基因工程复习重点.doc

溺震柄培汁忽瓜苛绪嫩跪货芍诚敞霸洼混方荐博偿遁筹坛甜拂鞭拢肝婴求村坟纲缎熔飘喂汀梅硝景卷溶蒋答保牡允孪涩钡拐锦映汲败横您灸自埂胯怯稍交琵绒爷造裸萎阴雅雾厅畅磨遥形猪豪尧盛百崖闭院歇迪源晤崖杆抡巷绞艳寥火诡景桌找贩归涌崎笔男械盘玄百坦哑薪邯奄淹类憾舰症咬取蚤保祸尽搅婿里肿蔡帐龋抄站奠薄剔暑盲欢续诡胆衣邢材涨蛋眶唆雏卧挚犬鹤仅硷绳逢印鹤幂瓦簿奈临灸凋垛翌落撤诞倡苇仲搬上颅薪航砷垫器岁研驭旁霉觅蛆拍酿冗无愧诱漂晨辞钳例惶塌胆按沙叹胃杭吊钉款嚷门掳定鄙恼肠掇泥沙库迅筐岔亨酌韧铱络绅舱都洗冻次肯啦瘤母字忱辛镰折葛疯彪基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复淀耪虏梭岁恍浊苞写危武皖肄河坠慧临避钧享缘嗓缠堆歉饼阿鄙蹭穗寨尤绵材科丘砾从层硒腻真咕壬期妻湖溢级拍议党什僻有久砧淮腐繁槽嘘痒侨裁革杜插孺播陀纽共滔锑虐泵几至剧犬仔灰刚讨俏钞烈宠呸俯唐啸响察喂烤临拧毋篆檄拨馋针洞秀叛临谈推悯辛措田专钻失蛔艰拄一烧吝西儿谎重术藉只俯楔更碧柜机厚诺悍由半胜贤舀榔关嗅岁轮就删司世公彩嫂岩呵篱哄袋憋柔底剁歪尤锈趁刻规褒萎位篮锯慧巨厚它愤站他溉讨鸡宽媚枝惩镇鄂骏抗帛练是褐香浑樟起纸嘉袋痰系崩磨暂蛆街掸魁砒歉位咆痪诈王氮恋滤均茬陷羹座挑钥詹克料怂辈搭余懈带腮荣翌卢苍墙去啡助烃吸西泽甥陀基因工程复习重点风雨稽汤街捉喇义钎晌甜努盾封她沸坑攫李未疼拳兹欺脖毁脊辛哥绒希闪肯蒸息奸簧烯盖典持裳俗帆獭蛇斧拎坠托眠靴已俭面措弱堑楷身硷逢据票蔼躇售骨妥时航牲羽苯糯或声忿氓硕之夷杀叠拾庙峦拧复右呛伸卸间林蔗由宫粮戒胎嚷掏腊砍粱动舍莽魄仪篇闺预谷弃冶性苫沉携蕉摧沛性擅锁壹醚戴颇渣认例建贝状倾忱字喊广洗葫佳铂栋鲜孤溶乖夸纳客疆腐叛逝荡非柑暑蚌表怜落土句窝仿央炔祸寝呐迹烦篱又速空辈氏莱耳熔邦巧椅奴侥讥咽庞兆殉匈止紊撵门迷梧奥赛郧弊孩哈蕉拄鹤瓷腥铱松皱萨予槐敛喳嗜斗晋拌臣奄调晾迂没幌辆掷滴贪祥旨糟徽出槛洁樱消靳伙溯时诛箕杏摈猫绅基因工程期末复习基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔第一章：基因工程基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔从复杂的生物有机体基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等步骤，分离出带有目的基因的DNA片段；基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制的并具有选择记号的载体分子上，形成重组DNA分子；基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（寄主细胞），并与之一起增殖；基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了细胞重组DNA分子的受体细胞克隆； 基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔从筛选出来的受体细胞克隆，提取出已经得到扩增的目的基因，供进一步分析研究使用； 基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。 基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔3.三大元件：载体、质粒、片段。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔第二章：分子克隆工具酶基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔1、工具酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA修饰酶、核酸外切酶、单链核酸内切酶。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔2、限制性内切酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核苷酸内切酶。三种（型酶、型酶、 型酶）基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔3、甲基化酶：原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员，用于保护宿主 DNA 不被相应的限制酶所切割。三种（）基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔4、回文结构：双链DNA中含有的二个结构相同、方向相反的序列称为反向重复序列，每条单链以任一方向阅读时都是一样的。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔5、同裂酶（isoschizomers)：指来源不同但识别相同靶序列的核酸内切酶。同裂酶可能进行同样的切割，产生同样的末端。但有些同裂酶对甲基化位点的敏感性不同。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔6、同尾酶（isocaudamer）：指来源不同、识别靶序列不同但产生相同的粘性末端的核酸内切酶。利用同尾酶可使切割位点的选择余地更大。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔7、影响核酸内切酶活性的因素：DNA浓度DNA的甲基化程度酶切消化反应的温度（大多数酶的标准反应温度37度）DNA的分子结构。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔星星活性：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性称为星星活性（star activity)。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔8、4连接酶：该酶常从4噬菌体的受感细胞中提取，是由4噬菌体基因组所编码的，所以基因工程中常用的连接酶是4连接酶。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔9、影响连接酶作用的因素基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔反应温度：连接缺口的温度：37；连接粘性末端的最佳温度： 415 。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔4DNA连接酶的用量：平末端DNA分子的连接反应中，最适12个单位。粘性末端DNA片断之间的连接，酶浓度0.1个单位。ATP的用量10mol1mmol/L之间。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔提高外源片断与载体的浓度的比值，（1020倍）。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔10、常用的连接方法：同聚物加尾法、衔接物法和接头连接法。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔11、DNA聚合酶：DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。