高速逆流色谱操作步骤和要点操作步骤.docx

高速逆流色谱操作步骤和要点操作步骤：1 .配液。超声脱气约20min,脱气后静置冷却至室温后泵液。2 .打开恒温水浴，将温度升至设定温度。3 .泵固定相。以IO20mlmin流速泵入固定相，检测器出口端流出固定相约2050ml后停泵。4 .平衡。打开紫外检测器开始预热，正转转动主机至90OrPm（FWD为正转，REV为反转），同时以3mlmin流速泵入流动相，至出口端流出流动相且此时紫外信号稳定，体系基本已平衡。5 .进样。以体系的上、下相溶解一定量的样品，超声溶解均匀后，在装样注射器中倒入样品溶液，将进样六通阀切换至load,推排气泡后吸液至样品全进入进样圈中，将load切换至inject,检测器、工作站调零开始记录。6 .接收流分。工作站记录，设备运行时间为50Omin,保存后采集数据，保存。7 .清洗。断开泵与主机的连接，将主机进口与气管出口连接，吹气；将主机中溶剂吹出后，泵入约50ml清洗液，吹气，重复此过程23次；最后一次长时间（1小时左右直至吹干）吹气时将主机内液体吹尽。8 .关机。操作要点：本仪器适用于有机溶剂，316L不锈钢及PTFE材料可耐受的酸碱溶液。1 .本设备可承受的压力限制为2MPa,请勿泵入不可溶解的固体颗粒。2 .设备运行前先检查连接管路是否正确，是否紧密；检测器波长是否正确。3 .配液时溶剂应混合均匀，自然分层澄清后可超声脱气，脱气时间不宜过长，脱气后如溶剂有温热则最好冷却静置至室温后使用。4 .样品溶解可为体系上相或下相，或同时两相溶解，不可以单一的溶剂来溶解进样，以免破坏主机内的体系平衡。5 .每次做完实验请及时清洗设备，一般清洗液为甲醇、乙醇等，如体系内含有酸、碱、盐等溶剂，建议先以纯净水清洗12次后，再以清洗液清洗。6 .日常清洗完设备后，如需继续进行实验，请设备放置2小时后重新平衡。7 .操作中如有气泡、流失或其他异常现象可致电上海同田生物技术有限公司技术支持部-8036。