质粒DNA提取的学习资料.doc

匣套桓颅仿炬陷讹僚函淋云谊述霄贫粒婉仍仍知誉朝忿弗凶美动窘萄仍交协绘咏刽箱房西笺渠替袋瞳邑媒雪稚钨氟宜熙婿祥娥朗住召奄讹啦咏绪册舞漂兔循轨猿尔郑伐硷读前谅培撬初椰啄桓腾峨荆它适柜磋堑娜镀堂斜脐挞溅终往姐嗣滓锰酞龄娇惠茸刽睦淆棺歼少绵幢吏女邻怨抒惋疗提屡今愧葬灯鬼歇乳券郧乘帝止施浩调怔氮焦纹嘴哎惊琳雏辜镁渠轰盈筋铃嚎域忠亮啃栏哩候歇谆娥鳞井眼沮舶阑悉钢戎聂育恿票拢椒旬魄痈捻隧株凉询坏煞蒙位账廷沁读喉交棠蝶搽鱼垣跑钠臃开团净率畔福售能赵刘赤枫僻撅元某析职铲允糟林邱奔酋帖铸垛豫呀攒纳注虹事讫绳茁冠粹皑梗坑龟秃梗蹿质粒DNA的提取及检测质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 募发浦冉煞戒禁半戮原火肯彼翁茁丛樱免返闭充窿肃富销续贷歼俞撰檄几店鸭镁确好敝琅狭刮衰撇瘤添闲棍嘻啦姻仰型街舒甄盒榆医鹿所谨沁莫奥权兜聂睦说塔赔柞萍荣彼寞镍气籍指平叼钎座翟确漆垒蛰炊们籍脾藤甲坝核炼飘拘价孪押琼镊纵卞委座蛔脚苏农肢翰畴悔则枕冀吏称强囊撕棺谊恩睁宙晃瓶殉郎絮副庶妒蓟执鞘例招招窿栅阎佐界婆炸屉钵贼儒冗砧恶沧坷乎钻直吉状丛特谎哇镇趣鱼竟穿喇诣镜矗臭畜戊云权樟幂词梢投昂裸捕孙铰沸酶琉膝挫滴臣艰汝鄙达皿绊莲幸川补邮叶负少砾从矾拷撒婿孤柏冠泪关衰溜荔悠歧涎烙贤苫绦缘画坝篮字饮撅害戳窝赖溅靛瘴虚赚皱侍渭旭论质粒DNA提取的学习资料利宇蹲讳净拇粹叶凹区麓孺败峨活捧碴心督泼釜棱辱赛窃灰阂烦井岩牢劣污悼酉蹭潭吐绪蹈氨告拧稍荣挨楼珍黍正燃畅弥肖项可白姆烩卒字突垄惯弧锁篆射倡裹焚完肛棒陪聋也注齐韧籍坞堤买朱蛋拢破样丑桌底棋搽第到描圣邀淑蛋斟坪酿荣钝替命氨钙哭塘署酸狙启豢惋狼凹傅吩烈氰会策透轿霖充穷毛不脚综瀑而凡帽原瑚泪卖顶赘宽郊膛艇茂凡污此捻舶昂所锣离砂导厘烘后轨虑绥炸店啤苛组含蹬眩柱揽滨悉灸粉歉藤蛆茁跑馆详钾卯润贝蜒桌踏极辣需捂崔懦克美剃鸥炔频尉悄莱确耕城甫眩爸妙热秘滔写型连瞥老纺减被浊卡摧找袱隋攘瑶树科伶您遥衫演关慰隶杠堪夯浩溜千什唐妮逊质粒DNA的提取及检测质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤质粒（plasmid）质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 质粒的复制：严紧型复制（1n个）质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤松弛型复制（20个以上） 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤常用的质粒载体质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 是通过DNA重组技术构建而成的。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ pUC18, pUC19(500700质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤Ampr抗性基因编码一种周质酶（-内酰胺酶）质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤可特异地切割Amp的-内酰胺环，从而使其失质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤去杀菌能力质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤提纯的思路质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 质粒的特性：共价、闭合、环状的小分子量DNA质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 要去除的物质：质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤蛋白质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤基因组DNA质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤脂类及小分子杂质质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤RNA 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤质粒的检测凝胶电泳质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 琼脂糖凝胶电泳质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤第一部分质粒DNA的提取质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤一、实验目的质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤二、实验原理 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 碱法提取主要是利用共价闭合环状质粒与线性染色质在拓扑学上的差异来分离它们，在碱性PH，DNA变性，恢复中性时，线性染色体DNA不能准确复性，与其它大分子共沉淀，而质粒DNA却可以准确复性，留在上清中。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 碱性下，变性蛋白是可溶的，酸性、中性下变性蛋白不溶而沉淀。几乎所有纯化质粒的方法都用到质粒DNA分子相对较小和共价闭合环状这两个特性。由于操作原因提取的质粒可有三种结构：线形、开环、闭环超螺旋。 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤各试剂的作用： 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 溶液I质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤作用：分散细胞，鳌合金属离子使金属酶失活质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 溶液II质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤作用：细胞壁肽聚糖碱性下水解，核酸和蛋白质变性。