茶叶中咖啡因提取方法优选毕业论文.doc

学号 102490 陕西国际商贸学院本科毕业论文茶叶中咖啡因提取方法优选二 级 学 院：医药学院专 业 名 称：药物制剂学 生 姓 名：赵阳阳指 导 教 师：杨 莎 讲师二一四年六月郑 重 声 明 本人呈交的学位论文，是在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，所有数据、图片资料真实可靠。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含他人享有著作权的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确的方式标明。本学位论文的知识产权归属于培养单位。本人签名： 日期： 摘 要咖啡因具有刺激心脏、兴奋大脑神经和利尿等作用。但过度摄取咖啡因可导致血压升高和失眠，一部分饮用者还会出现心悸。目前人工合成是获得咖啡因的主要方式，而人工合成的咖啡因含有原料残留,长期食用会产生残毒作用,因此人们正在逐渐研发出从茶叶中提取咖啡因的方法，来改善存在的不良现象。但目前文献报道的关于从茶叶中提取咖啡因的方法及条件均不太完善,本课题选不同提取方法以便确定从茶叶中提取咖啡因最好的方法。关键词：茶叶；咖啡因提取；方法；优选AbstractCaffeine has a stimulating heart, brain and excitement diuretic effect. However, excessive intake of caffeine can lead to high blood pressure and insomnia, palpitations part drinkers will appear.，the main way to get synthetic caffeine, and caffeine-containing synthetic material residues, residues will have the role of long-term consumption, so people are gradually developed a method to extract caffeine from tea to improve undesirable phenomena exist .the current literature methods and conditions reported on the extraction of caffeine from tea were less than perfect, the subject selected different extraction methods to extract caffeine from tea leaves to determine the best approach. Key words: tea; Caffeine extraction; Methods; optimization目 录1 绪论1.1 茶叶的简介11.1.1 概述11.1.2 基本成分11.1.3 茶叶基本成分之功能11.1.4 茶的功效21.2 咖啡因的性质、结构和作用32 茶叶中咖啡因的分离提取方法2.1 主要材料与试剂设备52.2 升华法52.2.1 实验原理52.2.2 操作步骤52.2.3 实验说明及注意事项62.2.4 实验结果分析与结论72.3 溶剂提取法72.3.1 醇提取72.3.2 水提取92.4 吸附法102.4.1 活性炭预处理102.4.2 样品的制备102.4.3 茶多酚和咖啡因的质量分数测定102.4.4 咖啡因标准曲线绘制112.4.5 吸附时间对茶多酚和咖啡因吸附的影响112.4.6 小结122.5 超临界CO2提取122.5.1 实验方法122.5.2 结果与分析132.5.3 结论14 结论15参考文献16致谢171 绪论1.1茶叶的简介1.1.1 概述饮茶有许多益处，这是众所周知的。