弧菌显色培养基.docx

弧菌显色培养基 品种名称：弧菌显色培养基 英文名称：Chromogenic Vibrio Agar 品种编号：CRM008 培养基用途：用于水产品及食物中毒样品中弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和鉴定。 弧菌显色培养基使用原理： 蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。 图册: 弧菌显色培养基配方(每升)： 蛋白胨19.8g 酵母膏粉5g 蔗糖20g 氯化钠10g 抑菌剂1.5g 琼脂13g 混合色素3g 最终pH 9.0±0.2 弧菌显色培养基使用方法 1、取瓶内干粉培养基72.3克，用100ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约50，倾注灭菌平皿。 2、以无菌操作取检样25 g(mL)，加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225 mL，用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min，或拍击式均质器拍击2 min，或用Pulsifier脉冲式样品处理器均质30秒，制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后放在500 mL的灭菌容器内，加225 mL3%氯化钠碱性蛋白胨水，并充分振荡。 3、增菌：将1:10稀释液于36 ±1 培养818h。 4、分离：在增菌液中用接种环取一环，于弧菌显色平板上划线分离，于36 ±1 培养1824 h。 5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。 弧菌显色培养基质量控制： 本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1培养18-24小时生长情况如下表： 质控菌株 生长情况 菌落色泽 副溶血性弧菌ATCC17802 良好 品红色 霍乱弧菌VBO非01 良好 绿-蓝绿色 溶藻弧菌ATCC33787 良好 无色 大肠埃希氏菌ATCC25922 不长 - 注：最后的鉴定须做补充试验。 外观： 脱水培养基：浅黄色具流动性粉未。 制备好平板：淡黄色的胶。 储存条件和保质期： 脱水培养基：10-30，保质期二年。 制备好平板：2-8，最多保存两周。