临床常用免疫学检查1.ppt
临床常用免疫学检查,郁向静 15946037548,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,教学目的与要求:,了解掌握临床免疫学检查的主要内容、检测原理以及临床实际应用的重要意义,重点与难点,各种抗体的特点补体定义及CH50测定淋巴细胞亚群测定的临床意义肿瘤标志物及其特异性,AFP与CEA的特点,各种类型的特异性自身抗体与自身免疫的关系及各类型自身抗体检测的方法及临床意义CRP测定以及临床意义,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,一、免疫球蛋白(Ig),定义:是由浆细胞合成分泌的一组具有抗体活性的球蛋白,存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。检测:感染性疾病、免疫增值性疾病和免疫缺陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。,血清免疫球蛋白分类,根据重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不同,分为五类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE,血清免疫球蛋白分类,检测方法,酶联免疫法(ELISA)放射免疫(RIA)荧光标记免疫(IFA)化学发光法(CLIA)免疫透射比浊、免疫散射比浊,免疫球蛋白G检测,IgG人体内含量最多,占Ig的70-80再次免疫应答的主要抗体对细菌、病毒和寄生虫都有抗体活性唯一可通过胎盘的Ig,参考值,7.016.6 g/L,临床意义-IgG 增高,多克隆性增高 见于各种慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染以及自身免疫性疾病单克隆性增高 仅见一种Ig增高,主要见于免疫增殖性疾病,如IgG分泌型多发性骨髓瘤,临床意义-IgG 降低,见于各种先天性和获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、也见于重链病、轻链病、肾病综合症、病毒感染和服用免疫抑制剂的患者。,免疫球蛋白A检测,两型:血清型IgA,分泌型IgA(SIgA)。,血清型IgA以单体形式存在,分泌型IgA(S IgA)由J链连接的二聚体和分泌片组成。,参考值,血清IgA 0.73.5 g/L,IgA占10-15。SIgA 唾液0.3 g/L,泪液3080 g/L,初乳5.06 g/L,粪便1.3 g/L,临床意义,IgA增高 见于IgA型MM,SLE,类风湿性关节炎,肝硬化,湿疹和肾脏疾病等IgA降低 见于反复呼吸道感染,非IgA型MM,重链病,轻链病,原发和继发性免疫缺陷病和自身免疫性疾病,免疫球蛋白M检测,IgM是五聚体,分子量最大的Ig不能通过血管壁,不能通过胎盘个体发育过程中最早合成的抗体,脐带血IgM增高提示胎儿宫内感染体液免疫应答中IgM是最早产生的抗体,参考值,参考值 0.5 2.6 g/L,临床意义,IgM增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关节炎、SLE等,原发性巨球蛋白血症时,IgM呈单克隆性明显增高IgM降低 见于IgG型重链病,IgA型MM,先天性免疫缺陷病,使用免疫抑制剂,淋巴系统肿瘤和肾病综合症。,免疫球蛋白E的检测,IgE是血清中最少的一种Ig,占血清总Ig的0.002%。是一种亲细胞抗体,介导型变态反应,与变态反应、寄生虫感染和皮肤过敏等有关。,参考值,ELISA法为0.1 0.9m g/L,临床意义,IgE增高 见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、类风湿性关节炎,以及各种过敏性疾病和寄生虫感染等。IgE降低 见于先天性和获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期应用免疫抑制剂和共济失调性毛细血管扩展症等。