但饮茶为什么会有许多好处呢？这对一般人来说，是知其然而不知其所以然。随着科学的发展，到了19世纪初，茶叶的成分才逐渐明确起来。经过现代科学的分离和鉴定，茶叶中含有机化学成分达四百五十多种，无机矿物元素达四十多种。茶叶中的有机化学成分和无机矿物元素含有许多营养成分和药效成分。有机化学成分主要有：茶多酚类、植物碱、蛋白质、氨基酸、维生素、果胶素、有机酸、脂多糖、糖类、酶类、色素等。而铁观音所含的有机化学成分，如茶多酚、儿茶素、多种氨基酸等含量，明显高于其他茶类。无机矿物元素主要有：钾、钙、镁、钴、铁、锰、铝、钠、锌、铜、氮、磷、氟、碘、硒等。铁观音所含的无机矿物元素，如锰、铁、氟、钾、钠等均高于其他茶类1。1.1.2 基本成分 1儿茶素类：俗称茶单宁，是茶叶特有成份，具有苦、涩味及收敛性。 2咖啡因：带有苦味，是构成茶汤滋味的重要成份。 3矿物质:茶中含有丰富的钾、钙、镁、锰等11种矿物质。1.1.3 茶叶基本成分之功能1.儿茶素类：俗称茶单宁,是茶叶特有成份，具有苦、涩味及收敛性。在茶汤中可与咖啡因结合而缓和咖啡因对人体的生理作用。具抗氧化、抗突然异变、抗肿瘤、降低血液中胆固醇及低低密度酯蛋白含量、抑制血压上升、抑制血小板凝集、抗菌、抗产物过敏等功效。2.咖啡因：带有苦味，是构成茶汤滋味的重要成份。红茶茶汤中，与多无酚类结合成为复合物；茶汤冷后形成乳化现象。茶中特有的儿茶素类及其氧化缩和物可使除中咖啡因的兴奋作用减缓而持续，故喝茶可使长途开车的人保持头脑清醒及较有耐力。3.矿物质茶中含有丰富的钾、钙、镁、锰等11种矿物质。茶汤中阳离子含量较多而阴离子较少，属于碱性食品。可帮助体液维持碱性，保持健康。钾：促进血钠排除。血钠含量高，是引起高血压的原因之一，多饮茶可防止高血压。氟：具有防止蛀牙的功效。锰：具有抗氧化及防止老化之功效，增强免疫功能，并有助于钙的利用。因不溶于热水，可磨成茶粉食用。4.维生素类胡萝卜素：在人体可转换为维生素,但要和茶未一起饮咽才可补充。B群维生素及维生素C:为水溶性，可由饮茶中获取。5.其他机能成份黄酮醇类具增强微血管壁消除口臭功效。皂素抗癌、抗炎症功效。胺基酪酸于制茶过程中强迫茶叶进行无氧呼吸而产生，称佳叶龙茶可以防高血压。1.1.4 茶的功效中国古人曾认为茶有十德：以茶散郁气，以茶驱睡气，以茶养生气，以茶除病气，以茶利礼仁，以茶表敬意，以茶尝滋味，以茶养身体，以茶可行道，以茶可雅志。唐朝卢仝的七碗茶歌也对茶做了非常形象的描述：“一碗喉吻润，二碗破孤闷，三碗搜枯肠，惟有文字五千卷。四碗发轻汗，平生不平事，尽向毛孔散。五碗肌骨清，六碗通仙灵。七碗吃不得也，唯觉两腋习习清风生。”1.1.4.1 茶药与茶疗茶文化与中医药，两者间有着十分密切的关系，而且都与神农氏这一传说有关。由于茶叶有很好的医疗效用，所以唐代即有“茶药”（见代宗大历十四年王国题写的“茶药”）一词；宋代林洪撰的山家清供中，也有“茶，即药也”的论断。可见，茶就是药，并为药书（古称本草）所收载，道通天下。但近代的习惯，“茶药”一词则仅限于方中含有茶叶的制剂。由于茶叶有很多的功效，可以防、治内外妇儿各科的很多病症，所以，茶不但是药，而目是如同唐代陈藏器所强调的：“茶为万病之药”。