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    生物制药工艺学中国药科大学教案.doc

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    生物制药工艺学中国药科大学教案.doc

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DNA重组体主要有哪几种表达系统?各有什么特点?9. 生物制药工艺中试放大的目的是什么?怎样进行中试放大?10. 简述PCR技术的原理,如何应用PCR技术进行点突变?11. 应用蛋白质工程技术设计蛋白质分子主要有哪些方法?12. 术语:微生物纯培养,诱变育种,代谢调节选育,目的基因,cDNA,蛋白质工程,转基因动物,蛋白质组学,PCR,核酸疫苗,系统生物学中国药科大学教案 (第 3 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的了解生物材料预处理的目的,掌握去除杂蛋白和金属离子的方法和原理掌握常用细胞破碎的方法,各种方法的优缺点和适用范围了解液固分离的方法和设备本章讲授提纲及学时分配生物材料的预处理2学时细胞破碎 1学时液固分离 1学时本课程学科的新进展 教学参考书1. 孙彦 主编 生物分离工程第二版,化学工业出版社,2005. 2. 欧阳平凯 生物分离原理及技术第一版,化学工业出版社,1999.3. 赵永芳 主编 生物化学技术原理及应用第一版,科学出版社,2002.4. 顾觉奋 主编分离纯化工艺原理第一版,中国医药科技出版社,1994.本章内容的重点凝聚作用和絮凝作用细胞破碎的方法及原理本章内容的难点细胞破碎的方法及原理本章内容及讲授的改进意见复习思考题1、 去除发酵液中杂蛋白有哪几种方法?2、 去除发酵液中钙、镁、铁离子的方法有哪些?3、 影响絮凝效果的主要因素有哪些?4、 细胞破碎有哪些方法?各有什么特点?5、 超声波破碎细胞的原理?6、 术语:凝聚作用,絮凝作用,渗透压冲击法,错流过滤中国药科大学教案 (第 4 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的掌握溶剂萃取的基本原理,萃取方式,破乳化方法;熟悉萃取设备和溶媒回收方法掌握双水相萃取原理和影响因素,了解其应用了解反胶束萃取原理及其在生化药物分离纯化中的应用掌握超临界萃取的原理,影响因素;了解超临界萃取方式及流程本章讲授提纲及学时分配溶剂萃取法2学时影响溶剂萃取的因素2学时双水相萃取,反胶束萃取,超临界流体萃取 2学时本课程学科的新进展双水相萃取和超临界流体萃取在药品生产中应用教学参考书本章内容的重点溶剂萃取法的基本概念溶剂萃取法的基本原理乳化和破乳化影响溶剂萃取的因素双水相萃取超临界流体萃取本章内容的难点溶剂萃取法的基本原理双水相萃取超临界流体萃取本章内容及讲授的改进意见如能有条件让学生参观一下实际设备会方便理解复习思考题1. 溶剂萃取法的基本原理2. 溶剂萃取法按操作方式不同,可分为哪几类?各有什么特点?3. 乳化剂为何能使乳状液稳定?4. 破坏乳状液的方法有哪些?5. 影响乳状液类型的因素有哪些?6. 影响双水相萃取的因素有哪些?7. 影响超临界流体萃取的因素有哪些?8. 术语:双水相萃取,双节线,多级错流萃取,多级逆流萃取,反胶束萃取,超临界流体萃取,双水相萃取中国药科大学教案 (第 五 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5 :理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的1、 掌握各种沉淀法的原理和特点。2、 熟悉各种因素对生化物质溶解度的影响。3、 掌握过饱和溶液形成的方法。4、 了解影响晶核生成及晶体生长的因素。5、 了解共沸结晶技术6、 了解常用蛋白质结晶技术。本章讲授提纲及学时分配第一节 盐析法 1学时第二节 有机溶剂沉淀 1学时第三节 其他沉淀方法 1学时第四节 结 晶 1学时本课程学科的新进展在其他沉淀法中发展了许多方法:如等电点沉淀法、金属离子沉淀、生成有机酸类复合盐沉淀、亲和沉淀、高分子聚合物沉淀及表面活性剂沉淀等,这些方法为生物药物的特异性分离纯化奠定了基础。