安捷伦1100+1200液相色谱仪日常和维护和故障诊断.ppt

Agilent Technologies HPLC 日常维护&故障诊断,安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部,2,Agilent 1100/1200系列HPLC 工作原理日常维护 故障诊断技术支持服务流程,安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部,1100/1200 HPLC 日常维护&故障诊断,3,1.在线脱气机(G1322A/G1379A)2.四元二元/单元泵(G1311A/G1312A/G1310A)3.手动自动进样器(G1313A)4.二极管阵列检测器(G1315B)5.可变波长紫外检测（G1314A),1100/1200 HPLC 日常维护&故障诊断,4,1100/1200 HPLC 日常维护&故障诊断,5,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,6,工作原理,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,7,何时需要使用Agilent 1100/1200在线脱气机,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,8,标准脱气机（G1322A).标准脱气机每个通道体积为12ml，建议排液操作：5ml/min 排液6min以上。微脱气机（G1379A).微脱每个通道体积为1ml，建议排液操作：2ml/min 排液5min。切勿用5ml/min 流速去排液。,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,9,使用Agilent 1100/1200 在线脱气机须知,溶剂棕色玻璃瓶会避免藻类的生长。经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。避免使用下述可腐蚀钢铁的 溶剂：碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)。高浓度无机酸，如硝酸、硫酸.可能含有过氧化物的色谱醇醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。这些在 使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,10,防止堵塞溶剂过滤器污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影 响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH4 至 7)中尤其如此。下 列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液 建议不超过两天。如果应用许可，在溶剂中加人0.00010.001M的叠氮化钠。避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。用氩气或氦气置换流动相上层的空气。,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,11,检查溶剂过滤器拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。查看过滤器是否变色临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常清洁溶剂过滤器将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸（35）的烧杯里浸一小时。用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。将过滤器重新装好。建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统可能会严重堵塞系统,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,12,Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,13,Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？打开Purge阀，设定泵的流速2ml/min，提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。,Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断,14,Agilent 1100/1200 四元泵(G1311A),15,Agilent 1100/1200 四元泵工作原理,16,Authoring Division Name File NameSecurity Notice(if required),Damper,Purge valve,Seal,Piston,Ball Screw Drive,Motor with Encoder,Gear,Outlet Ball Valve,Active Inlet Valve,Agilent 1100/1200 单元泵工作原理,17,Agilent 1100/1200 二元泵工作原理,18,Damper,Purge valve,Mixer,A,B,Inlet valve,Outlet valve,Agilent 1100/1200 二元泵工作原理,19,Agilent 1100/1200 泵头(Pump Head)结构图,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,20,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,Agilent 1100/1200 泵头(Pump Head)结构图,21,Agilent 1100/1200 泵头(Pump Head)结构图,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,22,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,Agilent 1100/1200 泵头(Pump Head)结构图,23,Agilent 1100/1200系列密封垫冲洗Seal Wash(可选),当流动相中盐浓度0.01M时，可以减小密封垫的磨损。对于Agilent 1100系列泵为可选件。