莨菪烷类抗胆碱药物又课件.ppt
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析The Analysis of Anticholinergic Agent,莨菪烷类抗胆碱药物的分析,莨菪烷,含氮的生物碱(氨基),莨菪烷(Tropane),莨菪烷类抗胆碱药物的分析,结构,莨菪烷类抗胆碱药物,莨菪烷衍生的氨基醇,与各种不同有机酸缩合,酯+生物碱,莨菪烷类抗胆碱药物的分析,莨菪醇,含氮的醇(莨菪醇),莨菪醇(Tropine),莨菪烷类抗胆碱药物的分析,典型药物,硫酸莨菪碱,硫酸阿托品,莨菪烷类抗胆碱药物的分析,性质区别,硫酸莨菪碱,硫酸阿托品,熔点、溶解度、旋光度、分子量,莨菪烷类抗胆碱药物的分析,典型药物,氢溴酸山莨菪碱,莨菪烷类抗胆碱药物的分析,典型药物,氢溴酸东莨菪碱,莨菪烷类抗胆碱药物的分析,典型药物,丁溴酸东莨菪碱,二、主要性质,1.水解性（酯水解生成醇和酸）,2.碱性 与生物碱沉淀剂产生有色沉淀阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.35.,二、主要性质,一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应),原理：莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结构的阴离子而显深紫色。,二、鉴别试验,托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类,一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应),取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇23滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。,二、鉴别试验,莨菪酸,硝基化,脱羧化,共轭结构,深紫,二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）,二、鉴别试验,三、沉淀反应,生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀,二、鉴别试验,三、沉淀反应,二、鉴别试验,四、光谱鉴别法,紫外光谱法,一般通过比较药物的 或吸收光谱的一致性以及吸光系数来进行鉴别,二、鉴别试验,四、光谱鉴别法,红外光谱法,ChP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别,二、鉴别试验,五、色谱鉴别法,色谱法,一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等,二、鉴别试验,六、硫酸盐和溴化物的反应,药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在,通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色,二、鉴别试验,Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：,六、硫酸盐和溴化物的反应,三、特殊杂质与检查,一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺,根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制,一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查,酸度,东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.05.5，可控制酸性杂质,三、特殊杂质与检查,一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查,易氧化物,可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色,三、特殊杂质与检查,一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查,易氧化物,可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色,三、特殊杂质与检查,一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查,其它生物碱,本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。,三、特殊杂质与检查,本品水溶液,一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查,检查方法：,其他生物碱,a,b,二、硫酸阿托品,硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光度测定法对莨菪碱杂质进行检查,ChP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度,三、特殊杂质与检查,第四节 含量测定,莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏:,酸性染料比色法,非水溶液滴定法,高效液相色谱法,UV,酸性染料比色法,在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量,第四节 含量测定,酸性染料,如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等,其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定,第四节 含量测定,酸性染料比色法,第四节 含量测定,影响因素,水相最佳pH值：使得BH+和In-最多,第四节 含量测定,影响因素,水相最佳pH值：使得BH+和In-最多,pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定,第四节 含量测定,影响因素,酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量,一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。,第四节 含量测定,影响因素,有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想,一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。,第四节 含量测定,影响因素,水分的影响：,第四节 含量测定,影响因素,酸性染料里面的有色杂质,影响结果，先用萃取溶剂萃取除去,第四节 含量测定,应用示例,第四节 含量测定,本法主要适用于紫外吸收弱、标示量低的有机碱性药物（生物碱）制剂的含量或含量均匀度的测定。,应用示例 硫酸阿托品片的含量测定,应用示例 硫酸阿托品片的含量测定,应用示例 硫酸阿托品片的含量测定,应用示例 硫酸阿托品片的含量测定,二、非水溶液滴定法,第四节 含量测定,二、非水溶液滴定法,第四节 含量测定,二、非水溶液滴定法,第四节 含量测定,三、高效液相色谱法,第四节 含量测定,三、高效液相色谱法,第四节 含量测定,三、高效液相色谱法,第四节 含量测定,应用示例,第四节 含量测定,LC-PDA-MS法用于曼陀罗毒害事件体内样品中阿托品和东莨菪碱的法医鉴定LC-PDA-MS测定条件体内组织样品的制备分析结果,应用示例,第五节 体内莨菪烷类药物分析,