教学参考书1、 吴梧桐 主编 生物制药工艺学第二版,中国医药科技出版社,2006.2、 孙彦 主编 生物分离工程第二版,化学工业出版社,2005. 3、 欧阳平凯 生物分离原理及技术第一版,化学工业出版社,19994、 赵永芳 主编 生物化学技术原理及应用第一版,科学出版社,2002本章内容的重点1、 各种沉淀法的原理和特点。2、 各种因素对生化物质溶解度的影响。3、 过饱和溶液形成的方法。4、 影响晶核生成及晶体生长的因素。本章内容的难点1、 各种沉淀法的原理和特点。2、 各种因素对生化物质溶解度的影响。3、 过饱和溶液形成的方法。本章内容及讲授的改进意见增加具体沉淀操作的实例,提高学生的感性理解。复习思考题1、 什么是“盐析沉淀”?盐析的基本原理?2、 影响盐析效果的因素有哪些?3、 影响有机溶剂沉淀的因素有哪些?4、 有哪些方法可形成过饱和溶液?5、 哪些因素可影响晶体的大小?6、 等电点沉淀有哪些特点?如何应用?7、 术语:Ks盐析,盐析,盐析分布曲线,透析结晶法中国药科大学教案 (第 六 章 首页 )课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5:理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的1、掌握吸附的基本原理、特点和各种因素对吸附的影响。2、熟悉常用吸附剂的性质和使用要点,通过了解一些实例加深对吸附法的了解。3、熟悉大孔网状聚合物吸附剂的应用特点。本章讲授提纲及学时分配第一节 吸附的基本原理 1学时第二节 常用吸附剂 1学时第三节 大孔网状聚合物吸附剂 2学时本课程学科的新进展大孔网状聚合物吸附剂大孔网状离子交换树脂相比,它不含离子交换树脂的功能团,仅保留了多孔的骨架,其性质与活性炭、硅胶等吸附剂相似,称为大孔网状聚合物吸附剂。与活性炭等经典吸附剂相比,大孔网状聚合物吸附剂具有选择性好、解吸容易、理化性质稳定、机械强度好、可反复使用和流体吸力较小等优点。特别是可按照需要,通过不同的原料和合成条件改变其孔隙大小、骨架结构和极性,因此适用于吸附各种有机化合物。目前已应用于维生素B12、大环内酯类抗生素、多肽类抗生素等的提取。对于一些弱电解质或非离子型的生物活性物,过去不能用离子交换法提取的,可考虑用大网格吸附剂。教学参考书1、 吴梧桐 主编 生物制药工艺学第二版,中国医药科技出版社,2006.2、 孙彦 主编 生物分离工程第二版,化学工业出版社,2005. 3、 欧阳平凯 生物分离原理及技术第一版,化学工业出版社,19994、 赵永芳 主编 生物化学技术原理及应用第一版,科学出版社,2002本章内容的重点1、 吸附的基本原理、特点和各种因素对吸附的影响。2、 常用吸附剂的性质和使用要点,通过了解一些实例加深对吸附法的了解。3、 大孔网状聚合物吸附剂的应用特点本章内容的难点1、 吸附剂的选择2、 吸附与洗脱条件的选择。本章内容及讲授的改进意见增加具体吸附操作的录像材料,提高学生的感性理解。复习思考题1、 化学吸附与物理吸附的区别?2、 吸附剂及被吸附物的极性对吸附的影响如何?3、 吸附剂用量及被吸附物浓度对吸附效果的影响如何?4、 例举两种以上常用吸附剂的性质和用途。5、 大网格高聚物吸附剂(大孔吸附树脂)与传统吸附剂相比有何优点?6、 术语:正吸附,负吸附,大网格高聚物吸附剂中国药科大学教案 (第 七 章 首页 )课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5:理论100% 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的1、 掌握凝胶层析的理论和实验条件的选择。2、 熟悉凝胶层析的特点和应用范围。3、 了解凝胶的结构和性质。本章讲授提纲及学时分配 第一节 凝胶层析的基本原理 2学时第二节 凝胶的结构和性质 1学时第三节 凝胶层析的实验条件和操作 1学时第四节 色谱峰变宽的问题 1学时第五节 凝胶层析的应用 1学时本课程学科的新进展新型凝胶介质的出现,为分离纯化提供了物质基础,如亲脂性葡聚糖凝胶、交联葡聚糖离子交换剂、Supperdex系凝胶、Sephacryl系凝胶等。教学参考书1、 吴梧桐 主编 生物制药工艺学第二版,中国医药科技出版社,2006.2、 孙彦 主编 生物分离工程第二版,化学工业出版社,2005. 