,血清M蛋白,M蛋白(M protein)或称单克隆免疫球蛋白,是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。,【参考值】蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法:正常人为阴性。,图14号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱,【临床意义】检测到M蛋白,提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于:多发性骨髓瘤:以IgG型最常见,其次为IgA型,IgD和IgE罕见,也有IgM型的报道。,巨球蛋白血症(macroglobulinemia):该病血液中存在大量单克隆IgM。重链病:出现Ig重链轻链病:出现单克隆游离轻链。半分子病:系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片段。恶性淋巴瘤:血液中可出现M蛋白。良性M蛋白血症:,二、补体(Complement),补体是一组具有酶样活性的糖蛋白,加上其调节因子和相关膜蛋白共同组成一个补体系统参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理性反应,补体的三条激活途径,(一)总补体溶血活性检测(CH50),原理:抗体致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)可激活血清中的补体C1,从而引起补体经典途径的连锁反应,导致绵羊红细胞膜上形成多分子的聚合物,绵羊红细胞溶解。溶血程度与样品中补体量呈正相关,以50%溶血作为检测终点(CH50)。主要反应补体经典途径的综合水平。,+,+,C,一、溶细胞作用:,靶细胞,抗 体,抗原抗体 复合物,C1-C9,靶细胞溶 解,C4,细胞膜,识 别 阶 段,C3转化酶的形成,C4b,Mg+,C4a,C2,活化阶段,C5转化酶的形成,C4b,Mg+,C4a,C2a,C3,C4b2b3b 是C5 转化酶;它导致膜攻击复合体(MAC)的形成,活化阶段,C5,C6,膜攻击阶段,MAC形成并插入到细胞内,C9,C9,C9,C9,C9,C9,C9,C9,C9,CH50,在50%溶血附近,“S”形曲线最陡,接近一条直线。在此范围内补体活性稍有变动,溶血程度就有明显变化,即是以50%溶血作为反应的终点比以100%溶血作为终点更为敏感,因而该试验被称为补体50%溶血试验(complement hemolysis 50%),即CH50试验。,CH50测定的临床意义,增高:见于急性炎症,组织损伤和某些恶性肿瘤。减低:免疫复合物性疾病(如肾小球肾炎)、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等,(二)补体C3检测,是一种由肝脏合成的2-球蛋白。C3在补体系统各成分中含量最多,是经典途径和旁路途径的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。【参考值】成人血清C3:O815gL。,【临床意义】(1)增高:常见于一些急性时相反应,如急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应、急性组织损伤。(2)减低:见于系统性红斑狼疮和类风湿关节炎活动期、大多数肾小球肾炎(如链球菌感染后肾小球炎、狼疮性肾炎、基底膜增殖性肾小球肾炎)、慢性活动性肝炎、慢性肝病、肝硬化、肝坏死、先天性补体缺乏(如遗传性C3缺乏症)等。它们或是由于消耗或丢失过多或是由于合成能力降低造成。,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,淋巴细胞,T、B、NK细胞基于特异的表面标志和功能,进一步分为若干亚群,一、T细胞分化抗原检测,T细胞膜表面有多种特异性抗原,WHO称其为白细胞分化抗原(cluster differentiation,CD)CD3+代表总T细胞、CD3+/CD4+T辅助细胞、CD3+/CD8+T抑制细胞。