饲喂乳酸菌对杜长大商品猪肉质特性影响的研究毕业论文.doc

山东农业大学毕 业 论 文题目： 饲喂乳酸菌对杜长大商品猪肉质特性影响的研究 学 院 动物科技学院 专业班级 09级动科一班 届 次 2013届 学生姓名 学 号 20090026 指导教师 二O一三 年 6 月 10 日目 录摘 要I1 引言11.1 乳酸菌的研究进展11.1.1 乳酸菌及其生物学特点11.1.2 乳酸菌的类型11.1.3 乳酸菌的生物学功能21.2 本研究的目的及意义22 材料与方法22.1 试验猪来源及分组22.2 主要仪器与试剂32.2.1 主要仪器32.2.2 主要试剂及配制32.3 胴体性状的测定32.4 肉样前处理、测定项目及方法42.4.1 肉样前处理42.4.2 测定项目及方法42.5 结果统计分析73 结果与分析73.1 饲喂不同剂量乳酸菌对猪生长性能的影响73.2 饲喂不同剂量乳酸菌对猪胴体性状的影响83.3 饲喂不同剂量乳酸菌对猪肌肉肉质特性的影响84 讨论104.1 饲喂乳酸菌对猪生长性能的影响104.2 饲喂乳酸菌对猪胴体性状的影响104.3 饲喂乳酸菌对猪肉肉质常规特性的影响115 结论13参考文献14致谢16CONTENTSAbstractI1 Introduction11.1.1Research progress of lactic acid bacteria11.1.2 Types of lactic acid bacteria11.1.3 Biological function of lactic acid bacteria21.2 The purpose and significance of the resrarch22 Materials and Methods22.1 Test of swine origin and grouping22.2 The main instruments and reagent32.2.1 Primary instrument32.2.2 The main reagent and preparation32.3 Determination of carcass traits32.4 The project and method of determination of samples pretreatment42.4.1 Meat processing42.4.2 Test items and methods42.5 Statistial analysis of results73 Results and analysis73.1 Effects of diffrent doses of lactic acid bacteria on the growth performance of pigs73.2 Effects of diffrent doses of lactic acid bacteria on pig carcass traits83.3 Effects of diffrent doses of lactic acid bacteria on meat quality of pork muscle84 Discussion104.1 Effects of lactic acid bacteria on the growth performance of pigs104.2 Effects lactic acid bacteria on pig carcass traits104.3 Effects of lactic acid bacteria on meat quality of pork muscle115 Conclusion13References14Acknowledgements16摘 要本试验研究了乳酸菌对生长育肥猪的生长性能、胴体性状及肉质特性的影响，旨在为提升规模化猪场的养殖效益以及优质肉猪和优质猪肉的生产提供客观科学依据。试验主要内容为饲喂不同剂量的乳酸菌对生长育肥猪的生长性能、胴体性状及肉质特性影响的研究，以确定乳酸菌的最适添加量。乳酸菌液由山东宝来利来生物工程股份有限公司研发的乳酸菌自动发酵罐发酵制备，使用的主要菌种为植物乳杆菌(L. plantarum)和戊糖片球菌(P. pentosaces)，发酵液活乳酸菌浓度1×109cfu/ml，乳酸含量30mg/ml，pH在3.5-4.5之间。本试验在山东银宝食品有限公司养猪场进行，选择80日龄，体重约30kg健康无病、生长均匀的杜长大三元杂交猪216头，随机分成4组，每组54头。乳酸菌液每头猪每天饲喂量：一组50ml，二组100ml，三组150ml，对照组0ml。乳酸菌液通过饮水饲喂，自由采食和饮水，其他饲养管理条件相同。试验猪饲喂至平均约100kg体重，每组随机抽样屠宰5头，进行胴体性能测定和肉质测定。