3、 欧阳平凯 生物分离原理及技术第一版,化学工业出版社,19994、 赵永芳 主编 生物化学技术原理及应用第一版,科学出版社,2002本章内容的重点1、 凝胶层析的理论和实验条件的选择。2、 熟悉凝胶层析的特点和应用范围。本章内容的难点1、 凝胶层析的原理2、 术语理解与掌握:柱比,操作压,内水体积,外水体积,类分离,分级分离,排阻系数,全渗入,全排阻,分离限,Biogel-P类,分离度本章内容及讲授的改进意见增加具体凝胶层析操作的录像材料,提高学生的感性理解。复习思考题1、 试述公式Ve=Vo+KdVi各字母的物理意义,凝胶层析的原理?。2、 了解常用凝胶的名称、特点和用途。3、 如何选择凝胶?4、 欲获得好的凝胶层析效果应如何选柱、装柱?5、 溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括哪些?6、 利用凝胶层析如何测量蛋白质分子量。7、 术语:柱比,操作压,内水体积,外水体积,类分离,分级分离,排阻系数,全渗入,全排阻,分离限,Biogel-P类,分离度教具及教学设备要求 采用多媒体课件,需有多媒体及话筒的教室。中国药科大学教案 (第 八 章 首页 )课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5:理论100% 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的1、 掌握离子交换的基本原理和提高离子交换选择性的方法。2、 熟悉离子交换的基本操作及离子交换聚焦色谱的基本原理。3、 了解离子交换剂的结构分类、命名和主要性能的测定。4、 掌握离子交换聚焦色谱的基本原理。本章讲授提纲及学时分配第一节 基本原理 1学时第二节 离子交换树脂的结构与分类 0.5学时第三节 离子交换动力学 0.5学时第四节 离子交换树脂的性能 0.5学时第五节 离子交换的选择性 1学时第六节 离子交换操作方法 1学时第七节 新型离子交换剂 1学时第八节 应用实例 1学时第九节 离子交换聚焦色谱 1学时本课程学科的新进展生物大分子的离子交换要求固相载体具有亲水性和较大的交换空间,还要求固相载体对其生物活性有稳定作用(至少没有变性作用),并便于洗脱。这些都是使用人工高聚物作载体时难以满足的。只有采用生物来源稳定的高聚物多糖作载体时才能满足分离生物大分子的全部要求。根据载体多糖种类的不同,多糖基离子交换剂可以分为离子交换纤维素和葡聚糖离子交换剂两大类。离子交换纤维素的应用,为蛋白、多糖及酶类药物的分离纯化提供了分离载体。教学参考书1、 吴梧桐 主编 生物制药工艺学第二版,中国医药科技出版社,2006.2、 孙彦 主编 生物分离工程第二版,化学工业出版社,2005. 3、 欧阳平凯 生物分离原理及技术第一版,化学工业出版社,19994、 赵永芳 主编 生物化学技术原理及应用第一版,科学出版社,2002本章内容的重点1、离子交换的基本原理和提高离子交换选择性的方法。2、离子交换的基本操作及离子交换聚焦色谱的基本原理。3、离子交换纤维素的特点及洗脱方法。本章内容的难点1、 离子交换纤维素的合理选择及洗脱。2、 离子交换聚焦色谱的基本原理本章内容及讲授的改进意见增加具体柱层析操作的录像材料,提高学生的感性理解。复习思考题1、 离子交换时常用什么方法洗脱?各举一实例?2、 离子交换树脂的命名法。例举两种树脂骨架。3、 离子交换的选择性与哪些因素有关?4、 离子交换速度与哪些因素有关?5、 偶极离子的交换特点是什么?6、 大孔、均孔树脂的特点是什么?7、 离子交换纤维素的特点是什么?怎样洗脱?8、 酸、碱性蛋白如何选用合适的离子交换纤维素?9、 离子交换聚焦色谱的原理是什么?10、 例举三种以上常用离子交换树脂和离子交换纤维素。11、 术语:DM-C,DEAE-C,PBE94,尼柯尔斯方程,交换带,交换容量,树脂再生,偶极离子排斥,蛇笼树脂教具及教学设备要求 采用多媒体课件,需有多媒体及话筒的教室。 中国药科大学教案 (第 九 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的1、 掌握亲和层析的基本原理,亲和吸附剂的制备要点包括载体和配基的选择及其它措施。2、 熟悉亲和层析的基本操作,洗脱条件的控制及提高分辨率的方法。