应用这些细胞的单克隆抗体与T细胞表面抗原结合后,再与荧光标记二抗(兔或羊抗鼠IgG)反应,在流式细胞仪中计数CD阳性细胞的百分率。,参考值,流式:CD3+61-85CD3+CD4+(Th)28-58CD3+CD8+(Ts)19-48Th/Ts 0.9-2.0,临床意义,CD3+减低 自身免疫性疾病,如SLE,类风湿性关节炎。,SLE,全身性红斑狼疮其名可回溯于十九世纪,发现患者面部赤红的病症像狼咬过的伤痕,而拉丁文中狼为LUPUS狼疮,以后有位皮肤科医师观察到患者鼻梁和两颊有明显的红斑,其英文为ERYTHEMATOSUS红斑,,SLE,之后,发现这种疾病不仅影响皮肤,亦影响全身各个器官,再加上SYSTEMIC全身性从此正名为SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS,全身性红斑狼疮,简称为SLE。,SLE,一种累及多系统、多器官的,具有多种自身抗体的自身免疫性疾病。死亡主要原因:肾脏损害,狼疮脑病,感染网络小说 第一次亲密接触痞子蔡 轻舞飞扬,临床意义,CD3+CD4+减低 恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷、艾滋病、免疫抑制剂使用CD3+CD8+减低 自身免疫性疾病、变态反应性疾病Th/Ts 比值增高:自免、病毒感染、变态反应减低:艾滋病(小于0.5),恶性肿瘤进行期和复发时,二、B细胞分化抗原检测,B细胞受抗原刺激后可分化成产生抗体的浆细胞,是体内唯一能产生抗体的细胞。应用CD19、CD20和CD22等单克隆抗体分别与B细胞表面抗原结合,采用流式技术进行检测,分别求出CD19、CD20和CD22等细胞阳性的百分率和B淋巴细胞数。,临床意义,流式 CD19+:11.743.37%升高:急、慢性性淋巴细胞白血病和Burkitt淋巴瘤降低:无丙种球蛋白血症、使用化疗或免疫抑制剂,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,肿瘤标志物,肿瘤标志物(tumor marker、TM):在肿瘤发生和发展过程中,由肿瘤细胞所产生或机体在肿瘤细胞刺激下产生的,与肿瘤存在相关的物质,存在于血液、细胞、组织液或体液中。,2008年我国卫生事业发展统计公报 卫生部统计信息中心,肿瘤的发展与诊断,10-100 g,榛子大小,针头大小,免疫学方法,早期,亚临床阶段,晚期,1 mg,1 g,1kg,1 g,高灵敏度的肿瘤标志物的测定对肿瘤的早期诊断和治疗方案设计是十分重要的手段,世界卫生组织(WHO)指出:若能早期诊断并及时治疗,90%95%的肿瘤是可以治愈的。,一般肿瘤细胞在癌前病变时,会产生表达肿瘤异常蛋白质,多数肿瘤从癌前病变发展到0.5 cm 以上的占位性病变需要 5 y10 y的时间。如果能够在这段时间内运用肿瘤标志物检测技术,早期检测到患者血液中肿瘤所表达的异常蛋白质,就可以早期发现、早期诊断,并获得早期治疗的良好效果。,临床可检测的肿瘤,肿瘤标记物(无形的肿瘤),恶性肿瘤增长的检测,Tumor mass,1g,10,1mg,106,1g,109,10-100g,1010-11,1kg,1012,肿瘤标记物(无形的肿瘤),临床可检测的肿瘤,肿瘤增长,Tumor cells,Lead time,世界卫生组织(WHO)指出:若能早期诊断并及时治疗,90%95%的肿瘤是可以治愈的。,肿瘤标志物免疫分析,现实的肿瘤标志物灵敏度有限;特异性有限;存在正常异常交错;存在不稳定性与临床表现存在差异,理想的肿瘤标志物肿瘤患者血液中含量明显增高;与肿瘤组织的定位有关;肿瘤标志物的含量与肿瘤的大小分期有关;肿瘤标志物的含量与肿瘤的生长、消退或转移、复发有关;假阴性率与假阳性率低。,TM分类,蛋白质类,如AFP、CEA和PSA等。糖脂类,如CA19-9和CA-50等酶类,如PAP、NSE和AFU等。激素,如HCG、雌激素受体等其它 肿瘤标志物,如核酸、多胺等。