用10%异丙醇水溶液冲洗,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,24,入口主动阀,出口单向阀,冲洗阀,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,25,如何更换溶剂出口过滤芯,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,26,严重污染的溶剂出口过滤芯,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,27,如何更换活塞杆密封圈,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,28,Agilent 1100/1200 系列泵使用须知,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,29,多通道梯度阀（MCGV）操作要点 当盐溶液和有机溶剂混合时，盐溶液可能与有机溶剂完全混溶，而不会出现 沉淀。但是在梯度阀的混合点，但是在梯度阀的混合点，重力作用使盐颗粒 沉淀下来。通常，阀的A通道用于水相/盐溶液，而泵的B通道用于有机溶 剂。如果使用的是这样的配置，盐将落回到盐溶液中，并被溶解。当泵使用 的不同配置（例如，D-盐溶液，A-有机溶剂）时，盐可能会落到有机溶剂 中，从而出现问题。Agilent 1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到下面的 口上，有机溶剂接到上面的梯度阀口上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通 道的上面。建议定期用水冲洗所有MCGV通道，以去除在阀口上可能出现的盐 沉淀。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,30,更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接 在底部得梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上。有机通道最好 在盐溶液通道得上面。建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在 阀口析出得盐结晶。操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30ml，对微脱气机10ml）冲洗 真空脱气机,特别是当 泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂 时。防止溶剂过滤器堵塞及长菌，当虑器表面有黑色或黄色污染层说明虑器发生了堵塞，请立即清洗或更换之。定期检查排液阀的虑芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar,则须立即更换。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,31,更好地使用泵当使用低流速时（不高于0.2ml/min）检查所有1/16英寸接头有无渗漏（用压力测试或漏液测试）。每当更换泵密封垫时 排液阀虑芯也应更换。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并 降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统。当需要长时间使 用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损。更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于 正相密封垫。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,32,当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10异丙醇，并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。10异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。当泵头安装有冲洗附件而不使用，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,33,密封垫磨合操作：1.以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀(四元泵需一接头，部件号01001847）。2.连接阻尼管（部件号50222159）于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中。3.打开排液阀，并用异丙醇以2ml/min的流速冲洗系统10分钟。4.关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟。5.关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇。注意，只有反相密封垫（50636589）才需此操作，而正相密封垫（09051420）因其最高只耐受200bar,所以此操作会损害它。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,34,1.更换排液阀虑芯2.清洗,更换主动阀阀芯3.清洗球形单向阀3更换密封垫，活塞杆,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,总结,35,Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？2.何时应该更换Purge阀内的过滤白头？3.泵压力不正常可能由那些原因引起？,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,36,Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？设定泵使用一个单独通路（A），打开Purge阀，流速5ml/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。2.何时应该更换Purge阀内的过滤白头？使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速5ml/min，观察系统压力，如果超过10bar，应该更换。