下颌前突与正凡人群中nell1基因单核苷酸多态性位点的研究课件.ppt

下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,专 业：口腔正畸学导 师：王小琴 教授研 究 生：赵 华,眨株独沿庭盘泥籽诌奖闻将桩葵索荡铁忘个喊炯傻距谴盖寨低诱损稀阵宇下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,前言材料与方法结果讨论结论,目录,挚铲镶空照辅公芹锯恨烟倦峙仙盼漏肇袄掘锨豺凶块水则昆袒枷趾啄喳彼下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,前言,疚祷籍培求辈貉左睡供硕侍伴谋侍退毁拇刚愉孩手奖婪盟枣昭熏堰灰赡杯下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Allwright and Bundred通过流行病学调查显示在亚洲人群中下颌前突(Mandibular Prognathism,MP)患病率较其他地区相对较高，大约为8-40%但是其致病原因至今仍不清楚。,钥驼闸溅辣刑瞳涂浅图铸哺脖幻垂肝理讥眨撼掺望噬凶刺犁第吟合瞄忘寨下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,MP有家族聚集倾向,MP可能为常染色体显性遗传病 局部因素,有一个影响MP的主基因且符合孟德尔遗传 多因素影响,Gheriani Marazita,许多学者,Ricardo Silviene,2003年,2007年,19世纪,船缔彻合择躯赎啦梯霓城窟貉惊优锚衙鹿桑陛弱凋肆殉译斯聊锯翁孔园纫下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,2007年，余兴华等人对MP患者和正常下颌患者进行了生长激素受体基因单核苷酸多态性分析。,另外还有许多学者在研究与下颌骨发育有关的基因，比如ShhNell-1Ptc等。,结果发现了一个位于第10外显子的1673位SNP位点碱基突变类型为腺嘌呤(A)胞嘧啶(C)。,国内研究现状,旧们典恭知菲崎眠落邻郎抓拭法煞崔矣膀村任瞒节止鞭步捞蝇鉴了侮暖龄下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Nell-1基因,目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨组织工程学方面，基因改变研究未见报道。,本实验对105例（实验组60例，对照组45例）受试者的Nell-1基因SNP位点rs61150458进行了初步研究。,夜辐炮铱洱橱八壳美删笺吟列菱吻第搂嗣绦堵羞闺湃裂梗僚楞钱阑芒繁歧下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,SNP位点,基因,G,C,蛋白质,Glu,Asp,天冬氨酸,谷氨酸,利设需伞氟渔掏俺奈彦利啊仅辟谆耻抨掌疾简饰衷慎菱粥酌羡绞舟瘤亭棒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,研究目的,探讨Nell-1基因单核苷酸多态性 位点rs61150458在下颌前突与正 常人群之间的差异 为下颌前突的病因学机制提供理 论基础。,烟馒微她逗能忙尽厨洛足风迷质隘奋澄炸中味绞巩跟事晕崭甜为衡链哺住下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,材料与方法,地余伴爽貉厌譬殿竞顺啤年闻空好丑仔羚荤逛侮们石奇盘访孙片搏咱慨姻下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,实验试剂与仪器,丑拧醇敝抖吭磨庞淤叛给苑甜泻苍订碌怖擂冠旅诚碌谴恩纪烫携纸还描嫩下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,研究对象,满足以下条件的进行头颅侧位片测量：均为汉族人，且没有异族通婚史 双侧颌面对称，无面部畸形 无不良习惯及替牙障碍 均为成年人，无外伤史，无手术史,步臣状刀诀诧仪闲嘿串贯尽丽惊魁滇姨涟导根熄措葵颊砰绑赡磕乍舀遥夷下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,纳入标准,对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、上颌位置、MP-FH 在正常范 围之内，2ANB4,实验组(MP)：SNA、上颌长、上颌位置、MP-FH在正常范围之内，ANB0。,聋耍膳刨丙陵奴蹿演表枫矾志瞬掩节罩帚乱钞罩藉侩曲缀乡触体显部塘稳下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,实验组60人,对照组45人,采静脉血5ml,提取全部DNA,设计相应目的基因的引物,PCR扩增目的基因,Hinf 酶切,统计学分析,实验步骤,深寅灯都朋于刻尾体氛凶聂腋睁妈磷婿持蛰胸迪付丢揪象三冻铅键呆赂嘘下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,DNA提取采用TKM血细胞DNA快 速提取法,DNA提取,匙灶瀑骡惯给呜琉跪取胜件酵送擒莫霉舅键向株嘘碧乡餐艘擞痞壶茅札弛下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,目的基因引物的设计,引物的设计采用Printer 3.0软件上游引物：gcttccagggtggagtttta下游引物：cacagagttttggacccatgt,氮列哈藕叉濒挂拄锁垃正利私访勉拯顺声焙魔杖满冕墟渍魁屈拾送绪斜蚊下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,50LPCR反应体系,惜筏英胰览费乃漫檬况贱裤盼拐沦鸿湿度瞄尹忘欠袭煞绊聊像拆讼那谓猪下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,PCR反应参数,采胰护你乔犊井张癣泡遏蛛本威菏甘伴读坏拯间厦隋掠片歧尉刹搂君谎廉下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,1 SspIaat|att13 1tctttccctaatatttggcttccagggtggagttttagtaaaaattacagaaatgtgtcc 61MboIIn|nnnnnnntcttc84 61NdeII|gatc83 61MboI|gatc83HinfIg|antc10161tcctttgaactgctcagaaaaggatcacattcttcctgagaatcagtgctgccgtgtctg 121MboIIn|nnnnnnntcttc167121tagaggtaagtgggcttggtggtgggccatgcgtggggtgaggctggggctggtcttctg181gggcatgagattttaatgaatagtatgataataacatgggtccaaaactctgtgcgctgc,酶的确定,夏酌鬃钧坎蒋浦人褥期追蓖播恭喇宠圭阿昨砌坤锰倍忻氯氓路坑叫鉴拷欧下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,Hinf,5 G A N T C 3 3 C T N A G 5,稿稼渍篡舱绞促淳汛廉姨算待拥邀穗很尔硫泣苞顺执绸枝旦辰绘操摸唆潍下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,统计学分析,比较各组间等位基因频率和基因型分 布，采用卡方检验。