研究结果表明：（1）50ml组、100ml组和150ml组平均日增重组间差异不显著（P>0.05），这三组平均日增重都大于对照组，其中只有100ml组与对照组差异显著，且比对照组多18.19（P<0.05）。（2）50ml组、100ml组和150ml组料肉比分别比对照组低6.87、12.64、10.64，但差异不显著（P>0.05），其中100ml组料肉比最低。（3）100ml组平均日采食量最高，150ml组平均日采食量最低，四个组差异不显著（P>0.05）。（4）50ml组和150ml组成活率比对照组分别高2.13、6.38，但差异不显著（P>0.05），100ml组与对照组持平，这四组中150ml组成活率最高。（5）100ml组胴体重大于其他三组，且与其他三组差异显著（P<0.05）；50ml组、150ml组和对照组胴体重差异不显著（P>0.05）。（6）50ml组、100ml组和150ml组胴体长组间差异不显著（P>0.05），这三个试验组都大于对照组，其中100ml组胴体长最大，且与对照组差异显著（P<0.05），50ml组、150ml组与对照组差异不显著（P>0.05）。（7）50ml组、100ml组和150ml组眼肌面积均大于对照组，其中100ml组眼肌面积最大，比对照组多20.5，差异不显著（P>0.05）。（8）50ml组背膘最薄，100ml组背膘最厚，两组间差异显著（P<0.05），其他各组差异不显著（P>0.05）。（9）50ml组、100ml组、150ml组和对照组在肉色、大理石纹、失水率、滴水损失、烹饪损失和拿破率性状上差异不显著（P>0.05），其中150ml组失水率、滴水损失、烹饪损失和拿破率有好于其他三组的趋势，有利于猪肉的系水能力。50ml组、100ml组、150ml组剪切值均低于对照组，这三组组间差异不显著，且与对照组差异也不显著（P>0.05），饲喂乳酸菌有改善嫩度的趋势。50ml组肌内脂肪高于其他三组，差异不显著（P>0.05）。150ml组粗灰分高于其他三组，差异不显著（P>0.05）。（10）50ml组、100ml组、150ml组肌肉中SOD活性组间差异不显著（P>0.05），这三组SOD活性与对照组差异显著，且分别比对照组高12.19（P<0.05）、39.05（P<0.05）、34.81（P<0.05），其中100ml组SOD活性最高。100ml组和150ml组肌肉中MDA含量相同，50ml组和对照组MDA含量相同，100ml组和150ml组比50ml组和对照组MDA含量低10.53，差异不显著（P>0.05），100ml组和150ml组MDA含量最低。以上结果表明：饲喂乳酸菌液，可提高猪生长育肥阶段的平均日增重和饲料转化效率，从而提高猪的生长性能，与饲喂50ml和饲喂150ml乳酸菌液相比，饲喂100ml乳酸菌液对猪生长性能的提升效果最好。饲喂乳酸菌液可提高猪的成活率，与饲喂50ml和饲喂100ml乳酸菌液相比，饲喂150ml乳酸菌液效果最好。饲喂乳酸菌液可提高猪的胴体重、胴体长和眼肌面积，从而改善猪的胴体性状，试验发现，饲喂100ml乳酸菌液对猪胴体性状改善效果最好。饲喂乳酸菌液对猪肉的系水力、嫩度值和粗灰分含量的提高有改善趋势，与饲喂50ml和100ml乳酸菌液相比，饲喂150ml乳酸菌液效果较好。关键词：猪；乳酸菌；饲喂添加；生长性能；胴体性状；肉质特性Effects of Feeding Lactic Acid Bacteria on Growth, Carcass and Meat Quality of Finishing PigsABSTRACTThe experiment was conducted to study the effects of lactic acid bacteria on growth performance, carcass traits and pork quality of finishing pigs. The objective of the study was to enhance breeding efficiency of large-scale pig farms, and provide objective scientific production basis of high quality pork and high quality pig. The experiment was divided into two parts, experiment one: preliminary study of feeding lactic acid bacteria on carcass traits and pork quality of finishing pigs; experiment two: effects of feeding lactic acid bacteria on growth performance, carcass traits and pork quality of