3.泵压力不正常可能由那些原因引起？气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用比例阀混合时盐浓度太高,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,故障诊断,37,Agilent 1100/1200 自动进样器(G1313A),38,Agilent 1100/1200 自动进样器工作原理,39,Agilent 1100/1200 自动进样器工作原理,40,Agilent 1100/1200 自动进样器结构,41,Agilent 1100/1200 自动进样器结构,42,Agilent 1100/1200 自动进样器结构,43,Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,44,Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,使用自动洗针功能自动洗针功能可以把程序设置为“带有洗针的进样”,或将自动洗针功能包 含在进样器程序中。当使用自动洗针功能时，进样针在取样后会转移到洗针 步骤。造成携留效应的主要原因是残留在进样针外的少量样品。通过进样后 的洗针功能可以立即洗去针外表面上残留的样品。当进样阀转回到主流路 时，定量管和针内所有的样品都被冲洗到色谱柱中。这种结合洗针和冲洗管 路的设计可以把携留效应减低到最小的程度。去掉洗涤瓶盖为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶是不加盖的，而且洗涤瓶中的 溶剂对样品组分有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有少量样品留在密 封垫上，这样会把残留的样品带到下一个样品中。带有洗针的进样程序进样程序中包括了NEEDLE WASH（洗针）命令，当这一命令设置在进样程序 中时，则在进样前会进入指定的洗涤瓶中洗针。,例 1 DRAW 5L（抽取5L样品）2 NEEDLE WASH vial 7（洗针到7号瓶）3 INJECT（进样）,45,洗针对样品残留的影响（清洗瓶盖帽/不盖帽）,Carry-over(%),Injection volume(L),Injection volume(L),Carry-over(%),Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,46,Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,47,Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,提高进样量的精度进样体积小于2L当进样阀切换到BYPASS（旁路）位置时，在定量管内的流动相压力降低。当 进样针抽取样品时，流动相进一步降低压力。如果流动相没有充分脱气，在 进样时定量管内就会产生小气泡。在进样体积小于2L时这些小气泡就会 影响到进样体积的精密度。为了使进样体积小于2L时有最佳的进样精密 度，建议使用Agilent1100系列真空脱气机，确保流动相充分脱气。也可以 在进样间隙自动洗针，从而进一步提高进样体 积的精密度。,48,Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,提高进样量精度抽样速度对粘稠的样品，计量部件从样品瓶抽取样品的速度会影响取样体积的精密 度。如取样速度太快，在样品塞中会带有气泡，从而影响进样体积。抽样速 度的默认值是200L/min(范围：10-1000L/min)，这一速度适合于大 多数样品的取样要求。但是对于粘稠的样品要得到最佳的结果，设定的抽样 速度要低于200L/min。进样器程序中的“DRAW”命令行也用于抽样速度 的设定，这是为自动进样器设置的。推样速度默认的推样速度为200L/min(范围：10-1000L/min)，当进行大体积 进样时，就要设定为较大的推样速度，加快进样周期。这就是缩短计量器具 从进样周期开始（当注射器活塞回到起始位置时）到推出溶剂所需的时间。进样器程序中的“EJECT”命令行也用于推样速度的设定，这是为自动进样器设置的。较快的推样速度可以加快进样器程序所需的时间。对于粘稠的样 品要避免使用过快的推样速度。当使用多次抽样功能时，推样速度控制着样品进入针座毛细管扩大体积部分 的速度，对粘稠的样品要避免使用过快的推样速度。,49,Agilent 1100/1200 自动进样器使用须知,转子密封垫的选择VespelTM密封垫(可在pH 1-10的条件下工作)标准的密封垫是由Vespel密封材料制成的。Vespel适用于pH范围为2.3 9.5的流动。Vespel适合于大多数的应用领域，但是当pH低于2.3或高 于9.5时，Vespel密封垫会很快地损坏，缩短其使用寿命。TefzelTM密封垫(可在pH 1-14的条件下工作)在流动相的pH低于2.3或高于9.5时，或者在会很快降低Vespel密封垫的 使用寿命的情况下，可以使用由Tefzel制成的密封垫。Tefzel是较Vespel更耐极端pH范围的材料，但是 Tefzel较为柔软。通常Tefzel密封垫的理论使用寿命小于Vespel密封垫。但对于pH很低或很高的流动相，Tefzel密封垫的使用寿命会更长一些。PEEKTM密封垫(可在pH 1-14的条件下工作),50,Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护，故障诊断,定期检查各传动杆是否足够润滑，必要时先用酒精棉球擦拭干净后再给这些杆涂抹少量液体润滑油，脏的传动杆使阻力增大从而造成自动进样器在取样过程中由于马达过热导致出错。检查取样爪子的绿色胶套时否损坏，如果是请更换之，否则会使样品放置位置不正确而导致如针，针座等损坏。用酒精棉签擦拭针座防止灰尘污染堵塞针与针座。若场地确实灰尘较多，建议购买自动进样器门，棕色门还可以帮助防止见光敏感的样品。,51,5.更换转子密封圈6.更换针及针座,Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护，故障诊断,52,Agilent 1100/1200 自动进样器常见故障,漏液 针座磨损 转子磨损 进样量不准 转子磨损 计量泵故障 抽样速度太快机械臂移动故障-抓不准样品瓶 传感器故障 周围环境差 样品瓶不标准,Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护，故障诊断,53,Question?