GelRed核酸电泳用染料.docx

GelRed核酸电泳用染料GelRed核酸染料 GelRed核酸染料特点 无毒性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结 果也表明，该染料的诱变性远远小于EB。 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。 稳定性高： 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。 操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。 适用范围广：可选择电泳前染色或电泳后染色；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA 或 ssDNA 或 RNA 染色。 无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。 GelRed使用方法简介 1胶染法 制胶时加入GelRed核酸染料。每50mL胶中加入5L GelRed 核酸染料。 按照常规方法进行电泳即可。 u 注：此方法染色染料用量相对较少。500 L染料大约可以做100块 50mL的胶。当染料稀释在 TBE 或者类似的电泳缓冲溶液中时可以使用微波炉加热，从而与通常制备预制凝胶的方法相同。含有染料的预制凝胶可以成批制备，并可以长期保存直到使用。 2泡染法 按照常规方法进行电泳。 用0.1M的NaCl水溶液按照33001的比例稀释GelRed浓缩液，混匀，制成3× GelRed染色溶液。 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色30分钟左右，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理。 u 注：用泡染法染色时，染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用3次左右。 几种核酸染料比较 名称 GelRed GelGreen I SYBR Green I SYBR Green II Gold View I EB 特别提醒：如果您使用的是紫外成像仪，请选择GelRed；如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测，请选择GelGreen。 灵敏度 高 高 极高 极高 低 低 稳定性 高 高 稍差 稍差 高 高 适用性 通用大小片段电泳染色 通用大小片段电泳染色 100bp以上片段电泳染色 单链核酸分子电泳染色 500bp以上片段电泳染色 100bp以上片段电泳染色 安全性 美国安全认定无毒 美国安全认定无毒 花菁染料，低毒 花菁染料，低毒 认定不清 强致癌，强诱变 价格 中 中 高 高 低 低