BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达ppt课件.ppt

BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达:BAFF在T依赖性B细胞病理性自身抗体产生中的作用报告人：张文,Rheumatology 2007;46:1083-1086,B细胞活化因子（BAFF）是B细胞表面BAFF-R的配体;BAFF 受体:BCMA,TACI,BAFF-R促进B细胞成熟、维持B细胞存活和诱导自身免疫反应。BAFF产生过多导致免疫耐受异常，自身反应性B细胞避免被清除，发生SLE等自身免疫病。,研究背景,狼疮易感小鼠表达高水平BAFF；SLE患者血清中BAFF水平升高；BAFF单抗可阻止狼疮易感小鼠自身免疫反应；BAFF抑制剂将可能成为治疗SLE的生物制剂。,临床意义,目的,在SLE患者,BAFF是否参与T 细胞依赖性B细胞自身抗体的产生.,方法,23 例活动性SLE,23 例健康对照;PBMC:流式细胞仪分析细胞外染色:抗CD45RA;抗CD45RO;抗CD20,抗CD14,抗CD27,抗CD38;抗BAFF-R;抗TACI;细胞内染色:BAFF;,外周血 BAFF和BAFF-R mRNA 水平的测定,分离CD4+CD8+T 细胞或CD20+B细胞提取 RNA:进行real time PCR,T细胞分泌BAFF的水平,96 孔培养基培养T细胞收集上清液,用ELISA测定可溶性BAFF的水平.,TACI-Ig 抑制抗dsDNA抗体的产生,培养:T和B 细胞,加入TACI-Ig 或control-IgELISA法测定 dsDNA水平,研究活动性SLE患者 BAFF的升高是否为T细胞产生.(Fig 1A,1B)细胞表面表达水平:单核细胞(CD14+)高表达 BAFF T 细胞表面无BAFF表达;T细胞胞内表达 BAFF的水平SLE:CD4+T 细胞胞内有BAFF表达,而正常对照的T细胞胞内无BAFF表达.同样,SLE:CD8+T 细胞胞内有BAFF表达,而正常对照的T细胞胞内无BAFF表达.狼疮肾病患者CD4+T细胞内 BAFF的MFI显著升高,外周血T细胞表达 BAFF的情况,外周血B细胞 BAFF受体的表达(Fig 1C,1D),正常对照和SLE患者B细胞均表达BAFF-R和TACI;两组之间无差异.,活动SLE患者BAFF或BAFF受体mRNA的表达,T cells,B cells,SLE和正常对照之间无显著性差异,SLE:7.21.1 ng/ml正常对照:1.3 0.7 ng/ml活动性SLE患者T 细胞 较正常对照显著增多.,活动性SLE患者T细胞sBAFF分泌水平,体外实验使用 TACI-Ig可抑制dsDNA抗体的产生,