小鼠及蛙类实验基本技术课件.ppt
21、没有人陪你走一辈子，所以你要适应孤独，没有人会帮你一辈子，所以你要奋斗一生。22、当眼泪流尽的时候，留下的应该是坚强。23、要改变命运，首先改变自己。24、勇气很有理由被当作人类德性之首，因为这种德性保证了所有其余的德性。-温斯顿丘吉尔。25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的，它只是让人们的脚放上一段时间，以便让别一只脚能够再往上登。,小鼠及蛙类实验基本技术,小鼠及蛙类实验基本技术21、没有人陪你走一辈子，所以你要适应孤独，没有人会帮你一辈子，所以你要奋斗一生。22、当眼泪流尽的时候，留下的应该是坚强。23、要改变命运，首先改变自己。24、勇气很有理由被当作人类德性之首，因为这种德性保证了所有其余的德性。-温斯顿丘吉尔。25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的，它只是让人们的脚放上一段时间，以便让别一只脚能够再往上登。小鼠及蛙类实验基本技术小鼠及蛙类基本实验技术Basic Experimental Technique of Mouse and Frog医学基础实验教学中心洪天国2012年5月小鼠及蛙类基本实验技术,1.小鼠捉拿（Mice Seizure）1）双手捉拿方法,三、实验方法：小鼠实验技术,1,2,3,4,右手抓尾后拉，左手拇指和食指抓住小鼠头颈部皮肤，将其固定于左手大鱼际处；拉直四肢并用左手无名指、小指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其它实验操作。,2)单 手 捉 拿 方 法,3,1,2,4,2.小鼠腹腔注射（Intraperitoneal Injection）左手固定小鼠，使腹部朝上，右手持注射器，取45角刺入左侧下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏，推注前应回抽确认。注射量一般为0.10.2 ml/10g体重。,三、实验方法：小鼠实验技术,3.小鼠灌胃（Intragastric Administration）,1,小白鼠,1,灌胃量一般为 0.10.3ml/10g体重。,2,以左手捉持小鼠，使头部朝上，保持头颈部平直。右手持装有灌胃针头的注射器，自右口角插人口腔，从上腭进入食管。如遇阻力，应退出后重插，不能强力插，以免穿破食管或误入气管。,三、实验方法：小鼠实验技术,三、实验方法：蟾蜍(Toad)的捉拿,用左手将动物贴紧在手掌中，并以左手中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住背部、头部和前肢，右手进行操作。根据实验需要，可用图钉，采取俯卧位或仰卧位固定在蛙板上。,注意:抓取蟾蜍时，禁忌挤压两侧耳部毒腺，以免毒液射入眼中。,枕骨大孔,左手握蟾蜍，食指下压吻端，拇指按压背部，其余三指紧贴腹部。找到枕骨大孔刺入1-2mm，分别捣损脑组织和脊髓。脑和脊髓完全破坏的标志是：呼吸停止，四肢松软并处于对称位置。,三、实验方法：蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备,1.破坏脑脊髓（Damage of Spinal Cord and Brain）,三、实验方法：蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备,在骶髂关节水平上1cm处剪断脊柱，去除头、前肢和内脏，保留部分脊柱和下肢。用任氏液小心冲洗坐骨神经及其周围组织上的血液。,2.剪除躯干上部及内脏（Prune of Upper Part of Torso and Viscera）,剪去尾骨,剥去余下组织的皮肤,沿脊柱正中到耻骨联合将标本剪开,标本放到盛有任氏液的烧杯中。,三、实验方法：蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备,3.剥皮（Skinning）,1,2,3,4,4.游离坐骨神经（Free of Sciatic Nerve）腓肠肌向上将标本固定于蛙板上，由脊柱仔细将坐骨神经分离至膝关节处，并在脊柱旁结扎。,三、实验方法：蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备,5.制成坐骨神经腓肠肌标本（Making of Ischiatic Nerve-Gastrocnemius Muscle Specimen）腓肠肌向上将标本固定于蛙板上，由脊柱仔细将坐骨神经分离至膝关节处，并在脊柱旁结扎。6.标本检验(Specimen Examination)用锌铜弓（任氏液预先湿润）轻轻刺激坐骨神经，腓肠肌收缩即表示标本制备完好。,三、实验方法：蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备,视频：蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备,四、注意事项,捉拿小鼠时应规范操作，避免被咬。腹腔注射时，针头刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破内脏。针头与腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。灌胃时，针头沿鼠口角通过食管进入胃内。灌时如很通畅，则表示针头已进入胃内；如动物有呕吐或强烈挣扎，必须拔出后按上述方法重新操作。如进针不顺，决不可硬向里插。,小鼠实验,抓取蟾蜍时，小心毒液。,四、注意事项,蛙类实验,抓取蟾蜍时，小心毒液。分离神经时，应用玻璃分针。保持坐骨神经腓肠肌标本活性（加任氏液、不要用手和器械夹捏）。,四、注意事项,蛙类实验,玻璃分针,机能实验室动物实验规章制度,动物领取：实验开始后，按规定数量在动物房领取，领完动物后及时关闭鼠笼或蛙笼。实验过程中非操作因素导致动物死亡，须经主讲老师批准后方可重新领取，严禁擅自拿取。动物实验：应爱惜实验动物，严禁浪费。动物尸体处理：实验完毕后，动物尸体集中于回收桶，由值日同学负责处理。,开始实验,小鼠及蛙类实验基本技术器械清单,2.蛙类实验基本技术,1:小鼠灌胃、腹腔注射方法,鼠灌胃器,锌铜弓,1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。非洲2、最困难的事情就是认识自己。希腊3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。黑塞4、与肝胆人共事，无字句处读书。周恩来5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。培根,