,肿瘤标志物检测方法,电化学发光免疫分析系统,临床常用肿瘤标志物,1.蛋白质类肿瘤标志物检测,甲胎蛋白(-fetoprotein,AFP),在胎儿发育早期,由肝脏和卵黄囊合成,出生后一年内降至正常水平。肝细胞或生殖腺胚胎组织恶变后又重新具有分泌AFP的能力。对诊断肝细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要的临床价值。,参考值,血清 25g/L,临床意义,原发性肝癌患者血清中AFP的含量明显升 高,常300g/L。病毒性肝炎与肝硬化患者血清中AFP可增高,但常300g/L。生殖腺胚胎肿瘤、胃癌或胰腺癌时患者血清中AFP可升高。妊娠时AFP可升高,峰值低于400g/L,若异常升高应考虑胎儿神经管畸形。,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen、CEA),早期胎儿的胃肠道及某些组织均有合成CEA的能力胎儿出生后血清 CEA的含量极低,参考值,血清 5g/L,临床意义,升高主要见于胰腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌等消化系统肿瘤及乳腺癌和肺癌。血清CEA连续随访检测,可用于恶性肿瘤治疗后的疗效观察及预后判断。病情好转时,CEA浓度下降,病情加重时可升高。结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、肺气肿及支气管哮喘等也常见CEA轻度升高。抽烟,前列腺特异性抗原(PSA),前列腺分泌的单链糖蛋白存在于前列腺管道的上皮细胞,前列腺癌时血清水平明显升高总PSA(t-PSA)中,80结合形式(c-PSA),20游离(f-PSA)参考值:t-PSA0.25,临床意义,前列腺癌时60-90患者血清t-PSA明显升高前列腺炎、增生,轻度升高,t-PSA 4.0-10.0g/L t-PSA 4.0-10.0g/L,f-PSA/t-PSA 的比值对诊断更有价值,f-PSA/t-PSA0.1时提示前列腺癌,2.糖脂肿瘤标志物检测,CA125,糖蛋白性肿瘤相关抗原,存在于上皮性卵巢癌组织及患者血清中,CA125在卵巢诊断中的应用,CA125存在于卵巢癌组织细胞和浆液性腺癌组织中,不存在于黏液型卵巢癌中。盆腔肿瘤的鉴别。宫颈癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、胆道癌、肝癌、肺癌等也有一定的阳性反应。3%-6%的良性卵巢瘤、子宫肌瘤患者血清CA125有时也会明显升高,但多数不超过10万U/L肝硬化失代偿期血清CA125明显升高。生理状态下,如早孕期CA125也可升高。,二、CA199,是一种糖蛋白,属于唾液酸化Lewis血型抗原正常人唾液腺、前列腺、乳腺、胰腺、胃、胆管、胆囊、支气管的上皮细胞存在微量CA199,CA199的临床意义,胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病时血中 CA199的水平可明显升高。CA199时胰腺癌的首选肿瘤标志物约有5%-10%的人不表达Lewis类抗原,因此部分胰腺癌患者CA199不升高在部分胆囊癌、胆管癌、胃癌、结肠癌和直肠癌患者的CA199升高,但无早期诊断价值,CA199的临床意义,连续监测对病情进展、手术疗效、预后估计及复发诊断有重要价值。急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆石症、急性肝炎、肝硬化等、CA199出现不同程度的升高。若结合CEA检测,对胃癌诊断符合率可达85%。,CA153,是抗原决定簇、糖和多肽组成的糖蛋白。,临床意义,乳腺癌时,30%-50%的患者可见CA153明显升高,但在早期乳腺癌时,它的阳性率仅为20%-30%左右,因此它不能用于筛查和早期诊断,主要用于乳腺癌患者的治疗检测和预后判断。乳腺癌患者血清CA153浓度比原来水平升高预示病情进展、肿瘤复发、转移、其浓度升高比临床症状出现或影像学检查的发现时间早。