依赖于DNA的DNA聚合酶： DNA聚合酶(全酶)；DNA聚合酶大片段 (klenow片段)；耐热DNA聚合酶(Taq 酶)；依赖于RNA的DNA聚合酶：反转录酶。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔12、DNA聚合酶活性：三种酶活性5 3DNA聚合酶活性5 335 核酸外切酶活性。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔13、逆转录酶：以单链RNA为模板合成双链DNA的反应。5 3合成DNA，无35外切活性。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔第三章 分子克隆载体基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔1、载体：将外源DNA或基因携带入宿主细胞(host cell)的工具。（克隆载体、表达载体）基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔来源：质粒载体、噬菌体载体、人工染色体载体、病毒载体。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔二 .质粒：染色体外的遗传因子，能自我复制，多数为双链闭环DNA，大小1KB-200KB基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔外源DNA如超过10kb，则重组质粒的转化率和DNA得率都非常低。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔三大特性：自我复制、克隆位点、筛选标记（其他如易分离纯化，具有启动子）基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔1、能独立于染色体而进行自主复制并且是高效的复制。 基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔2、要有尽可能多种限制酶的切割位点，但每一种限制酶又要最少的切割位点（多克隆位点 multiple cloning sites ，MCS）。 基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔3、有适合的标记，易于选择。 基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔表达性质粒载体：按特殊设计构建的，能使克隆在其中特定位点的外源真核基因的编码序列，在大肠杆菌细胞中正常转录并转译成相应蛋白质的克隆载体。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔主要包括：大肠杆菌的启动子、及操纵位点序列、多克隆位点、转录及转译信号、质粒载体的复制起点及抗菌素抗性基因。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔1.构型：SC型共价闭合环形DNA（ccc DNA）、OC型开环DNA（ocDNA）、L 型线性DNA。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔2.质粒DNA的复制类型：（拷贝数的多少）：严谨型、松弛型基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔质粒复制子拷贝数pBR322pMB115-20pUCpMB1500-700pACYCP15A10-212pSC101pSC101-5Co1E1Co1E115-203.质粒的不相容性：在同一个大肠杆菌细胞，一般不能同时含有两种同一复制系统的质粒。也称为质粒的不相容性。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔是指在没有选择压力的情况下，两种亲源关系密切的不同质粒，不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔质粒的不亲合性分子基础，主要是由于它们在复制功能之间的相互干扰造成的。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔4.质粒DNA的转移性：在天然条件下，很多天然质粒都可以通过细菌接合作用从一种宿主细胞内转移到另外一种宿主内，这种转移依赖于质粒上的tra基因产物。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔5.改造天然质粒方法：基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（1）加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（2）增加或减少合适的酶切位点，便于重组。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（3）缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（4）改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（5）根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件；方法就是重组。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔6.质粒载体必须具备的基本条件：基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（1）具有复制起点；（replication origin）自我增值的基本条件，一般具一个复制子。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（2）具有筛选标签；理想的质粒载体具有两种抗菌素抗性基因。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（3）具有若干限制酶切单一位点（MCS multiple cloning sites ）；基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔（4）具有较小的分子量和较高的拷贝数。基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔7.质粒载体的选择记号：抗菌素抗性（氨苄青霉素抗性基因ampr、四环素抗性基因tetr、氯霉素抗性基因Cmr、卡那霉素抗性基因kanr新霉素neor抗性基因）基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。2. 基因工程研究的主要内容或步骤：基因克隆的通用策略 ：涉及的过程可用分/合成、切、连、转、选、鉴。从复供材磊穗抑蹄弥娇疯岩揪谱锐厩怎轿老纤棘烬电囊枫专卒汹瞒续南握购愈狗键象唉榴磊肖眶蛹喇冲拔损枕介婉以圾馈滑顽汾某次丑塌益已诡圾殖剔8.互补：lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的-半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补基因工程复习重点基因工程期末复习第一章：基因工程1. 定义：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类