样品前处理不经有机破坏的方法金属离子不直接与碳原子相连例如课件.ppt
第五章 药物定量分析与分析方法验证,第五章 药物定量分析与分析方法验证,第一节 定量分析样品的前处理方法第二节 定量分析方法的特点第三节 药品分析方法的验证第四节 生物样品分析方法的基本要求,分析样品前处理,分析前要采用一定的方法,使待测药物或待测元素转化为适宜的状态后,再进行分析测定,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,样品前处理,样品种类：1.含卤素元素（F、Cl、Br、I）2.含金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn、Bi)3.含N、P、S、Se等元素4.生物样本,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,含卤素元素,1 卤素与脂肪链的碳原子相连 结合不牢固2 卤素与芳环相连结合牢固,1 含金属有机药物:金属离子不直接与碳原子相连.为有机酸及酚的金属盐或配位 化合物,金属原子结合不牢固,在溶液中可直接离解出金属离子.2 有机金属药物:金属离子直接与碳原子以共价键 相连.结合状态比较牢固,在溶液 中不能直接离解出金属离子.,含金属元素,样品前处理,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,根据卤素或金属在分子中结合牢固程度不同而异.,不经有机破坏的分析方法,经有机破坏的分析方法,直接测定法经水解后测定法经氧化还原后测定法,湿法破坏法干法破坏法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,样品前处理,不经有机破坏的方法,（1）金属离子不直接与碳原子相连 例如：乳酸钙 0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA滴定 钙紫红素指示剂（配位滴定法）,1 直接测定法配位滴定法，氧化还原法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,（2）适用于C-M(金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物,在水溶液中可以电离.例如：富马酸亚铁溶于热硫酸，同时分解释放出亚铁离子，可选用铈量法进行测定.(氧化还原法),例如：葡萄糖锑钠（游离Sb5+具有氧化性）Sb5+2KI Sb3+I2 I2+2Na2S2O3 2NaI+2Na2S4O6,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,不经有机破坏的方法,2 经水解后测定法 适用卤素原子与碳原子结合不牢固药物.如卤素与脂肪碳链相连.,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,不经有机破坏的方法,（1）碱水解后测定法 将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中,加氢氧化钠溶液回流使其水解,将有机结合的卤素,经水解作用转变为无机的卤素离子,然后选用间接银量法进行测定.,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,不经有机破坏的方法,CCl3C(CH3)2 OH+NaOH(CH3)2 CO+NaCl+HCOONa NaCl+AgNO3 AgCl+NaNO3 AgNO3+NH4SCN AgSCN+NH4NO3,CCl3C(CH3)2 OH+NaOH(CH3)2 CO+NaCl+HCOONa NaCl+AgNO3 AgCl+NaNO3 AgNO3+NH4SCN AgSCN+NH4NO3,三氯叔丁醇,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,（2）酸水解后测定法 含金属有机药物与适当的酸共热，将不溶性的金属盐类水解置换为可溶性盐，然后选择配位滴定法或剩余酸碱滴定法测定.,Mg(C17H35COO)2+H2SO4 MgSO4+2 C17HCOOH H2SO4+NaOH Na2SO4+H2O,硬脂酸镁,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,不经有机破坏的方法,3 经还原后测定法,（1）碱性还原后测定卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后测定.,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,不经有机破坏的方法,泛影酸（卤素原子与芳环相连，化学键牢固）,+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O,Zn粉,NaI+AgNO3 AgI+NaNO3,曙红钠为吸附指示剂 黄色 玫瑰红色,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,（2）酸性还原后测定在醋酸酸性条件下加还原剂锌粉,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后用银量法测定.如：碘番酸含量测定,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,不经有机破坏的方法,有机破坏方法,1 湿法破坏法2 干法破坏法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,经有机破坏的方法,1 湿法破坏法,硝酸-高氯酸法 破坏力强，不适于含氮杂环 硫酸-硝酸法 适于大多数有机物质破坏 硫酸-硫酸盐法 常用于含砷、锑有机药物*凯氏定氮法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,经有机破坏的方法,*凯氏定氮法药物分析杜马氏法元素定量分析范斯莱克法生化分析(氨基氮测定),氮测定法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,(1)原理含氮供试品与浓硫酸共热,供试品中所含氮转变成氨,并与硫酸结合为硫酸氢铵(NH4HSO4)（主要）和硫酸铵(NH4)2SO4（微量）用NaOH碱化后,释出氨(NH3),随水蒸气馏出,用硼酸溶液或定量的酸吸收后用标准酸液（或碱液）滴定,用空白试验校正.,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,供试品 NH4HSO4+(NH4)2SO4(NH4)2SO4+2NaOHNa2SO4+2NH3+2H2O NH4HSO4+NaOHNaHSO4+NH3+H2O,吸收:2%硼酸溶液吸收液,H2SO4,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,（2）仪器,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,常量法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,（3)测定法分为3个步骤 消解(常量：凯氏烧瓶中进行)操作将样品、H2SO4、K2SO4、CuSO4放入凯氏烧瓶中一起加热,使被测有机含氮化合物中的N 全部转变成NH3并以铵盐的形式固定(NH4)2SO4、NH4HSO4；消解剂：硫酸辅助消解剂：硫酸钾、30%过氧化氢、高氯酸,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,消解中各试剂作用H2SO4氧化剂和炭化剂,生成SO2和H2O;K2SO4提高H2SO4沸点缩短消解时间;CuSO4催化剂,使消解速度加快;,注意：分解完全的依据是分解液应为 无色或透明绿色.,消解产物NH4HSO4、(NH4)2SO4,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,蒸馏与吸收 蒸馏:消解液加入40%的NaOH溶液后 水蒸气蒸馏.,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,滴定a.直接滴定法：滴定液H2SO4(0.005mol/L)每1ml0.005mol/L H2SO4液=0.1401mg的N指示剂：甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 终点颜色：蓝绿色 灰紫色 NH3+H3BO3NH3.H3BO3 2NH3.H3BO3+H2SO4(NH4)2SO4+2H3BO3,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,b.剩余滴定法吸收液:定量、过量的标准盐酸或硫酸。,滴定:用标准碱溶液滴定过量的酸,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,(4)注意事项 H2SO4破坏时开始要缓缓加热,以防大量泡沫冲出（CO2、SO2);开始破坏时凯氏烧瓶上不加小漏斗可使供试品中水份充分蒸去,待颜色变黑时再将小漏斗插到瓶口防止H2SO4的快速蒸发;加热时温度应均匀,并要不断转动凯氏烧瓶,以利于破坏完全;破坏时要在通风橱内进行.,凯氏定氮法,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,凯氏定氮法,凯氏定氮并不能将所有结构状态的氮定量地转变为氨.1.如有-N=N-、-NH-NH-结构，消解时可分解为 氮气逸出，需在消解前加锌粉还原后再依法 处理.2.含氮量较高（大于10%）的样品，可在样品中 加入少量的多碳化合物，如蔗糖、淀粉等作为 还原剂，以利于氮转化为氨.3.杂环中的氮,因键不易断裂,可用氢碘酸还原为氢 化杂环化合物.,第五章 药物定量分析与分析方法验证-样品前处理,