,其它重要的肿瘤标志物,名称 生化特性 相关肿瘤CA15-3 糖蛋白 乳腺癌、肺癌、肾癌、卵巢癌、结肠癌CA125 糖蛋白 卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌CA72-4 糖蛋白 胃癌、结肠癌、胰腺癌、非小细胞性肺癌SCC 糖蛋白 子宫颈癌、肺鳞癌、头颈部鳞癌TPA 蛋白质 膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌,肿瘤标志物的合理选用,同一种肿瘤可含多种标志物,而一种标志物可出现在多种肿瘤。选择特异标志物或最佳组合有利于提高肿瘤诊断的阳性率。动态检测有利于良性和恶性肿瘤的鉴别,也有利于复发、转移和预后判断。胃癌:CEA+CA199乳腺癌:CA153+CEA卵巢癌:CA125+CA724,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,自身免疫病检测,正常情况下,机体免疫系统对自身抗原物质不产生免疫应答或只产生极微弱的免疫应答自身免疫性疾病是指机体免疫功能紊乱时,针对自身组织抗原产生自身抗体或致敏淋巴细胞,并导致组织损伤而引起的疾病.如SLE、RA、MCTD等。自身免疫性疾病主要免疫学特征为血清或其它体液中出现高滴度的自身抗体和致敏淋巴细胞,因此通过对自身抗体的检测辅助自身免疫性疾病的诊断.,一、类风湿因子(rheumatoid factor,RF),RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体,是一种以变性IgG的作为靶抗原的自身抗体。RF主要为IgM型抗体,但也有 IgG,IgA IgD、IgE型抗体。存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。,检测方法与参考值,乳胶凝集法酶连免疫吸附实验(ELISA)浊度分析法,临床意义,类风湿性疾病时,RF的阳性率可达70%90%,类风湿关节炎的阳性率为70%。IgG型与患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状有关,IgM型与IgA型的效价与病情有关,与骨质破坏有关。其他自身免疫性疾病,如多发性肌炎、硬皮病、干燥综合征、SLE、自身免疫性溶血、慢性活动性肝炎等也见RF阳性。某些感染性疾病,如传染性单核细胞增多症、结核病、感染性心内膜炎等也多呈阳性反应。故本实验的特异性不高,二、抗核抗体检测(antinuclear antibody,ANA),抗核抗体检测可提取性核抗原抗体谱测定抗DNA抗体测定,(一)抗核抗体测定(antinuclear antibody,ANA),经典ANA:是指针对真核细胞核成分的自身抗体的总称。广义ANA:整个细胞成分,包括细胞核和细胞质。无器官与种族的特异性。主要是IgG.检测方法:间接免疫荧光法(IIF),核均质型,核均质型:核浆均质性着色。与抗dsDNA、抗组蛋白和核小体抗体有关。多见于活动期SLE、药物性狼疮等。,核仁型,核仁型:核仁为荧光加强的均质荧光,主要与抗Scl-70抗体和抗PM-Scl抗体等相关,在硬皮病中较多见。,核膜型,细胞核边缘呈线型强着染。主要有抗核孔复合物和抗板层素两种抗体。在肝炎和血细胞减少中常见。,(二)可提取的核抗原(Extractable nuclear antigen,ENA)抗体谱测定,ENA又称盐水可溶性抗原或磷酸盐可浸出抗原,是指在盐水中或磷酸盐可溶解的核抗原。ENA多肽抗体谱是针对核内ENA的一类自身抗体,约有10余种,主要为抗核糖核蛋白(RNP)抗体和抗Sm抗体,其它还有抗SS-A抗体、抗SS-B抗体、抗Scl-70抗体、抗JO-1抗体等。不同的自身免疫病可产生不同的抗ENA抗体。通过检测抗ENA抗体的类型及其组合,可综合诊断自身免疫病的类型。,检测方法,免疫印迹技术(最常用),免疫印迹技术(最常用),先将ENA混合抗原作凝胶电泳,分离开不同的区带,然后把这些区带转印到硝酸纤维膜上,加入待检血清,最后用酶标抗体使相应的抗原带显色,在硝酸纤维膜上呈现特异性显色条带。