茶不但有对多科疾病的治疗效能，而且有良好的延年益寿、抗老强身的作用。1.1.4.2 茶的二十三功效(1)少睡； (2)安神 ；(3)明目 ；(4)清头目； (5)止渴生津； (6)清热； (7)消暑； (8)解毒 ；(9)消食 ；(10)醒酒； (11)去减肥 ；(12)下气； (13)利水； (14)通便 ；(15)治痢；(16)去痰； (17)祛风解表； (18)坚齿； (19)治心痛； (20)疗疮治瘘； (21)疗饥 ；(22)益气力 ；(23)延年益寿。茶的其它功效不成系统者，尚有如下数条：格物粗谈称：“烧烟可辟蚊：建兰生丸斑，冷茶和香油洒叶上”。救生苦海称：“口烂，茶根代茶煎饮”。本草纲目：治“痘疮作痒，房中宜烧茶烟恒熏之”。1.2 咖啡因的性质、结构和作用咖啡因亦称咖啡碱,是一种甲基黄嘌呤,属生物碱类物质,化学名称为1,3,7-三甲基-3,7-二氢-1-嘌呤-2,6-二酮水合物,化学式C8H10N4O2,相对分子质量为 194.2,易溶于水、乙醚、氯仿、二氯甲烷, 能溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯, 难溶于乙醚和苯,熔点为235 -237e ,白色结晶粉末,无臭,味苦,有风化性。咖啡因结构中虽含有4个N原子,但受邻位羰基吸电子的影响,呈弱碱性2-5,其结构式如图 1.1所示。 图1.1 咖啡因的分子结构式咖啡因在生理上能刺激人体中枢神经系统引起兴奋,促进新陈代谢,加强肌肉收缩,可使人的头脑清醒,有助于思维,并可促进血液循环,利于尿液排出,解除肌体疲劳,提高劳动效率。此外,咖啡因能增强心脏和胃肠道功能、调节脂肪代谢,同时还可起到解毒的功效8。2 茶叶中咖啡因的分离提取方法2.1 主要材料与试剂设备茶叶（实验室提供）、95 %工业乙醇颗粒状活性炭( 直径为0.5-1.0mm)、实验用水为二次蒸馏水、超临界CO2提取设备（安徽省合肥市六方特种气体厂生产,型号GB4844一84,CO2纯度为99.8%）、咖啡因标样老师提供,纯度为99.82%、NaOH溶液，Na2CO3溶液，NaHCO3溶液，Ca(OH)2溶液，脂肪提取器、滤纸、酒精灯、蒸发皿、短颈漏斗、100 mL 圆底烧瓶、直型冷凝管、蒸馏头、100mL锥形瓶、接液管、布氏漏斗、抽滤瓶、751型分光光度计,上海分析仪器厂生产HA、120一50一01超临界萃取装置,南通市华安超临界萃取实业公司生产、756PC 型紫外可见分光光度计, 上海光谱仪器有限公司生产、RE-52AA 旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂生产。2.2 升华法2.2.1 实验原理是利用固体的不同蒸气压，将不纯样品在熔点温度以下加热从固态直接蒸发为蒸气，然后蒸气遇冷直接凝结(结晶)成固体，而没有液态中间过程出现的两步操作。为了提取茶叶中的咖啡因，可用适当的溶剂（如乙醇等）在脂肪提取器中连续萃取，然后蒸去溶剂，即得粗咖啡因。粗咖啡因中还含有其它一些生物碱和杂质（如单宁酸）等，可利用升华法进一步提纯。单宁与咖啡因能生成难溶盐，所以我们在实验中需用碱性试剂中和单宁酸以便咖啡因游离出来。2.2.2 操作步骤 称取10 g干茶叶放入烧杯中，加入150 ml水和适量的碱性试剂（NaOH，Na2CO3，NaHCO3，Ca(OH)2），用小火煮沸20分钟，煮沸过程中需不断搅拌。始终都必须用小火间接加热。趁热减压过滤，将滤液浓缩至10ml左右，把残液转入蒸发皿中，加入8 g生石灰粉进行吸水，用酒精灯隔着石棉网小心加热，直至完全成干粉状，使水分全部除去。