finishing pigs, and the experiment two can determine the optimum dosage of lactic acid bacteria liquid. The lactic acid bacteria liquid was fermented by the lactic acid bacteria fermentation tank and the lactic acid bacteria fermentation tank was produced by Shandong Baolai-Leelai Bioengineering Co., Ltd. The live lactic acid bacteria amount of lactic acid bacteria liquid was about 109cfu/ml, lactic acid content30mg/ml, pH between 3.5- 4.5.The experiment was carried out in the Shandong Yinbao Farms. 216 pigs (Duroc × Landrace × Yorkshire) were divided into four groups, and each group 54 pigs. The 216 pigs was healthy and uniform growth. The lactic acid bacteria liquid amount of per pig feeding: group one 50ml/day; group two 100ml/day; group three 150ml/day; the control group 0ml/day. The lactic acid bacteria liquid was fed by drinking water. Other conditions were same.The experiment showed as follow:(1) Average daily gain of group 50ml, group 100ml and group 150ml were not significant (P>0.05), more than the control group. Average daily gain of group 100ml were more than the control group 18.19(P<0.05). (2) Feed intake/weight gain of group 50ml, group 100ml and group 150ml were less than the control group 6.87, 12.64, 10.64, but the difference was not significant (P>0.05). Feed intake/weight gain of group 100ml was the lowest. (3) Average daily intake of group 100ml was highest, group 150ml was the lowest, and four groups were not significant (P>0.05). (4) Survival rate of group 50ml, group 150ml were more than the control group 2.13, 6.38. Group 100ml was the same to control group. Survival rate of group 150ml was the highest, and four groups were not significant (P>0.05). (5)Carcass weight of group 100ml were more than other groups, and group 100ml was significant difference with the other three groups (P<0.05); carcass weight of group 50ml, group 150ml and the control group were not significant difference(P>0.05). (6)Carcass length of group 50ml, group 100ml and group 150ml were more than control group; group 100ml and control group were significant difference (P<0.05); group 50ml, group 150ml and control group were not significant difference group (P>0.05). 