正常人群NK细胞上FcγRIIIa基因多态性分析课件.ppt
1,正常人群NK细胞上FcRIIIa基因多态性分析,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,内容,背景目的方法结果讨论结论,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,相关帮助,需要相关抗体试剂的可以访问Fantibody全球抗体搜索引擎:http:/fantibody全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网http:/进行咨询，期待您的加入,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,肿瘤是严重危害人类生命健康的一类疾病，攻克肿瘤一直是我们迫切希望解决的问题。肿瘤特异性单克隆抗体出现给肿瘤治疗带来了新的希望,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)被证明是单克隆抗体临床治疗肿瘤的重要机制和手段。IgG型抗体首先通过抗原结合部位与靶细胞（肿瘤细胞）结合，再由效应细胞上的FcR识别其Fc段，介导ADCC作用,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,FcR分为三类：FcRI(CD64)、FcRII(CD32)以及FcRIII(CD16)。FcRIII又分为两类：FcRa是一种跨膜糖蛋白，表达于单核细胞、吞噬细胞、NK细胞及选择性T细胞上；FcRb是一种糖肌醇磷脂蛋白(GPI-锚蛋白)，只表达于中性粒细胞和IFN诱导的嗜酸性粒细胞上,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,Ravetch等最先报道在FcRIIIa近膜Ig样区核苷酸位点559处存在多态性位点。在核苷酸位点559处核苷酸发生鸟嘌呤(G)一胸腺嘧啶(T)点突变后，由其转录合成的受体蛋白内第158位缬氨酸(valine，V)被苯丙氨酸(phenylalanine，F)所取代。这导致FcRIIIa有三种基因型：FcRIIIla-158F/F，FcRIIIa-158V/V及FcRIIIa-158V/F,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,背景,诸多文献报道FcRIIIa基因多态性与肿瘤病人预后相关。于单克隆抗体治疗的肿瘤病人中，FcRIIIa-158V/V的病人预后较V/F及F/F基因型病人好。这可能与其跟治疗性单克隆抗体的Fc段结合相关，由不同的亲和力导致 治疗性单克隆抗体介导的ADCC强度不同。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,目的,确定FcRIIIa的基因多态性在正常及肿瘤人群中的分布，以了解人群对肿瘤特异性单抗可能疗效反应的分布规律。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,方法,标本来源 正常健康人群外周血：用含肝素抗凝管收集健康志愿者外周血，标本量为23ml，共43份。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,方法,技术路线,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,方法,1.按说明书提取外周血基因组DNA。2.nest-PCR外侧反应经35个PCR循环(95 45S,64 45S,72 30S)，扩增产物长度248 bp；内侧反应经35个PCR循环(95 45S,65 45S,72 30S)，扩增产物长度94 bp。3.Nla内切酶酶切 8ul PCR产物于37酶切过夜。酶切产物经15PAGE电泳分离，银染显色。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结果,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结果,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结果,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,讨论,本研究检测结果显示在健康人群中FcRIIIa的基因多态性以V/F型最多，而V/V型次之，F/F型最少，这与国内文献报道（47例健康者中V/F型38例，V/V型7例，F/F型2例）一致。本研究中未检测出F/F型，可能与样本量较少有关。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,讨论,但本研究与国外报道的基因型分布（以V/F型及F/F型较多，而V/V型最少）有差异，这可能与地域及种族差异，遗传环境等因素有关。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,讨论,FcRIIIa三种基因型的NK细胞与IgG的亲和力顺序为V/VV/FF/F。治疗性单克隆抗体介导的不同基因型的NK细胞的ADCC强度不同，对肿瘤细胞的杀伤存在差异，从而取得不同的预后。我国以FcRIIIa-158F/F分布最少，可推测出大部分人对单抗治疗的预后较好。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,结论,FcRIIIa基因多态性在中国健康人群中的分布以FcRIIIa-158V/F最多，FcRIIIa-158V/V次之，FcRIIIa-158F/F最少。,本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家!,