冷却后，把焙干的泥土样粉末集中于蒸发皿中间，上面覆盖一张刺有许多小孔且孔刺向上的滤纸，温度不可太高以免滤纸碳化，并会把一些有色物质烘出来，使产品不纯。再在滤纸上罩一个大小合适的玻璃漏斗，漏斗颈部塞一小团疏松的棉花，用酒精灯隔着石棉网小心加热，使咖啡因升华。当滤纸上出现白色针状结晶时，暂停加热，要适当调节火焰使升华速度放慢（如图2.1所示）。冷至100左右。揭开漏斗和滤纸，仔细地把附在滤纸上及器皿周围的咖啡因用小刀刮下。残渣经拌和后重新盖上漏斗，用较大的火再加热片刻，使升华完毕。若发现有棕色烟雾时，应立即停止加热。否则升华产物受污染，也受损失。冷却后称重。 图2.1 升华装置2.2.3 实验说明及注意事项(1) 在升华的过程中，应仔细观察，当滤纸上出现大量白色针状晶体时，即可停止加热。 (2) 升华初期，漏斗壁上会有水汽产生，应用棉花擦干。 (3)冷却后用硬卡片把附在滤纸和漏斗上的晶体刮在一个干净的表面皿中。残渣经搅拌后，用较大的火进行第二次升华。(4)热的蒸发皿不能直接放到桌面上，以免烫坏桌面。(5)刮下咖啡因时要小心操作，防止混入杂质。(6)拌入生石灰要均匀，生石灰的作用除吸水外，还可中和除去部分酸性杂质（如鞣酸）。(7)升华过程中要控制好温度。若温度太低，升华速度较慢，若温度太高，会使产物发黄（分解）。2.2.4 实验结果分析与结论以上实验主要对各种不同碱性试剂的选择进行了研究，实验结果列于表2.1。表2.1 不同碱性试剂的比较碱性试剂碱性试剂质量/g茶叶状态茶汁颜色过滤难易提取咖啡因质量/gNaOH1.00腐烂状黑很难0.06Na2CO34.00腐烂状深褐很难0.05NaHCO34.00正常棕黄很难0.04Ca(OH)24.00轻微腐烂状棕黄较易0.06由表中可以得出作为碱性试剂提取咖啡因最好的试剂是用Ca(OH)2，选用NaHCO3时，虽茶叶状态正常，但太难过滤，不利于实验的进行，故也不能选它。而Ca2可与茶叶中单宁或没食子酸形成不溶性的钙盐，使咖啡因作为可溶性的生物碱留在水溶液中，易于分离和最后的提纯，故选用Ca(OH)2时，茶叶腐烂程度不大，茶汁颜色较淡，而且在实验过程中明显能看到有大量絮状沉淀析出，能更好的除去单宁酸。2.3 溶剂提取法2.3.1 醇提取 2.3.1.1 实验主要步骤先把茶叶末在研钵内捣细，再用电子天平称取10g茶叶末,装入150ml索氏提取器的滤纸套管内,在250ml圆底烧瓶内加入95ml的95%乙醇,水浴加热,使热乙醇多次溶解茶叶中的咖啡因,这样连续抽提2-3h,直到提取液颜色变浅为止，停止加热。稍冷却后，将索氏提取装置改装成蒸馏装置,把提取液中的大部分乙醇蒸出（回收），蒸馏瓶内剩10-20ml黑绿色提取液为止。将残液倾入蒸发皿中, 加入4g生石灰粉, 搅成浆状，在蒸汽浴上蒸干，除去水分，使成粉状。然后将蒸发皿移至石棉网上用酒精灯小火加热,将一张刺有许多小孔且孔刺向上的滤纸盖在蒸发皿上, 再在滤纸上罩上一只干燥的大小合适的玻璃漏斗(漏斗颈部塞一小团疏松的棉花),用酒精灯隔着石棉网小心加热，适当控制温度。当滤纸上出现白色针状结晶时, 使升华速度尽可能减慢, 以提高结晶纯度。当玻璃漏斗出现棕色烟雾时, 即表示升华完毕, 停止加热。冷却后, 取下漏斗，轻轻揭开滤纸,用刮刀将附着在滤纸上下两面及漏斗内壁的咖啡因刮下9,残渣经搅拌后，再用较大的火加热片刻，使升华完全，合并几次升华的咖啡因，最后用电子天平称量。此法用3种不同的时间进行提取：120,150,180min，结果如表2.2。