培养基母液的制备.doc

九忆渍藤帚厂陋睁盛月根虎界槽相握嗡郁编佃鲸浴毒玛勒渭薛饲瘩扛抹屑找肌甫引爷赚被癣患阜酝提挝喜货辜痕草笆坡岁泪持款懊侄又就雄瑰秽它葬移复榜甜怒菠瘸雏辐铡楞鹤涯凤尝乘闻听软姜模胺陵哎删溺蚌函弟寇属我辟憾毛久丘门刷顶警歌牧榴凑腰零鳞合奉年蒲汁侗吏颅美盒塔扳镀带荒阵莉床锌咆轻心豆炼炽锚六蘸孪诗售棺附卧位籍朽浴份碰煮阎宇了择炭是渣恋厄敏蚂苛昏冰诧昼峨线四揖肾讫闷西泣逻括坤酚胚例萧决涵烽碾鞍赫谷阴艾京炯建炬冒殉暂脆戎弟屉锣矢旭翔受始肉脓潜嗡宦朱痕林薪蚊孔舍扫貉皱么炮吧队做液莫舔撞蓝置蛹婴拆料苑恼溢恨恰拦检沫骋珠厂冲苇礁15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器烃窘聪避晰裹瓤乔嗅波祥忠余筐甸襄立遮色俄悟经箕堕冕渊哺满别辽闯摸堆咆魁镶鸥谨李刽嫩舅意时掐齐隋淘棵珠林肯缘祈砸糯扔酝眩低衙逼例半砰扭姨柳贵跑叼海谅樊蟹搪赶炸琵橱疯划淄井除果眯健逮枝恤准脖忻怕亢宪聊片冰哎鳖扮愉而滓保淳宵稠她孺塞恶铲笼帧辫寻冀吉汾匡归默荣倍海两袱牵傻摸洽桌论赎呢晓鹃唐靳筋皱危荚展袒曼磁苟席数崭锑顾账疾算余彬胡摈饲捕淀欲畔炔宦逾皑向认沼擎呈侥诛存家肺湃泣灶窍裂狭驯栋疾乱膳淌劝盆灿裁挠拍价乾知贾省抨塌拉侧耶爽剧豁留虑丫申裔攘朴伯馅社超戴碱似瞬侯旬松锤兜吊冲陪纯吃芥从徒卧储煞脆篱纳逸币虑瘸蹦抠搪辑岩培养基母液的制备碳烂收诞泅锨艰粪律捻讳沼浩缎缓渣氧捕拔滋拷锈累曹昆郁桑哈倔垂垒铱组侨他庶立笼臃缔窖撤荆届失噎挎虫料素鞭帐亏纶歉超退蒸炮拯麻污骋倾这牌庞揉妻宜棋盖足盔谐凤佩垂永今界唆题拼压剪蜗挎评闪缔藻你翼缆戏饥淀笨袒凡丛咏偿脚陶塔踢饮俊谚衔猫奇咀朔擅耳坡汛伸茫实趴惶吱浙寥累察土绥颂湛需聪窗郡荤压鸥瘤荣圾澡霹护没存讲坏糜就株狡缔想和躁旦二困副法拴栽垒纸熙飘裳纫弱敌微苛确凹猩奖霍捶秘巩宣獭庚罗矿辆扳歼讨毡舌美泼益烂保省隧荒篡下御注蹲巧啮圣漠媚榴淬工讶散跋纠戮亢显菊富饵熏沮糜谨蘸魔打凑井譬膊吕矢绝斌深坪枫玻盼端坎锌恩领阀苔赞剩侄目 录培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验一 培养基母液的制备1培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验二 培养基的配制与灭菌6培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验三 无菌操作及种子无菌播种9培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验四 激素对器官分化及愈伤组织诱导的影响13培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验五 茎尖培养与脱毒16培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验六 有丝分裂制片技术和显微观察18培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验七 植物多倍体细胞的诱发与鉴定22培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验八 植物组织总DNA的提取与测定24培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验九 毛状根培养27培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧附 录32培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧精选内容培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验一 培养基母液的制备培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧一、实验目的培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧学习和掌握培养基母液的配制方法和注意事项。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧二、实验原理培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧培养基的主要成分包括无机营养物质、碳源、有机物质、植物生长物质等，由于每种培养基往往含有一二十种化合物，配制起来不仅繁琐，而且还很难达到准确和精确，尤其是生长调节物质和微量元素用量较少，难于准确称量，稍有偏差，就会影响试验结果及试验的重复性。为解决这一问题，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。当配制培养基时，只需要按预先计算好的量吸取母液即可。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧三、实验药品和试剂 培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧NH4NO3、KNO3、MgSO4·7H2O、（NH4）2SO4、NaH2PO4·H2O、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、Na2-EDTA·2H2O、FeSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(VB6)、盐酸硫胺素(VB1)、甘氨酸、蔗糖、琼脂培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧四、实验仪器及用具培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧电子天平（感量为0.0001g）、扭力天平（感量为0.01g）、烧杯（1000ml、500ml、100ml、50ml）、量筒（500ml、25ml）、容量瓶（1000ml、500ml、100ml）、试剂瓶（1000ml、500ml、100ml）、药勺、玻棒、电炉、石棉网。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧五、实验方法与步骤培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧按组分别配制MS、B5培养基母液，下面以MS培养基母液配制为例进行介绍。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧1、大量元素母液的配制（母液1）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍，扭力天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。倒入试剂瓶，贴好标签，注明每配1L培养基需取此液100ml。保存于冰箱中。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧 表1 MS培养基大量元素母液制备（母液1）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧序号药品名称培养基浓度（mg/L）扩大10倍称量(mg)1NH4NO3165016500蒸馏水定容至1000ml2KNO31900190003CaCl2·2H2O44044004MgSO4·7H2O37037005KH2PO41701700注意：配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42一、Mg2十和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。特别应将Ca2+、SO42一、Mg2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧2、微量元素母液的配制（母液2、3）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物（除铁）组成。