样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损,Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护，故障诊断,54,Answer1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位置。,Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护，故障诊断,55,Answer2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？将第四号管（排液的细塑料管）提起，情 况下应没有液体滴出，如有则转子垫圈磨 损。色谱现象：压力不稳，保留时间面积重性 差，残留严重。,Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护，故障诊断,56,Agilent 1100/1200 手动进样器（G1328A,G1328B),57,Agilent 1100/1200 手动进样器工作原理,58,1.为了防止虹吸应注意使第五第六号放空管的出口与进样口保持在同一平面.,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,59,2.为了更好的重现性，进样体积最好是样品环的56倍。3.手动进样器预装Vespel转子垫圈，请参考自动进样章节选择转子垫 圈。4.一定要使用合规格的进样器，规格为外径0.028英寸，长2英寸的平 头针。一定不能使用尖针！它会严重刮坏转子垫圈。,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,x,60,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,5.进完样后一定要及时冲洗进样器，特别是用盐或缓冲液作流动相 由于这些溶液会形成结晶从而磨损垫圈。冲洗方法：A.将进样器转至Inject位置，利用液相泵输送高纯水冲洗(这 时是冲洗样品环及沟槽）.B.用阀清洗接头和注射器冲洗。,61,当用注射器及接头清洗时，应注意不要太靠近进样器并戴防护眼镜,防止溶剂溅入眼睛。6.经常用湿润的软布清洁进样器，特别是进样口周围。7.请仔细阅读进样器说明书，上面有详细使用及其它信息。,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,62,8.更换转子密封圈。,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,63,Question？如何判断手动进样器的密封圈漏？,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,64,Answer如何判断手动进样器的密封圈漏？通常结合两方面：从进样器观察，进样后将针拔出，若从进样口或排空管有液体冒出，显示密封圈磨损。从结果看：通常有压力不稳定，峰面积或保留时间不稳定和残留严重。,Agilent 1100/1200 手动进样器日常维护，故障诊断,65,Agilent 1100/1200 柱温箱器日常维护,故障诊断,66,1.连接的管路尽量短，防止热扩散及峰增宽。2.如果使用小体积分析柱以及流速小于0.2ml/min时建议使用左边 的柱温箱(左边体积较少,3ul).3.除非特殊应用，建议将两边温度设置一样。并确保关好前盖。4.如果是冷凝水导致漏液，建议终止漏液传感器检测功能,Agilent 1100/1200 柱温箱器日常维护,故障诊断,67,Question?1.如果加热块堵塞怎么办？2.如果是冷凝水导致漏液怎么办？,Agilent 1100/1200 柱温箱器日常维护,故障诊断,68,Answer1.如果加热块堵塞怎么办？用管线连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。2.如果是冷凝水导致漏液怎么办？终止漏液传感器检测功能,Agilent 1100/1200 柱温箱器日常维护,故障诊断,69,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理,Agilent 1100/1200 可变波长紫外检测器(G1314A),70,Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),71,反射镜1,反射镜2,氘灯,光源透镜,滤光片（钬玻璃/遮光）,入射狭缝,光栅,分光器,参比光电二极管数模转换板,样品光电二极管数模转换板,流通池,Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理,Agilent 1100/1200 可变波长紫外检测器(G1314A),72,可变的光进口狭缝系统这一微型狭缝系统是利用硅的机械性能和总体布局微型加工技术以及精确的 制作功能加工而成，它把所需的光学性能狭缝和光栅集中组合到一起，成为一个简单、紧凑的元件。狭缝宽度直接由仪器上的微处理器来控制，并 可用为设定分析方法的一个实验参数。光栅用一个凹面全息光栅来实现分光和光谱成像，光栅把入射光束全部分散成组 成它的波长，然后把它反射到二极管阵列上。二极管阵列二极管阵列由1024个光电二极管和一个位于陶瓷基座上的电路组成，在 190-950nm范围内取样间隔1nm。,Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),73,灯紫外区域采用有通光狭缝的氘灯作光源，低压氘气体的等离子体能发出 190nm到大约800 nm的光。可见光（VIS）和近红外光采用低噪音钨灯得 到，其发射出的光谱范围为470-950nm。消色差透镜（光源透镜）消色差透镜接受氘灯及钨灯发出的光，将其聚焦后通过流通池。氧化钬滤光片当进行波长校准时，氧化钬滤光片用电力驱动进入光路。流通池底座窗口流通池底座窗口部件把氧化钬滤光片和流通池分开。流通池室光学单元有一个流通池室，使流通池易于放入光学单元，采用相同的快捷安 装系统可以把各种流通池装入光学单元，在检查检测器的光电性能时，拿走 流通池能消除流通池带来的影响。,Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),74,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),75,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),76,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),77,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,选择流通池,78,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,流通池光路长度对信号值的影响 流通池加长得到的信号值就高，尽管在流通池加长时噪音略有增加，而 信噪比有较大的增加。