2.3.1.2 实验主要装置（图2.2） 2.2.1 2.2.2 2.2.3 图2.2 实验装置2.3.1.3 实验结果与结论 表2.2 提取结果次数时间/t120min150min180min170.277.582.7268.781.185.7372.382.988.0提取咖啡因量平均值/mg70.580.685.5由上表可以看出提取时间不同，提取的咖啡因的量不同，在一定的时间范围内，咖啡因提取量随着时间的增长而增加。2.3.2 水提取 2.3.2.1 实验主要步骤将茶叶在研钵内捣碎成细微状，用电子天平称取茶叶末10g，放进300毫升的烧杯中，在烧杯内加入100ml热水以充分浸泡茶叶，水浴加热煮沸，并不断添加热水，以维持烧杯内水量在100ml左右。20分钟后，停止加热，并把茶叶水倾倒进100毫升的烧杯中，然后分四部分倒进蒸发皿中，茶液于蒸发皿中浓缩至约15ml加入4g生石灰粉, 拌匀,置于石棉网上用酒精灯小火加热蒸发皿，让其不断浓缩溶液6。当溶液浓缩成胶状无明显液体时，盖上干净的玻璃表面皿，再小火加热蒸干，当蒸发皿底部已接近蒸干或出现紫色烟时，停止加热。等到表面皿和蒸发皿充分冷却后，在表面皿内表面上会出现针状的咖啡因圆体，小心揭开表面皿, 用小刀刮下咖啡因，将四次得到的咖啡因混在一起，再在电子天平上称其重量，重复以上实验三次，结果如表2.3。2.3.2.2 实验结果与结论 表2.3 提取结果一二三得到咖啡因的平均值81.784.286.484.3由表2.3可见, 用同样的茶叶、同样的量（10g)，由于提取方法和提取装置的不同, 其得到咖啡因的量也就不同。综合上述2种提取方法进行分析：2.2.1的方法虽然得到的咖啡因产量较高，但回流时间长,由于提取的溶剂是乙醇,乙醇易燃、易挥发、不易操作、价格较高、实验中也相对而言比较容易出危险, 且会对环境造成污染；再者索氏提取器价格较高,其虹吸管易破损,只要虹吸管损坏,就会使整套装置报废,造成提取成本增加。方法二用水作溶剂,水是从茶叶中提取咖啡因的良好溶剂, 它既能充分提出咖啡因,又不溶解其他杂质,价格便宜、无毒,不会对环境或者操作者造成危害9。实验所用仪器均为常规仪器, 且成本低,用时少。缺点:提取得到的咖啡因产量不是很高。如果增加溶剂量和提取时间,提取得到的咖啡因量将会增加。因它易溶于热水（1:5.5、80 或1:1.5、100 )。综上所述,水提取提取咖啡因不论从时间、产量、成本的角度,还是从环保、安全的因素考虑,都更具有实用性。2.4 吸附法2.4.1 活性炭预处理在300g颗粒状的活性炭中加入2倍体积85%的乙醇,放置24h之后用水洗涤至无醇味,然后加入2倍体积0.1mol/NaOH溶液过夜,水洗至中性,最后加入2倍体积0.1mol/L HCl溶液过夜,水洗至中性,室温干燥备用10。2.4.2 样品的制备称取100g茶叶粉末,加800mL水,80e下提取2h ,过滤,浓缩,冷冻干燥.用水配置成不同浓度的溶液,量取20mL,加活性炭吸附,抽滤,冷冻干燥.准确称取0. 15g,定容至25mL,分别测茶多酚和咖啡因的含量9。2.4.3 茶多酚和咖啡因的质量分数测定茶多酚和咖啡因的质量分数分别采用国标法中的酒石酸亚铁法和紫外分光光度法测定10,其计算见公式（2.1）： （2.1）式中:L1为试液得总量，mL;L2 为测定时的用液量,ml;L3 为试液的总量,mL;C 为从标准曲线上查得的咖啡因浓度,L g/ml; M为活性炭吸附之后样品的质量,g。2.3.4 咖啡因标准曲线绘制准确称取1.96mg自制咖啡因标准品配置成0.0784 mg/mL溶液,分别吸0,1,2,3,4,5,6mL于25mL容量瓶中,各加入1.0mL0.01mol/L的HCl,加水定容, 用10mm石英比色杯,在274nm测定吸光度A,得咖啡因浓度与吸光度的标准曲线,线性回归方程为,标准曲线见图2.2。 