参照各种已知阳性血清在膜上留下的显色区带的位置特征及显色区带对应的蛋白多肽抗原的分子特征,即可检测和识别多种自身抗体。,动物胸腺提取ENA SDS-PAGE 电转移至硝酸纤微膜 加标本 加酶标抗体 判断结果,(三)抗DNA抗体测定,抗DNA抗体分为:(1)抗双链 DNA(double stranded DNA,dsDNA)抗体;(2)抗单链DNA(single stranded DNA,ssDNA)抗体;(3)抗ZDNA抗体,检测方法与参考值,检测抗dsDNA抗体最特异和最敏感的方法是用马疫锥虫或绿蝇短膜虫作为抗原基质进行间接免疫荧光测定。,临床意义,抗dsDNA抗体阳性 见于活动期SLE,阳性率7090。本试验特异性较高,但敏感性较低。抗ssDNA抗体阳性 见于SLE(阳性率7095),尤其是合并有狼疮性肾炎。还可见于一些重叠结缔组织病、药物诱导的狼疮和慢性活动性肝炎等,但不具特异性。,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,一.细菌感染免疫检测,(一)抗链球菌溶血素“O”试验,溶血素“O”是A群溶血性链球菌产生的具有溶血活性的代谢产物,相应抗体称抗链球菌溶血素“O”(Antistreptolysin“O”、ASO)。,参考值,乳胶凝集法(LAT)阴性,临床意义,阳性表示病人近期内有A群溶血性链球菌感染,常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、风湿性心脏病、急性肾小球肾炎、急性上呼吸道感染、皮肤和软组织的感染等。,(二)伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定,伤寒沙门菌感染后,菌体“o”抗原和鞭毛“H”抗原可刺激人体产生相应抗体;副伤寒杆菌分甲、乙和丙三型各自的菌体抗原和鞭毛抗原也可产生相应的抗体。,肥 达 反 应 概念:是利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原,检测 患者血清中有无相应抗体的一种凝集试验。参考值:直接凝集法:伤寒Hl:160;O1:80;副伤寒甲、乙和丙1:80。,临床意义单份血清抗体效价O1:80及H1:160者有诊断意义;若动态观察,持续超过参考值或较原效价升高4倍以上更有价值。O、H均升高:提示伤寒可能性大,多数患者在病程第2周出现阳性。O不高、H升高,可能是预防接种或是非特异性回忆反应。O升高、H不高,则可能是感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。,二.病毒感染免疫检测,(一)TORCH试验,为妇产科产前的常规检查项目TORCH包括:弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒型和型的病原抗体检测,TORCH检测的意义,由于成人TORCH感染的临床症状不明显,无法自我感觉到是否受到感染,因此孕前及孕早期诊断对优生优育十分重要。目前,国际上公认的最方便、最先进的早期诊断方法是检测人体血清中的特异性IgM、IgG抗体,以判断受到感染的情况。世界上许多发达国家已经将TORCH列为孕期常规检查项目,在优生优育方面发挥着重要作用。在国内,随着科学技术的发展和人民生活水平的提高,人们对优生优育的认识逐步提高,TORCH检测越来越受到重视。,造成孕妇流产、死胎,出生后有严重的智力障碍,生活不能自理,给患儿的家庭带来极大的精神和经济负担。,临床意义,TORCH感染后,患者特异性抗体IgM、IgG可迅速升高,IgM出现早,可持续6-12周,而IgG出现晚,但可维持终生。因此,我们常把IgG阳性看作是既往感染,而IgM阳性则做为初次感染的诊断指标。1、IgG阳性IgM阴性 曾经感染过这种病毒,或接种过疫苗,并且已产生免疫力,胎宝宝感染的可能性很小。2、IgG阴性IgM阴性 表明孕妇为易感人群。妊娠期最好重复IgG检查,观察是否阳转。3、IgG阳性IgM阳性 表明孕妇可能为原发性感染或再感染。可借IgG亲和试验加以鉴别。4、IgG阴性IgM阳性 近期感染过,或为急性感染;也可能是其它干扰因素造成的IgM假阳性。