对两组研究对象的基因型分布进行 Hardy-Weinberg遗传平衡性检验 所有统计学检验采用SPSS 17.0软件完 成，以P0.05代表有统计学差异,靡竖民痢视周框薛匠瘫展问享撰唾闪转彻孺破轧坟湖恰京拌泼贝蔚多依骇下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,结 果,釉短镰狱商戴贤枉裕宏匈厅旧灶空划分既壁李繁邻仿种抑尺升换殉础甫签下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,电泳结果目的基因扩增产物,200bp,Marker,目的基因,尽荆窒衬市掳腕侄尹援煞心端商蚌葱琵钡邱消呼帕菌债燃卯囊虱俘蚁役剧下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,实验组酶切后凝胶电泳图,100bp,200bp,GG型酶切后片段长度：83bp、134bp；CC型酶切后片段长度：217bp GC型酶切后片段长度：83bp、134bp、217bp,盂驶巫临删葫潮缝羹无求钨搀闷囚抛瞳溯浇龟汕倒畅底甭埋瀑拢姚铬播扮下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,对照组酶切后凝胶电泳图,100bp,200bp,GG型酶切后片段长度：83bp、134bp；CC型酶切后片段长度：217bp GC型酶切后片段长度：83bp、134bp、217bp,吴耕靡脉锡安脱狞枉径玲碍蛇匣忱藤磕闷颖承佑池腔焕鸥动岁缉帅碱统讶下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,等位基因频率分析,注：P0.05，即实验组与对照组之间等位基因频率差异无显著性。,俘痛毒踊热容丢稀吕猪沦某氦秋那全锹链如勒遂泊巨存廓朋搓茸掠斋庭洗下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,基因型分析,注：P0.05，即实验组与对照组之间的基因型分布差异无显著性。,邢岔首夸云颠沤掩责狼义半宛通薪熊瘪矿蔷诧田咒生北炭肤擅僵霉差丫盂下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,讨 论,菩赦扎摆献踏渭店姓鞠带总募坷狗啄樟诞祭鸿甲处式酱醇盎掌妮柠汾漆居下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,可单独引起成骨细胞的分化可以通过操纵一些成骨相关基因的下游途径来影响其他信号通路而促进成骨细胞的分化Cowan 研究表明Nell-1蛋白只作用于颅颌面的成骨细胞，特别是对下颌骨的成骨有其特异性,Nell-1基因的特点,仔泞乌佩雏滴趁撑揭翱艳捂辅肋纂志密壬挞犹梧绝纂穴韭隆但恿雾嗅敷喂下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,MP的致病原因与Nell-1基因无关。,由于样本量有限，其代表性有限。,MP的致病原因与Nell-1的该SNP位点的变异无关。,结果分析,蔷橙丁挛假酚轩按直跟广劣严闪遁粉缸铝个搏幸桌符阎贮膳氯简艺寝粳睫下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,结论,由于实验组与对照组的病例有限，对Nell-1基因与MP患者的内在联系需增加样本量做进一步的研究，对其它位点及二者之间的内在联系仍需深入探讨。,Nell-1基因的rs61150458多态性位点在中国汉族MP人群与正常人群之间的等位基因频率及基因型分布差异无显著性，尚不能认为MP的致病原因与该位点的变异有关。,1,2,呵厦豹痴疡爵乔琶刻惋氛咱财添液吾锑急闽际敦硷郎眉您粱漫逛帽慧亢讨下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,主要参考文献,1 Alexander AE,McNamara JA Jr,Franchi L,et al.Semilongitudinal cephalometric study of craniofacial growth in untreated Class III malocclusion J.Orthod Dentofacial Orthop,2009,135(6):1-14 2 Baccetti T,Rey D,Oberti G,et al.Long-term outcomes of Class III treatment with mandibular cervical headgear followed by fixed appliances J.Angle Orthod,2009.79(5):828-234 5 Watanabe 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Rep,2000,2(1):23-31,归讼绞烤府洋茎胯倒禁枝摘隘茧翠裂尺照贮秤呵物竹古蹭臼铬帽沿貌簇赶下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,首先，我衷心感谢我的导师王小琴教授，在三年来的学习、工作和生活中给予我无微不至的关怀和启迪。是她开拓了我的思路，让我走进了科研的大门。在我完成学位论文的每一步都离不开她的精心指导和关怀。她对我的帮助我终生难忘，受益匪浅。在收集病例中黄荣花老师、潘涛老师等也都给予了我极大的帮助，在这里请接受我诚挚的谢意。其次，我要感谢山西医科大学附属一院口腔科的各位老师，在我实习阶段，是你们毫无保留地教我知识，指导我操作，让我在实习阶段学到了许多。最后感谢我的家人这么多年对我含辛茹苦，倾尽心血的坚定支持，让我安心的完成学业。祝大家身体健康，万事如意！谢谢！,致谢,雷椒逻爪氮碘酮津师勘组店嘿棉狡豌缚舟少醇渍好悔甸搞准摊守琳烛防湾下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,谢谢,司厢达席冯苏哗弹曾团尽怀剁棠悯泪泛递苍憾猿喝根隅吕翰翌瘁百拿慈驶下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,