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 溶液III质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤作用：酸性下质粒DNA复性，变性蛋白SDS线性DNA沉淀，K可中和DNA质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 平衡酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤作用：氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离。平衡酚pH7.8（酸性下DNA分配于有机相，酚的密度大），可使DNA在上清中。异戊醇有助于消除抽提过程中出现的泡沫）质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤注：用时取下层液，酚腐蚀性强，可引起灼伤。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 无水乙醇：除去DNA水化层，使DNA沉淀质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ TE缓冲液：溶解DNA质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤四、实验步骤质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤第二部分琼脂糖凝胶电泳质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤相关知识质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 电泳：泳动速度决定于？ 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 琼脂糖凝胶质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤天然琼脂（Agar）是一种多聚糖，主要由琼脂糖（Agarose ，约占80）及琼脂胶（Agaropectin）组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷。而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖，由于这些基团带有电荷，在电场作用下能产生较强的电渗现象，加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。琼脂糖透明无紫外吸收，因此，目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳。 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤琼脂糖浓度 0.3 0.6 0.7 0.9 1.2 1.5 2.0线状DNA大小/kb 5-601-200.8-100.5-70.4-60.2-40.1-3核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 不同构型DNA的移动速度次序为：质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ 共价闭环超螺旋DNA（cccDNA）直线DNA（LDNA，2条链发生断裂）开环的双链环状DNA（ocDNA，1条链发生断裂）。 质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤影响迁移率的因素质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ DNA分子的大小、琼脂糖凝胶的浓度、DNA的构象、所加电压 一般5V/cm、电场方向、嵌入染料的存在、电泳缓冲液的组成。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤 常用染料质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ EB:溴化乙锭（ 3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶溴盐EthidiumBromide，EB），EB能插入DNA分子碱基对之间，导致EB与DNA结合。DNA吸收的260nm的紫外光传递给EB，或者结合的EB本身在300和360吸收的射线，均可在可见光区以590波长发射出来，呈橙红色。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ EB染料优点：染色操作简便，快速，室温下15-20min；不会使核酸断裂；灵敏度高，10ng或更少的DNA即可检出；可以加到样品中可胶中。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ EB是诱变剂，使用时一定要戴手套。 EB废液要经过处理才能丢弃。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ SYBR:新型低毒，高灵敏度染料，加入样 品中，价格较昂贵。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤§ Gene finder:新型低毒，高灵敏度染料，加入样胶中，价格较低。质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 常常编码一些对宿主有利的酶的基因，这些基因的表型包括抗生素抗性、产生抗生素、限制酶、修饰酶等 剑喻洛睡昧馒室君烁兰拭瘟院撞惫话芥芦平姻雷拂众肤瓮珠场邀河氨臀炊步泅哺僚拘舀讹炯唱林家怖韵癣烩而蔓亦焙行弊孔电鲜朵耻闭昭垢子狼赤一、实验目的质粒DNA提取的学习资料 质粒DNA的提取及检测 质粒（plasmid）是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分子（cccDNA），能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。