实验2植物组织水势的测定(小液流法).ppt

植物生物学实验,实验二 植物组织水势的测定（小液流法）,1.了解测定植物组织水势的方法及其优缺点2.学习用小液流法测定植物组织水势的方法,目的要求:,植物组织水势的测定,水势表示水分的化学势，象电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向低处。植物体细胞之间，组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。,植物组织水势的测定,液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法：压力室法气相平衡法：露点法,植物组织水势和渗透势的测定方法：,水势测定,冰点降低法,渗透势,蒸气压渗透压计法,植物组织水势的测定,一、液体交换法测定植物组织水势 小液流法,小液流法测定植物组织水势的原理？,问题：,植物组织水势的测定,（一）原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换：植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水，外液浓度变大；植物 S 若两者相等，则水分交换保持动态平衡，外液浓度保持不变；植物S,植物组织水势的测定,2、同一种物质浓度不同时其比重不一样，浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。,植物组织水势的测定,【实验原理】,植物组织水势的测定,溶液渗透势的计算：S=iCRT 式中 S溶液的渗透势，以MPa为单位；R0.008314MPaLmol1K1 T绝对温度，即273+t；C溶液的摩尔浓度，以molkg1 为单位 i溶液的等渗系数，蔗糖=1。,植物组织水势的测定,（二）实验材料,植物组织水势的测定,【用具】试管架；试管;打孔器;毛细管；镊子;青霉素瓶【试剂】蔗糖溶液 甲烯蓝粉末,植物组织水势的测定,（三）操作步骤1.配制不同浓度的蔗糖溶液2.用打孔器在绣球花的不同部位打100-200片，混匀，每个青霉素瓶各放入15-20片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片）3.从配制好的试管中各取2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中（用一只移液管由低 高，不要润洗）。放置2030min，期间摇动数次，以加速水分平衡。,植物组织水势的测定,4.染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致）5.观察液滴升降：用毛细吸管取青霉素瓶有色液 插入相应试管中部 缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴蓝色溶液，轻轻取出滴管，观察蓝色液滴的移动方向并记录。（用白纸划一直线置于试管背面，方便观察）,植物组织水势的测定,毛细管放置稳定,挤出小液滴,取出毛细管观察液滴升降,静止不动,液滴,植物材料,溶液浓度变大,溶液浓度变小,溶液浓度不变,w S,w S,w=S,6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势。,植物组织水势的测定,具有平衡浓度结果,植物组织水势的测定,无平衡浓度结果,植物组织水势的测定,错误结果,植物组织水势的测定,结果是否正确，为什么？,植物组织水势的测定,结果是否正确，为什么？,植物组织水势的测定,注意事项：,所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结果。叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。,思考题：1试述小液流法测定植物组织水势的原理。2.小液流法测定植物组织水势时，为什么操作时，应强调所用试管、毛细管应保持干燥？打取小圆片并投入到试管中时动作应迅速？加入甲烯蓝时不能太多？,植物组织水势的测定,