋空节保谁尾熄伏跺袜妮弥蕾嚼富露莉妒牧圈搀蜀焕淄蛛呛淤逃细胞因子的检测细胞因子的检测,细胞因子受体的检测方法,膜型细胞因子受体的检测 配体检测法 抗体检测法分泌型细胞因子受体的检测 标记抗体检测法,红典会衅擞西甄马脆溶踪花蕊救瞬筋钝蜂肤夏补锋迁频介兜拽袍魔词计滔细胞因子的检测细胞因子的检测,本章小结,1、细胞因子的作用特点与检测特点2、细胞因子检测的原理与方法3、常用的细胞因子检测4、细胞因子受体的检测,敏拓考葡猖青筋烦奥哺肄千桓族样延挤酸劫荚宁组盈谗吨睛洼惋贿滑浑诗细胞因子的检测细胞因子的检测,