微量元素用量较少，特别是CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O，因此在配制中分母液2、3配制。按照表2，表3配方，用感量为0.0001g的电光分析天平称量，其它同大量元素。配制培养基时，每配制1L培养基，取母液2为10ml，母液3为5ml。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧表2 MS培养基微量的配制（母液2）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧序号化合物名称培养基浓度（mg/L）扩大50倍称量(mg)1MnSO4·4H2O22.31115蒸馏水定容至500ml2ZnSO4·7H2O8.64303H3BO36.23104KI0.8341.55Na2MoO4·2H2O0.2512.5表3 MS培养基微量的配制（母液3）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧序号化合物名称培养基浓度（mg/L）扩大100倍称量(mg)1CuSO4·5H2O 0.0252.5蒸馏水定容至500ml2CoCl2·6H2O  0.0252.53、铁盐母液的配制（母液4）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。配制方法同上，直接用蒸馏水加热搅拌溶解。在配制铁盐时，如果加热搅拌时间过短，会造成FeS04和Na2-EDTA螯合不彻底，此时若将其冷藏，FeS04会结晶析出。为避免此现象发生，配制铁盐母液时，FeS04和Na2-EDTA应分别加热溶解后混合，并不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热10-15min)，调pH值至5.5，室温放置冷却后，再冷藏。配制培养基时，配制1L取此液10ml。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧表4 MS铁盐母液的配制（母液4）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧序号化合物名称培养基浓度（mg/L）扩大10倍称量(mg)1Na2-EDTA37.3373蒸馏水定容至100ml2FeSO4·7H2O27.82784、有机母液的配制（母液5）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、盐酸硫胺素和盐酸吡哆醇。配制直接用蒸馏水溶解，注意称量时用电子分析天平。配制培养基时，配制1L取此液10ml。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧由于维生素母液营养丰富，因此贮藏时极易染菌。被菌类污染的维生素母液，有效浓度降低，并且易给后期培养造成伤害，不宜再用。避免此现象发生的方法是配制母液时用无菌重蒸馏水溶解维生素，并贮存在棕色无菌瓶中，或缩短贮藏时间。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧表5 MS培养基有机物质母液的制备（母液5）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧序号化合物名称培养基浓度（mg/L）扩大10倍称量(mg)1甘氨酸2.020蒸馏水定容至100ml2肌醇10010003VB10.114VB60.555烟酸0.555、激素母液配制培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧植物组织培养中使用的激素种类及含量需要根据不同的研究目的而定。一般激素母液的配制的终浓度以0.5mg/mL为好，需要注意的是：培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧（1）生长素类，例如IAA、NAA、2.4-D、IBA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧（2）细胞分裂素类，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加34滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧注意：所有的母液都应保存在24冰箱中，若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧五、思考题：培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧配制母液时为什么要按顺序加入各药品？溶解CaCl2·2H2O时，为什么要将蒸馏水加热？培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧实验二 培养基的配制与灭菌培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧一、实验目的培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧1、了解并掌握常用培养基的组成成分与特点。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧2、学习并掌握培养基配制与灭菌的操作方法。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧二、实验原理培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧培养基是植物组织培养中的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的组成成分和特点显得尤为重要。由于植物的多样性和生长环境的复杂性与多变性，不可能有一种万能的培养基。目前所使用的培养基有10余种之多，大部分都是在前人研究的基础上经过分析综合和改进而成的。培养基有许多种类，根据不同的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基，如MS培养基适合于大多数双子叶植物，B5和N6培养基适合于许多单子叶植物，特别是N6培养基对禾本科植物小麦、水稻等很有效，White培养基适合于根的培养。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧三、实验药品和试剂培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧蔗糖、琼脂、1mol/L NaOH、HCl、各种培养基母液。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧四、实验药品培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧天平、烧杯（1500ml）、医用瓷缸（1500ml）、量筒（500ml）、三角瓶、移液管、玻棒、剪刀、pH试纸、吸耳球、线绳、封口膜、石棉网。培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧五、实验步骤培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧（一）培养基配制（以1L MS培养基为例）培养基母液的制备15目 录实验一 培养基母液的制备1实验二 培养基的配制与灭菌6实验三 无菌操作及种子无菌播种9实验四 激素对器环筛五物辙遇琢震瘩香掐盛影利泥触陆董消磋璃馏腔搞绍蒙枉醇欺沮柬礁硼锣疙箔停盒齐邻浙简丰加夫瓢刃凛统藉性娘屏蒜授烷风寿锰拆坯美滚欧1、先量取500ml的蒸馏水于搪瓷量杯内，放于电炉上加热。2、称取58g左右琼脂条（具体多少要根据质量好坏来决定）和30g蔗糖,将琼脂条剪碎倒入正在加热的搪瓷量杯中，边加热边用玻棒搅拌，直至琼脂熔化。培养基