3、 了解亲和层析的用途、发展。4、 掌握亲和过滤、亲和萃取、亲和沉淀的有关概念。本章讲授提纲及学时分配第一节 亲和层析 4学时第二节 亲和过滤 0.5学时第三节 亲和萃取 0.5学时第四节 亲和沉淀 0.5学时第五节 其他亲和层析 0.5学时本课程学科的新进展利用生物亲和作用的高度特异性与其他分离技术如膜分离、双水相萃取、反胶团萃取、沉淀分级和电泳等结合,相继出现了亲和过滤、亲和分配、亲和反胶团萃取、亲和沉淀和亲和电泳等亲和纯化技术。教学参考书1、 吴梧桐 主编 生物制药工艺学第二版,中国医药科技出版社,2006.2、 孙彦 主编 生物分离工程第二版,化学工业出版社,2005. 3、 欧阳平凯 生物分离原理及技术第一版,化学工业出版社,19994、 赵永芳 主编 生物化学技术原理及应用第一版,科学出版社,2002本章内容的重点1、 亲和层析的基本原理,亲和吸附剂的制备要点包括载体和配基的选择及其它措施。2、 亲和层析的基本操作,洗脱条件的控制及提高分辨率的方法。3、 亲和过滤、亲和萃取、亲和沉淀的有关概念。本章内容的难点1、 亲和吸附剂的制备。2、 亲和过滤、亲和萃取、亲和沉淀的有关概念。本章内容及讲授的改进意见增加亲和层析原理的动画效果,提高学生的感性理解。复习思考题1、 亲和层析原理?主要特点是什么?2、 选择配基应注意些什么?3、 何谓“手臂”?其长短与亲和层析效果有何联系?为什么?4、 如何制得高亲和力的亲和吸附剂?5、 非专一性吸附包括哪些?如何克服?6、 亲和层析有哪些洗脱方法?7、 什么是二次作用亲和沉淀?8、 亲和膜分离原理与特点?9、 术语:亲和力,亲和吸附剂,配基,阻留值,正洗脱,负洗脱,金属螯合亲和层析,有机染料亲和层析,亲和错流过滤,亲和萃取,亲和反胶团萃取。教具及教学设备要求 采用多媒体课件,需有多媒体及话筒的教室。中国药科大学教案 (第 10 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的 掌握超离心的工作原理,制备超离心和分析超离心的基本方法。 熟悉超离心有关概念和术语。 了解常用离心机的种类性能和用途。本章讲授提纲及学时分配 离心技术基本原理1学时制备性超离技术 2学时分析超离心及其应用1 学时本课程学科的新进展教学参考书本章内容的重点离心技术基本原理速度区带离心的特点及用途差分离心的特点及用途等密度梯度离心的特点及用途本章内容的难点离心技术基本原理速度区带离心原理等密度梯度离心原理本章内容及讲授的改进意见复习思考题1. 何谓相对离心力?如何表示?若一离心机每秒钟以1000转运转时,离心池底至主轴中心距为12.75厘米,池中液柱高7.95厘米。试计算离心池底与液面相对离心力各为多少?2. 离心机转子有几种、各有什么特点?3. 速度区带离心的特点及用途?4. 差分离心的特点及用途?5. 密度梯度的设计应包含哪些方面? 6. “密度梯度”通常有哪些制备方法?7. 梯度的取出与收集的方法有哪些?8. 术语:区带转子,角度转子,速度区带离心法,差分离心,等密度离心法教具及教学设备要求中国药科大学教案 (第11 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时) 5理论 修课必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年二版教学对象本科生物工程生物技术 专业教学目的掌握各种膜分离技术的类型、特征及应用范围,膜极化的影响和消除熟悉常用滤膜及滤器的性质和用途,包括特殊滤膜对蛋白质与核酸的结合作用。了解各种滤膜的制备及检测方法。本章讲授提纲及学时分配透析1 学时超滤技术2学时微孔膜过滤技术1学时本课程学科的新进展超滤技术已广泛应用于生物材料分离的各个方面,各种新材料的分离膜不断出现。教学参考书本章内容的重点透析装置的类型克服浓差极化现象的措施实验用超滤器的类型及原理膜孔径检测方法及原理超滤技术及其应用本章内容的难点实验用超滤器的类型及原理膜孔径检测方法及原理本章内容及讲授的改进意见复习思考题用于制作透析膜的材料所应具有的特点。透析装置有哪些类型?克服浓差极化现象的措施有哪些?实验用超滤器的类型?膜孔径检测方法?何谓超滤技术?有何优点?术语:超滤,不对称膜,孔隙率,截留值,各向异性膜,浓差极化现象,水流量法,气泡压力法。