浓度C/(ug.)图2.3 咖啡因标准曲线2.4.5 吸附时间对茶多酚和咖啡因吸附的影响吸附时间越长,茶多酚和咖啡因的吸附量越多,导致产品中茶多酚的含量很低; 但吸附时间过短,则不能达到去除咖啡因的目的,因此,需考察吸附时间对结果的影响。取10份质量浓度为30g/L的样品溶液20mL,分别加入2g活性炭,室温下吸附时间分别为0,0.5,1,2,3,4,5,6,8,10h, 实验结果见图2.4。 图2.4 时间因素图2.4.6 小结茶叶咖啡因具多羟基嘌呤环和共轭双键结构,易被多孔性物质( 如活性炭、 硅藻土、活性粘土及纤维素等)所吸附。吸附法是利用各种吸附剂选择性吸附和洗脱剂的选择性洗脱作用达到目标产物与其它杂质相互分离。活性炭对茶多酚和咖啡因具有一定的吸附作用,且吸附速度不同，故可以提取茶叶中的咖啡因。2.5 超临界CO2提取122.5.1 实验方法 图2.5 超临界萃取工艺流程图1:携带剂阀2:进气阀3:循环阀4:萃取缸阀5,6,9,15:放空阀7.8:压力调节阀l,11:分离器压力调节阀12:一级分离时开放阀13,14:二级分离时开放阀A:CO2气瓶B:净化器C:过滤器D:泵E:流量表F:携带旅G:单向阀H:混合器l:热交换器K:净化器L:萃取缸M:分离器I N:分离器,先打开CO2钢瓶,再打开2号阀,此时先打开CO2钢瓶,再打开2号阀,此时泵I(D,阀门1边上),同时按下泵复位装置，压力表3上升。打开4号阀后表3下降, 表4上升并与表3平衡。当表4达到所需压力时,打开7号阀向分离器I(M)输送加压。同样,当表5达到要求压力时,打开10号阀向分离器I(N)增压,使表6达到6MPa。此时再打开13号阀进行循环,流量计开始显示流量,当表2,达到6MPa以上时关闭2号阀,同时打开3号阀。当萃取结束时,第一步先关制冷系统,再关泵,最后将整机关闭;第二步打开8、N两个阀,以利整个系统的平衡。接着打开2号阀,使多余气体回至钢瓶,平衡后关上钢瓶及2号阀; 第三步关死3、4、7三个阀,打开6号阀放空,同时打开萃取釜下阀;第四步关闭总电源。本试验采用动态萃取法。根据现有的资料设置了几个不同水平的处理(见表2.4),对其结果进行了分析比较,然后选定工作参数进一步进行试验,夹带剂为水13。表2.4 几种不同处理的比较参数 萃取釜 分离器 A B C D 压力（MPa）252525 1686温度（）454580403235夹带剂水流量（/h）25.325.224.824.6时间(h)2.02.02.02.02.5.2 结果与分析携带萃取物的CO2在分离器中进行分离,从分离器l中收集到的是一混合物,先放出的为白色絮状物质,其后为黄绿色物质,而从分离器N中收集到的是单一黄绿色物质。对每一处理的萃取物进行定性反应,结果发现分离器H分离得到的产物中没有咖啡碱和茶多酚,根据颜色以及有关资料推断其为较易被提取的茶叶芳香物质以及叶绿素等脂溶性成分,而在分离器I分离所得白色萃取物中均检测到了咖啡碱和茶多酚,但未发现蛋白质和氨基酸的存在。这一结果与CO2流体的溶解能力是相一致的,而且试验结果还表明咖啡碱、茶多酚比芳香物质、色素等更容易与萃取剂CO2分离。根据定性反应的结果,进一步对茶样以及各萃余物中多酚、咖啡碱含量进行了测定,结果见表2.5。从表2.5可以看出,各萃余物水分、咖啡碱、茶多酚的含量都比茶样中有所减少.这表明超临界CO2流体对于水分、咖啡碱和茶多酚都有一定的萃取能力。不同处理之间的对比又说明以水作夹带剂的效果显著,同时,高温萃取对于水分、咖啡碱和茶多酚的萃取均有利,尤其是对于水分和茶多酚的萃取效果影响特别明显,这与冯耀声12报道的结果基本一致。