需2周后复查,如IgG阳转,为急性感染,否则判断为假阳性。,(二)轮状病毒抗体和RNA测定,【参考值】RNA阴性(PCR法);抗原阴性(胶乳凝集试验或ELISA法)IgM和IgG阴性(金标免疫斑点法或ELISA法)。【I临床意义】婴幼儿腹泻约有50是由轮状病毒所致,常呈IgM阳性,提示现症感染;IgG阳性提示既往感染;PCR检测轮状病毒RNA具特异性。,正规医疗机构是性病患者的正确选择,三、性传播疾病免疫检测,(一)性传播性疾病的定义,性传播性疾病(sexually transmitted disease,STD):是指通过各种性接触而传播的疾病,简称性病(venereal disease)。,(二)梅毒螺旋体抗体测定,梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种危害性严重的性传播疾病,早期主要侵犯皮肤与黏膜,晚期可侵犯全身各组织器官,特别易侵犯心脏与神经系统。机体感染梅毒螺旋体后,可产生梅毒螺旋体的特异性抗体与非特异性抗体(反应素)。,参考值初筛试验非特异性抗体的定性试验,快速血浆反应素试验RPR阴性不加热血清反应素试验USR阴性性病研究实验室试验VDRL阴性,参考值确诊试验特异性抗体的测定,梅毒螺旋体血凝试验TPHA阴性荧光螺旋体抗体吸附试验FTAABS阴性,临床意义,梅毒螺旋体反应素试验敏感性高;定性试验阳性的情况下,必须进行确诊试验,若阳性可确诊梅毒。,(三)人类免疫缺陷病毒抗体检及RNA测定,人类免疫缺陷病毒(HIV)是艾滋病(AIDS)的病原体可分为HIV-1和HIV-2型HIV为单链RNA病毒,中国爱滋病村里的病人,爱滋病家庭遗孤,患者常表现CD4+淋巴细胞减少、细胞免疫功能严重缺损、继发感染等。血清中常可产生抗HIV的抗体。,金标法检测HIV,AIDS于1981年6月美国首先报道 19851988年 传入期 86年4例血友病 19891993年 慢速扩散期 89年云南146例吸毒者 1994至今 倍速增长期 有偿供血 94年:502 95年:1515 96年:1933,参考值,筛选试验可选择:ELISA法阴性快速蛋白印迹法阴性确认试验可选择:蛋白印迹试验(western blot,WB)阴性RT-PCR检测HIV-RNA阴性,临床意义,筛选试验灵敏度高,特异性不高,故有假阳性;所以筛选试验阳性时应用确诊试验证实。筛选试验阳性,特别是RT-PCR法检测HIV-RNA阳性,可以对艾滋病进行确定诊断和早期诊断。,中国也在行动,人人关爱爱滋病人,临床常用免疫学检查包括,第一节 体液免疫检测第二节 细胞免疫检测第三节 肿瘤标志物检测第四节 自身抗体检测第五节 感染免疫检测第六节 其他免疫检测,C反应蛋白检测,C-reactive protein(CRP)是一种急性时相反应蛋白由肝脏合成,能与肺炎双球菌细胞壁C多糖起反应能结合多种细菌、真菌及原虫等体内的多糖物质,在Ca2+存在下,结合卵磷脂和核酸等具有激活补体,促进吞噬和免疫调理的作用。,参考值,速率散射比浊法:2.87mg/L,临床意义,急性时相反应极灵敏的指标。CRP升高:见于化脓性感染、组织坏死(心肌梗死、严重创伤、大手术、烧伤等)、恶性肿瘤、结缔组织病、器官移植急性排斥等。鉴别细菌性或非细菌性感染:前者CRP升高,后者不升高。鉴别风湿热活动期和稳定期:前者升高,后者不升高。鉴别器质性和功能性疾病:前者升高,后者 不升高。但是,孕妇含量较高。,总 结,各种抗体的特点补体定义及CH50测定淋巴细胞亚群测定肿瘤标志物及其特异性,AFP与CEA的特点,各种类型的特异性自身抗体与自身免疫的关系及各类型自身抗体检测的方法及临床意义AS0,肥达试验,TORCH检查的临床意义CRP测定的临床意义。,练习题,A.PSA B.CA125 C.AFP D.CA153 E.CA1991、肝细胞癌的首选肿瘤标志物为2、卵巢癌的首选肿瘤标志物为3、乳腺癌的首选肿瘤标志物为4、胰腺癌的首选肿瘤标志物为5、前列腺癌的首选肿瘤标志物为,Thanks for your attention!,Any questions?,