100ml was the highest and more than group 50ml, group 150ml, control group 5.8, 4.35, 6.05(P<0.05). (7)Eye muscle area of group 50ml, group 100ml and group 150ml were more than control group; group 100ml was the highest and more than control group 20.5, but the difference was not significant (P>0.05). (8)Backfat thickness of group 50ml was the lowest; group 100ml was the highest; group 50ml and group 100ml were not significant (P>0.05). (9) Meat color score, marbling score, water loss percentage, drip loss, cooking loss, napole yield of four groups were not significant (P>0.05); water holding capacity of group 150ml was better than others. The Shear force of group 50ml, group 100ml and group 150ml were less than control group, the difference was not significant (P>0.05). Intramuscular fat of group 50ml were better than others, and crude protein of group 150ml were better than others, and the difference was not significant (P>0.05). (10)SOD activity of group 50ml, group 100ml and group 150ml were not significant (P>0.05), more than control group 12.19(P<0.05), 39.05(P<0.05), 34.81(P<0.05). MDA content of group 100ml was the same to group 150ml, and MDA content of group 50ml was the same to control group; MDA content of group 100ml and 150ml were less than group 50ml and control group 10.53, the difference was not significant (P>0.05).In a word, our study indicated that feeding lactic acid bacteria liquid can improve the pig growth performance and carcass traits of finishing pigs, and feeding 100ml lactic acid bacteria liquid had the best effect. Feeding lactic acid bacteria liquid can improve the survival rate of pigs, and feeding 150ml lactic acid bacteria liquid had the best effect. Water holding capacity, shear force, crude ash and TC content of pork had improvement trend, and feeding 150ml lactic acid bacteria liquid was better. Key words: Pigs; Lactic Acid Bacteria; Add Feeding; Growth Performance; Carcass Characteristics; Meat Quality1 引言近几年，我国经济发展水平不断提高，人们生活质量不断改善，猪肉产品质量和安全问题开始受到社会的广泛关注。