中药制剂分析第六章课件.ppt
含动物药、矿物药的中药制剂分析,1 含动物药的中药制剂分析,概述牛黄及其制剂分析天然牛黄人工牛黄：由胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成。人工培育牛黄,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析牛黄的化学成分胆色素：胆红素、胆绿素等胆汁酸类：胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸等脂类：胆固醇蛋白质、肽、氨基酸类无机元素,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析胆汁酸的性质和化学反应多以肽（甘氨胆酸、牛磺胆酸）的形式存在溶解性,成盐易溶于水游离可溶于乙酸、丙酮、碱液，易 溶于乙醇、乙醚,胆酸,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析胆汁酸的性质和化学反应颜色反应Pettenkofer反应（冰水冷却）-紫色Hammarsten反应:20铬酸,胆酸紫色鹅去氧胆酸不显色,温热,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析胆红素的物理性质 溶解性：溶于苯、氯仿、氯苯、二硫化碳、碱液，微溶于乙醇、乙醚，成盐后易溶于水化学反应不稳定性，易被氧化Gmelin反应（浓硝酸氧化反应）Van den Bergh反应（重氮化反应）蓝紫色(强酸性)红色(pH2-5)绿色(pH5.5),胆红素,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析定性鉴别理化鉴别氯仿试验：硫酸/过氧化氢绿色醋酸试验：糠醛/硫酸蓝紫色水合氯醛试验：色素溶解，呈金黄色,速效感冒(伤风)胶囊中人工牛黄鉴别取本品10 粒，加50ml 氯仿溶解后，加0.5%活性炭（约0.20.4g）充分振摇后，再加硫酸与过氧化氢溶液（30%）各2滴，振摇，即显绿色。,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析定性鉴别薄层鉴别,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析含量测定胆酸的测定酸碱滴定法总胆酸比色法去氧胆酸薄层扫描法HPLC 使用ELSD检测器或进行柱前衍生,1 含动物药的中药制剂分析,牛黄及其制剂分析含量测定胆红素的测定分光光度法（重氮化反应）HPLC,1 含动物药的中药制剂分析,麝香及其制剂分析化学成分及性质大环化合物甾族化合物胆固醇、酯、蜡蛋白质、肽、氨基酸无机盐其他成分,1 含动物药的中药制剂分析,麝香及其制剂分析定性鉴别GC紫外光谱法乙醇提取液220nm,270nm乙醚提取液231nm,265nm正己烷提取液220nm,265nm薄层色谱法,麝香保心丸中麝香的气相色谱鉴别取本品2g，研碎，加乙醚5ml，振摇，超声处理5分钟，离心，取上清夜，作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加乙醚制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照气相色谱法(附录VI E)试验，以聚乙二醇(PRG)-20M和甲基硅橡胶为混合固定相，涂布浓度分别为1.64%和1.32%，柱长为2m，柱温为180。分别取对照品溶液与供试品溶液适量，注入气相色谱仪。供试品色谱中应呈现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。,梅花点舌丸中麝香的薄层鉴别取本品3g，研细，加乙醚10ml，密塞，振摇10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。薄层条件：硅胶G，石油醚-二氯甲烷(2:3)，二硝基苯肼试液,麝香酮,1 含动物药的中药制剂分析,麝香及其制剂分析含量测定GC固定液苯基（50%）甲基硅酮薄层色谱法HPLC,熊胆及其制剂分析 熊胆为熊科动物黑熊Selenarctos thibetanus Cuvier或棕熊Ursus arctos Linnaeus的干燥胆，熊胆是我国传统的名贵中药材。,1 含动物药的中药制剂分析,熊胆及其制剂分析熊胆的化学成分及性质 熊胆中的主要化学成分为胆汁酸类（约占胆汁中的5859%）成分，其中主要含牛磺熊去氧胆酸（TUDCA），胆汁酸通常与牛磺酸、甘氨酸结合，以钠盐或钙盐的形式存在。