他认为高温高压可使茶多酚在超临界CO2中的溶解度增大。此外,他还就萃取压力、预浸时间对绿茶咖啡因萃取量的影响进行了研究,认为在一定温度下,单位溶剂CO2的萃取量随压力的增加而增加;预浸时间越长浸润越充分越有利于咖啡因萃取。表2.5 咖啡碱含量测定结果测定成分 茶样 萃余物 A B C D水分（）7.825.245.752.64 4.46咖啡碱（）4.384.213.524.06 4.16茶多酚（）34.5929.9428.6528.16 29.482.5.3 结论1.超临界CO2萃取茶叶中咖啡碱是一条可行途径,操作方便,工艺简单,但如何控制条件提高咖啡碱萃取率、得率以及纯度还应进一步研究。2.利用超临界萃取在一定条件下可以有效地分离咖啡碱和茶多酚,这为茶的综合利用,降低茶多酚中咖啡碱残留,提供了可行途径。3.茶叶前处理对于咖啡碱萃取至关重要。茶叶原料、颗粒度、含水量等都会影响咖啡碱的萃取量。4.萃取咖啡碱需加入一定量的夹带剂,单纯CO2为萃取剂的效果较差。 在今后试验中将进一步研究不同夹带剂以及夹带剂用量与萃取率的关系。结论1 . 由方法2.2、2.3、2.4、2.5可知，用同样的茶叶,由于提取方法不同,其咖啡因的得率不同,而且差别较大,就上述四种提取方法而言,方法2.3.2的得率相对较高。2. 方法2.3.1虽然所用试剂价廉,操作也比较简单,但是提取液的量太大,浓缩过程长,耗时,耗热能,而且得率太低,此方法不可取。3. 方法2.4虽然得率尚可, 但是由于成本高、操作比较繁琐，而且还不容易控制，而且所用试剂不能完全回收,造成提取成本增加,在操作过程中有些易挥发的有毒试剂不可避免地对操作人员的身体健康带来一定的危害.4. 方法2.5采用超临界CO2萃取提取茶叶中咖啡因，超临界提取啡因选CO2作溶剂，其对咖啡因选择性高, 同时具有溶解性大无毒安全、工艺过程简单等优点,但从茶叶中提取咖啡因的工业化应用还不理想, 设备投资大, 生产成本较高, 且茶叶在提取咖啡因时风味损失严重。因此不是很理想的方法。5. 相比较而言,方法2.3.2更具有实用性。该方法与其他方法相比,所用试剂廉价、易得,及操作过程也比较简单,是一种较为可行的方法，茶叶提取率相对来说比较高，因此，提取茶叶中的咖啡因的最佳工艺应选择2.3中的水提取法。参考文献1宛晓春.茶叶生物化学(第二版)M.北京:中国农业出版社,2003:35-36.2丁勇,朱秀平.茶叶产品拓展的技术途径J.茶叶机械杂志,2002,(1):20-22.3励建荣,陆海霞.茶叶产品开发现状与进展J.食品科学,2004,25(2):193 -199.4向胜沅,李觅路,龚志华,等.茶叶保健机理及其产物开发展望J.茶叶通讯, 2001,(4):20-23.5王华夫,陈瑞峰,徐向群.茶叶高活性天然抗氧化剂的制备工艺J.茶学,1995,15(1):49-56.6阎守和. 速溶茶J. 生物化学.北京.北京大学出版社,1996,6(1):49-56.7张可钦,吴萍,陈钦云.由中国茶叶中提取抗氧剂的研究J.食品与发酵工业, 1991,15(1):22.8唐跃明,韩启德,王宪,等.咖啡因引起离体大鼠脊髓降钙素基因相关肽释放J.北京医科大学学报,1996,28(6) 405-408.9刘永民,张荣丽.医用化学实验M.上海:第二军医大学出版社,2006:139.10YEJian-hui,LIANG Yue-rong,JIN Jing , etal. 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