消费者开始选择绿色、有机、无公害的猪肉产品。然而，在常规养殖中，抗生素和化学药物等物质的长期使用及滥用，不仅破坏了动物肠道微生态平衡，降低其免疫力，而且对动物肉质的质量安全问题产生不利影响，直接影响人类的健康。为解决上述问题，寻找一种无毒、无害、无残留，能够替代抗生素和化学药物而在养殖业中广泛使用成为当前的研究热点，乳酸菌制剂就是在这种环境下开发出来的抗生素和化学药物的替代品。1.1 乳酸菌的研究进展1.1.1 乳酸菌及其生物学特点乳酸菌（Lactic Acid Bacteria）是一群形态、生理学特性和代谢性能不完全相同的无芽孢、革兰氏染色阳性细菌总称（凌代文等，1998）。乳酸菌细胞形态为球菌或杆菌，不产生孢子，耐酸而不耐高温，不运动或很少运动，能够耐受胃中的酸性环境。其代谢类型为异养厌氧型，属于原核生物细菌，对营养要求严格，除了碳源外，还需要多种氨基酸、维生素（核黄素、泛酸、烟酸、硫胺素、叶酸、生物素）、嘌呤和嘧啶等。乳酸菌是一类相当庞杂的群体，可以从乳糖或葡萄糖发酵过程中生成乳酸，除少部分菌种外，大部分在人体内不可缺少且具有重要生理功能。1.1.2 乳酸菌的类型自然界中的乳酸菌可分为至少18个属，200多个品种。在2003年12月，我国农业部在318号公告中公布15种能在饲料中添加的微生物：植物乳杆菌（Lactobaillus plantarum）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus aci dophilus）、地衣芽胞杆菌（Bacillus licheniformis）、乳酸乳杆菌（Lactobacillus lactis）、屎肠球菌（Streptococcus faecium）、沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）、乳酸肠球菌（Streptococcus lactis）、两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum）、粪肠球菌（Streptococcus）、产朊假丝酵母（Candida utilis）、戊糖片球菌（Pediococcus pentosaces）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）（张西杰，2007）。1.1.3 乳酸菌的生物学功能1 营养作用2 维持肠道微生态平衡3 抗菌作用4 提高动物机体免疫功能 5 降低胆固醇 6 抗肿瘤作用1.2 本研究的目的及意义乳酸菌及其代谢产物通过调节肠道内的酸性环境、调理肠道有益菌群、抑制有害菌，可以极大的提高饲料消化利用率和猪群的健康状况，减少肠道中胺、氨、硫化氢、吲哚等有害代谢产物的生成及其对消化道乃至胴体的影响，使肥育猪自然免去了异味，从而改善肉质。此外，肠道乳酸菌因极大的提高饲料消化利用率，从而减少了粪便中氨氮物质的整体排放量，养殖环境也随之得到改善。本研究以杜长大三元杂交猪为试验对象，系统研究添加乳酸菌对生长育肥猪育肥性能、胴体性状和肉质特性的影响，以及确定乳酸菌的最适添加量，为提升规模化猪场的养殖效益、为乳酸菌在猪生产中的推广应用以及优质肉猪和优质猪肉的生产提供客观科学依据。2 材料与方法2.1 试验猪来源及分组试验猪选自山东银宝食品有限公司养猪场，选择80日龄，体重约30kg健康无病、生长均匀的杜长大三元杂交猪216头，随机分成4组，每组54头、分3个圈舍群体饲养，每圈舍18头。乳酸菌液每天每头猪饲喂量：试验一组50ml，试验二组100ml，试验三组150ml，对照组0ml。乳酸菌液通过饮水饲喂。乳酸菌液由山东宝来利来生物工程股份有限公司研发的乳酸菌自动发酵罐发酵制备，发酵液乳酸菌浓度1×109cfu/ml，乳酸含量30mg/ml，pH在3.5-4.5之间。自由采食，自由饮水，其他饲养管理条件相同。全部试验猪饲喂至平均约100kg体重时结束，每组随机抽样屠宰5头，现场进行胴体性能测定，并取背最长肌样带回实验室进行肉质测定。其中背最长肌肉用于大理石纹评定、肉色评定与测定、失水率测定、滴水损失测定、烹饪损失测定、拿破率测定、肌肉嫩度值测定、宰后第1d SOD活性与MDA含量测定、干物质含量测定、肌内脂肪（IMF）含量测定、粗蛋白含量测定、粗灰分含量测定。