熊胆中含有的胆色素以胆红素为主，尚有胆黄素、胆褐素。还含有多种氨基酸、胆固醇、脂肪、磷脂及无机无素。,1 含动物药的中药制剂分析,定性鉴别1光谱鉴别 取胆仁少许，制成甲醇液，测定紫外吸收光谱，在2732nm波长处有最大吸收（猪胆在2701nm、4152nm波长处有吸收，牛胆在2651nm、4131nm波长处有吸收，羊胆在4053nm波长处有吸收）。2薄层层析法 常用的薄层色谱条件如下薄层板：110活化的硅胶G板，展开剂：异辛烷-醋酸乙酯-醋酸(5:5:1)。显色剂：喷30%硫酸乙醇溶液，于105加热10min,检测结果：可检出游离及结合的胆酸（黄色）、猪去氧胆酸（绿褐色）、熊去氧胆酸（绿褐色）、鹅去氧胆酸（绿褐色）、去氧胆酸（黄棕色）及石胆酸（紫色）。,1 含动物药的中药制剂分析,含量测定 薄层色谱-比色法：取胆酸类样品的乙醇溶液，经色谱分离后，刮取胆酸、去氧胆酸及甘氨胆酸相应斑点，提取后在分光光度计上测定。薄层扫描法：样品供试液经薄层色谱分离后，以熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸为对照品，采用薄层扫描仪扫描测定。高效液相色谱法：样品经适当处理后，以牛磺去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸为对照品，采用高效液相色谱法进行测定。气相谱法：胆酸样品制成乙酰基衍生物的甲酯，以胆甾醇己酸酯为内标物，可测定石胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸及胆酸的含量。,1 含动物药的中药制剂分析,蛇胆及其制剂分析 蛇胆汁为眼镜蛇科、游蛇科或蝰蛇科动物多种蛇的胆汁。味苦、寒，归肺、肝、胃经，具有行气化痰，祛风除湿，清肝明目，平肝息风，清热解毒等功效。常用于肝热目赤，肺热咳嗽，胃热疼痛，急性风湿性关节炎，痔疮，皮肤热毒等症。（一）化学成分及性质 主要化学成分为胆汁酸类，且多数以牛磺酸结合的结合型胆甾酸形式存在；同时蛇胆中还有无机元素。,1 含动物药的中药制剂分析,定性鉴别多以薄层色谱为主。薄层板多用硅胶G薄层板，展开系统常用的有：异戊醇-冰醋酸-水（18：10：6）甲苯-冰醋酸-水（10：10：1）异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水（10：5：5：3：1）等。对照品：胆酸、去氧胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸等。显色条件：30%硫酸乙醇（V/V）,喷后在105烘烤10min，置紫外灯（254nm）下观察。,1 含动物药的中药制剂分析,蛇胆及其制剂分析含量测定 蛇胆中主要成分为胆汁酸类，所以对胆汁酸类成分分析的方法很多，如比色法、薄层扫描法、高效液相色谱法，气相色谱法等。,1 含动物药的中药制剂分析,1 含动物药的中药制剂分析,蟾酥及其制剂分析化学成分蟾蜍甾二烯游离型-蟾毒配基结合型蟾蜍毒素等强心甾烯蟾毒类吲哚碱类,蟾毒配基,1 含动物药的中药制剂分析,蟾酥及其制剂分析定性鉴别显色反应+对二甲氨基苯甲醛/硫酸蓝紫色+醋酐/硫酸蓝紫色-蓝绿色氯仿提取液+硫酸界面鲜黄色，氯仿层淡红色+酒石酸液/二甲氨基苯甲醛蓝色氯仿提取液+白糖/硫酸界面红色,1 含动物药的中药制剂分析,蟾酥及其制剂分析定性鉴别薄层色谱法其他方法：纸色谱、紫外光谱、红外光谱等,1 含动物药的中药制剂分析,蟾酥及其制剂分析含量测定分光光度法差示光度法薄层扫描法HPLCGC,梅花点舌丸中三个蟾毒内酯的含量测定-HPLC主要色谱条件：C18柱，乙腈-水（1:1），检测波长297nm，流速1ml/min对照品：脂蟾毒配基、脂蟾毒配基、蟾毒灵供试品溶液：氯仿超声提取，中性氧化铝小柱纯化,2 含矿物药中药制剂的分析,矿物药的分析 矿物药的分类 神农本草经将矿物药分为上、中、下三品；明朝李时珍本草纲目将矿物药分别记述在火部、水部、土部、金石部、石部等。其中大部分矿物药列入金石部，金石部又分为“金、玉、石、卤”四类。后经历代的发展，从医药观点出发，目前，主要按其所含主要化学元素和化合物分类。,2 含矿物药中药制剂的分析,1、溶解法（湿法）将试样溶解在水、酸或其他溶剂中的分解方法。通常采用水、稀酸、浓酸、混合酸的顺序进行处理。2、熔融法（干法）将试样与固体熔剂混合，然后在高温下加热至全熔或半熔，使欲测组分转变为可溶于水或酸的化合物。碱性熔剂，如碳酸钠、氢氧化钠。熔剂：酸性熔剂，如硫酸氢钾、焦硫酸钾。氧化性熔剂，如过氧化钠、碳酸钠加硝酸钾。还原性熔剂，碳酸钠加硫等。