实验五激对血糖浓度的影响文档资料.ppt

血糖平衡,人体内血糖的来源和去路,血糖：指血液中葡萄糖,血糖维持在恒定水平,调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。胰岛素和肾上腺素是调节血糖浓度的两种重要激素，前者使血糖浓度降低，后者使血糖浓度升高。血糖水平异常：高血糖及糖尿病；低血糖,实验目的,掌握葡糖糖氧化酶法（GOD-POD）测定血糖的原理及方法 观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 了解家兔耳缘静脉取血的方法,血糖测定的常用方法,测定方法,无机化学法：Folin-Wu法,有机化学法：邻甲苯胺法,酶法：葡萄糖氧化酶法,二、实验原理,葡萄糖氧化酶法,红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。,标准管法,A标=C标KL,A测=C测KL,I0,A测,A标,C测,三、仪器与试剂,酶酚混合试剂处理后的葡萄糖应用液（5mmol/L）草酸钠抗凝剂25%葡萄糖蛋白沉淀剂肾上腺素（1mg/mL）胰岛素（1U/mL）,实验器材：分光光度计、注射器、台式磅秤、兔 台、三棱针、试管、试管架、漏斗实验动物：饥饿16小时以上兔子四只,四、操作步骤,1、动物准备（1）分组每一列用一只兔子第1、3列做胰岛素对血糖浓度的影响第2、4列做肾上腺素对血糖浓度的影响,（2）称重与固定,记录体重,称重,四肢向上固定,2、制备抗凝管,每列取2只洁净且干燥的试管，标好“实验前”和“实验后”，草酸钠在讲台上，用药匙加一平匙的抗凝剂（草酸钠），晃动试管使管壁上沾有抗凝剂。,3.准备激素,胰岛素（1U/mL）0.75U/Kg,0.75mL/Kg1kg兔子准备胰岛素0.75mL,肾上腺素（1mg/mL）0.5mg/Kg,0.5mL/Kg1kg兔子准备胰岛素0.5mL,4、去蛋白质血滤液制备,取2支试管，每管中取蛋白沉淀剂4mL,其中1管标注实验前，另外1管标注实验后。去蛋白质血滤液制备（待第5和6步结束，取全血制备）：取全血0.2mL，加入上述管混匀，室温放置7分钟过滤。,5.注射前取血,耳缘静脉取血法：,6.注射激素,抓住兔子，腹部朝上，提起腹部皮肤，刺入皮下时有落空感，然后缓慢注入激素,腹腔注射,胰岛素 0.75U/Kg,肾上腺素 0.5mg/Kg,0.5h,1h,取血（2mL）制备去蛋白血滤液,取血（2mL）制备去蛋白血滤液,7.GOD-POD法测血糖,充分混匀，37 水浴15min 505nm处比色以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度值。,按表配液,实验结果与计算,计算：,标准管葡萄糖浓度：5mmol/L,mmol/L,实验结果与计算,通过计算比较家兔注射激素前、后血糖浓度的变换正常人血糖浓度：3.896.11mmol/L验证胰岛素降血糖，肾上腺素升血糖结合理论课的内容分析激素影响血糖的机制,临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。,测定血糖的意义,注意事项,抓取兔子时小心被兔子抓伤试管一定要标记清楚用漏斗过滤时，不要用水润湿用加样枪加取量要准确,