2.2 主要仪器与试剂2.2.1 主要仪器KSW-5-12A茂福炉(上海沪粤明科学仪器有限公司)；PB-10 pH计(德国Sartorius)；移液器(德国Eppendorf)；15ml离心管(corning)；Anke TGT-16G台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；HH-2数显水浴锅(常州国华电器有限公司)；乳酸菌自动发酵罐(山东宝来利来生物工程股份有限公司)；BS224S电子天平(德国Sartorius)；DS-1匀浆机(上海标本模型厂)；定氮蒸馏装置；全自动凯氏定氮仪(意大利VELP)；肉色5级评分图(美国)；索氏抽提装置；DZF-6090真空干燥箱(上海越众仪器有限公司)；CLM3型肌肉嫩度计(东北农大)；日立835型高速氨基酸自动分析仪(日本日立)；DHG-9070A电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)；Gc-2014气相色谱仪测定(日本岛津公司)；UV-7504单光束紫外-可见分光光度计（上海欣茂仪器有限公司）；高效液相色谱仪（美国Aligent）2.2.2 主要试剂及配制SOD试剂盒、MDA试剂盒、羟脯氨酸试剂盒（南京建成生物工程研究所）；总胆固醇试剂盒-CHO(北京北化康泰临床试剂有限公司)；冰醋酸(分析纯)；蒸馏水；硫酸铜；硫酸钾；硫酸；苯；石油醚；乙醚；KOH；甲醇；2%硼酸溶液；40%氢氧化钠溶液；0.05N盐酸标准溶液；测蛋白所用混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液；核苷酸提取液：5%高氯酸溶液；5mol/L和0.5mol/L氢氧化钠溶液；洗脱液为磷酸三乙胺甲醇溶液：取磷酸3.5ml溶于适量去离子水中，再加入7.0ml三乙胺，混合后加去离子水至100ml，.调节pH至6.5，用0.45um滤膜过滤，脱气，临用时加入1%色谱纯甲醇；林格氏液（Ringer液）：称取NaCl 7g、 KCl 0.3g和CaCl2 0.25g溶于少量水中，并定容至1000ml。2.3 胴体性状的测定胴体长：在胴体倒挂时从耻骨联合前缘至第一肋骨与胸骨联合点前缘间的长度；单位：cm。背膘厚：屠宰胴体在6-7胸椎结合处测定垂直于背部的皮下脂肪层厚度（不包括皮厚）；单位：mm。眼肌面积：胸腰接合处背最长肌的横断面积。将胴体放平用钢尺仔细测量，按高×宽×0.7系数即为眼肌面积；单位：cm2。1号肉(颈背肌肉)：指从第五、六肋骨中斩下的颈背部位肌肉；1号肉比率=1号肉重/胴体重×100 %。2号肉(前腿肌肉)：指从第五、六肋骨中间斩下的前腿部位肌肉；2号肉比率=2号肉重/胴体重×100 %。3号肉(大排肌肉)：指在脊椎骨下约4-6cm肋骨处平行斩下的脊背部位肌肉；3号肉比率=3号肉重/胴体重×100 %。4号肉(后腿肌肉)：指从腰椎与荐椎连接处（允许带腰椎一节半）斩下的后腿部位肌肉；4号肉比率=4号肉重/胴体重×100 %。2.4 肉样前处理、测定项目及方法2.4.1 肉样前处理试验猪屠宰后一小时以内，取整条背最长肌和一块100cm2腹部五花肉。背最长肌在胸腰椎结合处分离，背最长肌腰段在15下保存24h，然后转移到0-4保存48小时，用于嫩度测定；胸段眼肌在宰后0-4贮存24h后测定大理石纹、肉色、失水率、滴水损失、烹饪损失、拿破率。宰后在0-4条件下每间隔24h 取眼肌肉样和五花肉各2-5g，取后样品装入5ml的离心管中，然后-20保存，测定宰后肌肉1d、2d、3d、4d、5d、6d的SOD活性和MDA含量。取宰后24h胸段眼肌和五花肉各200g左右，用匀浆机绞碎制作匀浆，然后-20保存，匀浆后的肌肉和五花肉用于肌内脂肪、蛋白质、粗灰分、胶原蛋白、脂肪酸、氨基酸等的测定。2.4.2 测定项目及方法(1) 大理石纹评定大理石纹采用美国标准大理石纹5级评分图对照评定，1分为脂肪痕量，2分为脂肪微量，3分为脂肪中量，4分为脂肪多量，5分为脂肪过量，两分之间允许设0.5分值。(2) 肉色的评定与测定肉色的评定：肉色采用美国标准肉色5级评分图对照评定，分值精确判断到0.5分肉色的测定：采用色差仪测定猪肉颜色指标：L*值、a*值、b*值，其中L*值称为明度系数，变化范围0-100，L*值0表示黑色，L*值100表示白色，在0到100之间为不同的亮度值；a*值为红度，+a*值表示红色，-a*值表示绿色；b*值为绿度，+b*值表示黄色，-b*值表示蓝色，a*值、b*值决定色调。由于肉面颜色随位置而异，故每个肉面按每15平方厘米重复4次的频率不断改变位置重复度量，最后取平均数。 (3) 肌肉pH测定pH计先用标准液pH9.18和pH6.86校正。将校正好的pH计电极插入宰后45min时热胴体眼肌中段内，插入1cm以上，读取pH1。将宰后04保存24小时的眼肌取出，将眼肌中段切开，把pH计电极插入切缝中，然后读取pH24。(4) 失水率测定取面积为5.0cm2，厚度为1cm的肉样，称压前重（W1），肉样上下各垫1层滤纸和16层吸水纸，加压35kg，保持5min，称压后重（W2）。失水率（%）=（W1-W2）/W1×100%。(5) 滴水损失测定将肉样用金属挂钩吊起，金属钩另一端系一长绳用来悬挂肉样。肉样外面套一层塑料袋，袋口系紧，将肉样封在袋内，袋内留有一定空间能够盛装肉样渗出的水滴。在0- 4冰箱中悬挂48h，打开塑料袋，用滤纸轻轻吸去肉样表面水分，然后称悬挂后的肉重。