,分析方法,2 含矿物药中药制剂的分析,矿物药的分析分析方法容量分析法、重量分析法热分析法可见分光光度法原子吸收光谱法（AAS）,2 含矿物药中药制剂的分析,矿物药的分析含量测定方法1、化学分析法（1）滴定分析法：常用氧化还原滴定和配位滴定，（2）重量法：常用沉淀重量法，如汞的定量分析。2、热分析法3、可见分光光度法：一些无机金属元素可与某些化合物形成有色配合物，可用分光光度法测定。如砷盐的检查。4、原子吸收光谱法：该法能测定几乎全部金属元素和一些碱金属元素，广泛应用于中药原料其制剂中各种微量元素的分析。,2 含矿物药中药制剂的分析,2 含矿物药中药制剂的分析,含砷矿物药及其制剂分析含砷矿物药：雄黄、雌黄、砒石、砒霜分解硝酸、硫酸等酸性溶剂分解过氧化钠、碳酸钠熔融分解硫酸过氧化氢、硫酸硝酸钾分解时，应防止砷化合物挥发而损失。,雄黄,雌黄,2 含矿物药中药制剂的分析,含砷矿物药及其制剂分析定性鉴别 硫的鉴别As2S2+2KClO3+3HNO3 2KAsO3+2H2SO4+Cl2+NO2H2SO4+BaCl2 BaSO4(白色沉淀)+2HCl砷的鉴别2As2S2+7O2 2As2O3+4SO2 As2S3+9O2 As2O3+6SO2As2O3+3H2O H3AsO3H3AsO3+H2S As2S3(黄色絮状沉淀)+H2O,2 含矿物药中药制剂的分析,含砷矿物药及其制剂分析含量测定碘量法直接碘量法硫酸分解直接碘量法H3AsO3+I2 蓝色碱熔分解直接碘量法间接碘量法硫酸过氧化氢分解间接碘量法分光光度法（Ag-DDC法）,pH=8淀粉,2 含矿物药中药制剂的分析,含砷矿物药及其制剂分析含量测定,牛黄解毒片中雄黄含量测定取本品20片，研细，称取2片量(含雄黄约0.1g)，精密称定，置锥形瓶中，加硫酸钾1g、硫酸铵2g与样品混匀。加硫酸15ml，直火加热至溶液呈淡黄色，冷却，缓缓加水50ml，加热微沸35分钟，放冷，加酚酞指示液2 滴，用40氢氧化钠溶液中和至显微红色，放冷，用0.25mol/L硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氢钠5g，摇匀后，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml,滴定至溶液显紫蓝色。,国外开具的“问题中药黑名单”美国：禁止出售的中成药有：附子理中丸、安宫牛黄丸、安神补脑丸、抗癌灵、解 毒消炎丸、白内障滴眼剂、北京紫雪、安宫降压丸、牛黄清心丸、定心丸、内障 明眼丸、中国救心丹、中国尿通、追风透骨丸、朱砂粉、朱砂安神丸、复方五味 子片、复方附子丸、复方丹参片、复方抗痿灵、大活络丸、糖尿灵、佩夫人止咳 露、毛冬青胶囊、六神丸、利肝片、毛冬青、降糖灵、近视眼药水、连翘败毒片、风痛宁片、五塔标行军散、冠心苏合、海藻丸、健脑片、风湿片、猴枣散、黄连 素片、回春丹、降压平片、降压片、健脑补肾丸、惊风散、正红花油、桂附大八 味丸、光明眼药水、龟龄集救心、保喉片、镇疡片、益寿宁、人参再造丸、雪莲 风湿灵、舒筋活络丸、百日咳药片、屈臣氏花塔饼、紫雪丹、宏兴鹧鸪菜、再造 丸、龟蛇熊胆清毒丸、导赤片、回春丹、甘露清热片、精制黄连素片、精制活肝 1号、心脉宁、精制降糖灵、双宝素、双料喉风散、石淋通、山楂精降脂片、疠 气万灵丹、泻痢丹、消络胶囊、人参再造丸、前列腺丸、保婴丹、偏头痛丸、百 源堂猴枣散、牛黄解毒丸、牛黄消炎片、鼻敏感片、脉通、关木通、马兜铃酸、八珍散、当归四逆汤、导赤散、复方地龙汤、甘露消毒丹、口咽宁、龙胆泄肝汤、排石汤、小蓟引子、心怡散、养阴消炎汤。含有毒成分的30多种中成药，包括安神补脑片、牛黄清心丸、特效复方元萎 灵、大活络丹、复方丹参片、润肠丸、龟龄集、救心丹、喉炎丸、六神丸、牛黄 解毒片、牛黄消炎丸、精制黄连素片、小活络丹等。禁止含有汞、铅、朱砂成分 的中药进口，禁用黄连(1990年开始)。禁用碎杏仁制成的B17Laetrile，禁售含 有某种动物或矿物的中成药，包括兰州牛黄清心丸(含龙脑)、大活络丹(含蜈蚣)、兰州牛黄清心丸(含朱砂)、润肠丸(含麻仁)。加拿大：禁止含汞、砷、砒霜、铅等重金属含量超过规定的中成药。日本：禁用朱砂、雄黄。韩国：禁用大黄。印度尼西亚：禁用当归、川乌、丹参、灵脂、红花制成的胶囊。英国：川乌、草乌、附子、马钱子。蜂房、蝉衣、金钱白花蛇、全蝎、蜈蚣。马来西亚：禁用附子、川乌、草乌、黄连、火麻仁等有毒品种。禁马钱子、延胡索、蟾 酥、雄黄、麻黄、石榴皮、黎芦、龙葵。德国：禁止含马兜铃酸的专利药、马兜铃科的草药、提取物。比利时：禁用87种饮片，包括柴胡、石斛、龟板、穿山甲等。荷兰：天王补心丹、牛黄清心丸。,