教具及教学设备要求中国药科大学教案 (第 12 章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时)84其中:理论84 修课实验必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年2版教学对象生物技术、生物工程 专业教学目的掌握制备高效液相色谱的特点。熟悉蛋白质、核酸、多糖等生物分子的色谱条件。本章讲授提纲及学时分配HPLC的概念、类型及其应用1学时HPLC的分离基础和设备 1学时HPLC分离方法的建立1学时 制备HPLC的实验设计,制备HPLC在生物、医药中的应用1学时本课程学科的新进展教学参考书本章内容的重点HPLC的组成?理论塔板数及分离度的计算制备型高效液相色谱的重要参数蛋白质分离的依据色谱介质按分离机理的分类本章内容的难点理论塔板数及分离度的计算制备型液相色谱分离方法的设计本章内容及讲授的改进意见复习思考题HPLC有哪几部分组成?理论塔板数及分离度的计算公式。制备型高效液相色谱的重要参数蛋白质分离的依据色谱介质按分离机理分为哪几类?制备型HPLC与分析型HPLC的主要不同点是什么?术语:塔板理论,速率理论,容量因子,选择因子。教具及教学设备要求中国药科大学教案 (第十三章 首页)课程名称生物制药工艺学总学分(时)84其中:理论84 修课实验必教材名称生物制药工艺学吴梧桐 主编2006年2版教学对象生物技术、生物工程 专业教学目的1了解氨基酸类药物、多肽和蛋白质类药物、核酸类药物、酶类药物、多糖类药物等生化药物的特点及一般制造方法;2熟悉这六类生化药物的代表品种的性质、用途和质量控制;3掌握这六类生化药物的代表品种的分离纯化方法。本章讲授提纲及学时分配第一节 生化药物概述 1学时第二节 氨基酸类药物 1学时第三节 多肽、蛋白质类药物 2学时第四节 核酸类药物 2学时第五节 酶类药物 2学时第六节 多糖类药物 2学时本课程学科的新进展随着分离分析技术的发展,生化药物的制备方法有了长足的进步,如多肽合成仪的出现使小分子多肽的制备变得容易。近年来,糖链作为继遗传基因、蛋白质之后的研究对象,再一次受到人们的关注。糖合成和精制技术的进步,加上分析仪器的进步,使解析物质结构和性能的研究工作变得容易了。教学参考书1、 吴梧桐 主编 生物制药工艺学第二版,中国医药科技出版社,2006.2、 李良铸 李明晔编写 最新生化药物制备技术第一版,中国医药科技出版社,2001. 本章内容的重点1多肽、蛋白质类药物的分离纯化2胰岛素的制备工艺3发酵法生产核苷和核苷酸的原理4酶类药物的分离纯化5多糖类药物的特点,多糖类药物的制备6肝素的制备工艺本章内容的难点1多肽、蛋白质类药物分离纯化方法的选择和组合2发酵法生产核苷和核苷酸的原理和方法3多糖类药物的特点,多糖类药物的制备本章内容及讲授的改进意见提供学生去工厂实践的机会,提高学生对生产工艺的感性认识。复习思考题1、 生化药物的特点?生化药物的主要资源有哪些?2、 氨基酸有哪些生产方法?各有什么主要特点?3、 简述用酶转化法由反丁烯二酸生产天冬氨酸,丙氨酸的过程和所用的关键酶。4、 简述氨基酸输液的组方原理和原则,常用的氨基酸输液有哪几种类型?5、 多肽类药物可分为哪几大类?蛋白质类药有哪几大类?6、 以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质,在选择材料时应注意哪些问题?在选择分离 纯化方法时应注意哪些问题?7、 熟悉并理解以胰脏为原料采用“酸醇提取法“生产胰岛素的工艺。8、 重组DNA技术制造人胰岛素有两种途径?9、 在多肽的固相合成方法中,常用的氨基保护剂有哪些?10、 熟悉多肽的固相合成方法的过程?11、 依据结构特点及临床应用核酸类药物可分为哪几类?12、 试述用营养缺陷型菌株发酵生产核苷及核苷酸的原理核方法。13、 依据功效和临床应用酶类药物可分为哪几类?14、 熟悉从生物材料中提取酶的主要过程和分离纯化过程中应注意的问题?15、 熟悉理解CuZn-SOD和Mn-SOD的生产工艺及测定方法。16、 粘多糖的特点?17、 简要说明多糖结构与多糖活性的关系。18、 熟悉并理解盐解-离子交换法生产肝素的工艺19、 术语:生化药

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