肉样滴水损失（%）=（肉样挂前重-肉样挂后重）/肉样挂前重×100 %。(6) 烹饪损失测定把做完滴水损失的肉样放入聚乙烯塑料袋内，然后排出袋内空气后封住袋口，务必使肉样表面与塑料袋贴紧。将封口后的肉样袋置于75水浴中加热30 min。将水浴后的肉样袋放在15流水中冷却40 min，然后打开塑料袋用滤纸吸走肉样表面水分后称重。烹饪损失（%）=（水浴前重-水浴后重）/水浴前重×100 %。(7) 拿破率测定称取100g肌肉，切成1 立方厘米大小肉丁。将100g肉丁和20g腌制液（腌制液含NaCl 12 %，NaNO2 0.07 %）混合在容器中，在4 条件下腌制24 h，然后用纱袋包裹后，在沸水浴煮10min。把水浴后的样本纱布袋打开，将肉样静置在桌面上2.5 h，等渗出液排出后再称重。拿破率（%）= 处理后重量/处理前重量×100 % 。(8) 肌肉嫩度值测定将温度计插入肉的中央，然后把肉放入80恒温水浴锅中加热，直到肌肉中心温度达到70为止，取出肌肉后等其冷却到20。垂直肌纤维方向切取表面积为1cm×1cm，长为5cm的肉立方体，按照嫩度测定仪使用说明，记录8个肉块的剪切力值，计算算术平均数。单位用牛顿（N）表示。(9) SOD活性与MDA含量测定使用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒，根据试剂盒要求配置相关试剂，按照南京建成生物工程研究所实验方法学制备组织10匀浆上清，测定宰后肌肉和五花肉SOD活性和MDA含量。SOD活性测定原理：通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基(O2-)，后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见分光光度计测定其吸光度。当被测样品中含SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管吸光度值低于对照管的吸光度值，通过计算可求出被测样品中的SOD活性。MDA含量测定原理：过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）可与硫代巴比妥酸缩合，形成红色产物，在532nm处有最大吸收峰。(10) 干物质含量测定称取5g左右肉盛在称量瓶中置于80烘箱中脱水至恒重，然后放在干燥器中冷却至室温，称重。计算公式：干物质含量=烘干肉样重/鲜肉重×100。(11) 肌肉肌内脂肪（IMF）测定采用传统索氏抽提法测定。将烘干后的肉样，用滤纸包好放入萃取套管中，套管最上部塞上脱脂棉，将套管放入脂肪收集瓶，加入石油醚约160毫升，将收集瓶大半部分浸入数显水浴锅中，启动冷凝水，水浴锅温度设置在50，虹吸循环在10次/h以上，连续萃取6小时。然后取下脂肪收集瓶置于干燥器中过夜，于次日将收集瓶置于80真空干燥箱（13千帕以下）中处理1.5小时，再将收集瓶取出后称重。计算公式：肌内脂肪 =（带有脂肪瓶重-空瓶重）/样本重×100。(12) 粗蛋白含量测定乳酸菌前期试验：标准凯式定氮法测定。乳酸不同添加量试验：VELP全自动凯氏定氮仪测定(13) 粗灰分含量测定将干净坩埚放入茂福炉中，在550下灼烧30min，取出，在空气中冷却约1 min，放入干燥器冷却30 min，称重，至恒重。在已恒重的坩埚中称取5g肉样，准确至0.0002g，在电炉上小心炭化，再放入茂福炉中，于550灼烧8h，取出，在空气中冷却约1 min，放入干燥器中冷却30 min，称重。再同样灼烧1 h，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。计算公式：粗灰分含量=(坩埚质量+灰分质量)-坩埚质量/样品质量×100。2.5 结果统计分析试验数据采用SAS（9.1）统计软件进行分析，用ANOVA程序进行方差分析，用Duncans方法进行多重比较，试验数据用平均数±标准差(M±SD)表示。3 结果与分析3.1 饲喂不同剂量乳酸菌对猪生长性能的影响由表1可看出，50ml组、100ml组和150ml组平均末重分别比对照组多3.07、7.75、2.07，这四个组差异不显著（P>0.05）。 50ml组、100ml组和150ml组平均日增重差异不显著（P>0.05），这三组平均日增重都大于对照组，其中100ml组平均日增重比对照组多13.11（P<0.05），其他两组与对照组差异不显著（P>0.05）。50ml组、100ml组和150ml组料肉比分别比对照组低7.43、8.67、10.84，但这四个组差异均不显著（P>0.05）。100ml组日采食量最高，150ml组日采食量最低，四个组差异不显著（P>0.05）。50ml组和150ml组成活率分别比对照组高2.13、6.38，100ml组与对照组持平，这四个组差异均不显著（P>0.05），其中150ml组成活率最高。表1 饲喂不同剂量乳酸菌对猪生长