动物细胞融合与单克隆抗体课件(上课）.ppt

专题2 细胞工程,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,学习目标,了解动物细胞融合的原理、过程和意义。理解单克隆抗体制备的过程和应用,(一)概念,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多 个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。,一、动物细胞融合,仙台病毒,丧失感染性,（不感染细胞）,保留融合活性,（诱导细胞融合）,动物细胞融合过程示意图,不同DNA的两个细胞,灭活的病毒,有丝分裂,两个完整的杂交细胞,细胞膜的流动性植物细胞的全能性,细胞膜的流动性细胞增殖,纤维素酶和果胶酶,胰蛋白酶,物理法、化学法,灭活的病毒,获得杂种植株,获得杂交细胞,用于制备单克隆抗体,克服远缘杂交 不亲和的障碍,1、抗体是由何种细胞产生的？,浆细胞（效应B细胞）,2、抗体是如何产生的？,B淋巴细胞,抗原,增殖分化成浆细胞,3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体？,一种,二、单克隆抗体制备的原理,（一）获得抗体的传统方法,1、把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。,2、缺点：产量低，纯度低，特异性差。,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖,杂交细胞,动物细胞培养技术,（二）实验原理：,动物细胞融合,单克隆抗体,既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体，,（三）如何大量生产单克隆抗体？,利用B淋巴细胞产生抗体的功能。利用肿瘤细胞无限增殖的特性。利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有B淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞。利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。,三、过程：,免疫动物,灭活的仙台病毒,？种,BB、B瘤、瘤瘤、,杂交细胞,免疫B细胞和骨髓瘤细胞的制备,细胞融合,杂交瘤细胞的选择培养,杂交瘤细胞的筛选,分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立,单克隆抗体的大量制备,整个制备过程为何要经过两次筛选?,第一次筛选：用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞,第二次筛选（克隆化培养和抗体检测）：筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,四、单克隆抗体的应用,、可用于作为诊断试剂：有准确，高效，简易、快速的优点、可用于疾病治疗、可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的“生物导弹“。）“生物导弹”单克隆抗体药物,课堂反馈答案：,15ABBDC610DBCDC,