例如，见图8，把流通池长度由6mm 增加到10mm，噪音增加10%，而信号增加70%。流通池加长会使池体积也有所增加在我们的例子中为5L13L，这时 峰宽也会增加，如图8所示，在此例的梯度洗脱中对分离度没有影响。经验表明，池体积应为半峰高处峰体积的1/3。要测定峰体积，把积分后的半 峰宽乘以流速再除以3。,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),79,使用较宽的带宽有降低噪声的优点，能在整个波长范围内降低噪声和使用 4nm带宽相比采用30nm带宽，基线噪声降低约2.5倍。而信号值是4-nm 带宽的75%，在此例中信噪比增大2倍。,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),80,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),81,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),82,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,83,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,峰宽（响应时间）响应时间是说明在流通池中光吸收产生突变后出现检测器信号的快慢，检测器采用数值滤波器使响应时间与色谱图中峰宽相适应，这一滤波器不影响峰 面积和峰的对称性，正确设定此滤波器会大大减小基线噪声（见图9），但 会使峰高略有下降。另外这一滤波器能降低数据的速度，优化色谱的积分和 显示，能最大限度地减少存储色谱和光谱的磁盘空间。,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),84,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器性能优化,表6 列出检测器对滤波器的选择。为获得最佳效果，把峰宽设定为接近于色 谱图中窄峰的宽度，此时响应时间约为峰宽的1/3，这样会使峰高降低 5%，峰的加宽不到5%。在检测器中峰宽设定减小会引起峰高增加5%，但是基线噪声增大1.4倍，响应时间增大2倍。把峰宽（响应时间）增大到 推荐值的2倍（过度滤波），则峰高会降低20%，基线噪声降低1.4倍。这 样可能会得到最佳的信噪比，但也可能会影响分离度。,Agilent 1100/1200 DAD紫外检测器(G1315B),85,Agilent 1100/1200 VWD紫外检测器性能优化,86,泄漏在检测器中出现泄漏检漏系统利用两个温度传感器（泄漏传感器和安装在板上的温度补偿传感 器）进行泄漏运算，以此发出的信号来判断是否存在泄漏。当出现泄漏时，泄漏传感器会被溶剂冷却。因而改变传感器的电阻，其信号被主板上的泄漏 传感器电路获得。(DAM)可能的原因 接头松动。毛细管破裂。流通池泄漏。建议采取的措施 保证所有接头紧固。更换破裂的毛细管。更换流通池元件。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,87,UV灯不能点亮 在点亮UV灯的一段时间里处理机连续地监测UV-灯的电流，如果在25s 内UV灯的电流低于电流下限，就出现故障提示。可能的原因 UV灯电源没有接上。UV灯坏了。主板有故障。电源有毛病。建议采取的措施 确保UV灯电源连接牢固。更换UV灯。更换 DAD 主板。更换电源。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,88,重新校准波长 检测器使用氘灯发射出的（656.1nm）和(486nm)射线进行波长校准，用 尖锐的射线校准波长，所得到的精度优于用氧化钬校准波长的结果。在进行 波长校准时，1nm的狭缝自动进入光路，把增益设定为零，为消除溶剂对吸 收的影响，在流通池中注入水进行实验。校准后，用氧化钬测试在三个附加波长进行精度确认。在流通池维护，灯更换或其他大修后，如主板或光学元件的更换之后，必须进行波 长校准。波长校准,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,89,氧化钬测试内置氧化钬滤光片可以在另外的三个波长处进行精度确认，这一测试可以自 动评估测试结果，并提供一张氧化钬滤光片的吸收光谱图。光强测试这项测试对光源灯（可见及UV灯）在全部波长范围内的光强进行测试，测 试可以自动评估测试结果，并提供一张光强谱图。流通池测试这项测试是比较有流通池和没有流通池时灯的光强，用光强的比值可以衡量 流通池吸收的大小（如流通池被污染后对光的吸收）。暗电流的测试这项测试用于各个光电二极管的漏电情况，自动评估测试结果，并用图画方 式输出结果。滤光片测试这项测试用于确定滤光片马达是否正确运动，并通过对氧化钬的吸光度来确 定滤光片是否被污染。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,90,氧化钬测试氧化钬测试是对内置氧化钬滤光片的三个特征波长处的吸光度进行测定，进 行精度确认。在进行波长校准时，测试开 始后1nm的狭缝自动进入光路，为消除溶剂对吸收的影响，在流通池中注入 水进行实验。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,91,氧化钬测试结果,测试失败可能的原因 在流通池内有吸收光辐射的溶剂或气泡。校准不正确。流通池污染 光学部件污染（消色差透镜，窗口）建议采取的措施 流通池中用水做介质。重新校准，再次测试。进行流通池测试，如测试失败，更换流通 池窗口。用乙醇和不起毛的布擦洗光学部件。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,92,光强度测试这一测试要测定全波长范围内（190-950nm）氘灯和钨灯的光强，用四个 光谱范围来评价光强谱图。此项测试用于确定灯和光学元件的性能。测试开始后1 nm的狭缝自动进入光路，把增益 设定为零，为消除溶剂对吸收的影响，在流通池中注入水进行实验。光强图 谱的形状主要决定于灯、光栅和二极管阵列的性能。因此不同仪器的光强图 谱略有差别。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,93,强度测试评估Agilent化学工作站自动评估四个光谱范围内光强的测定值，并显示每一范 围内的极限值，测量光强的计算值，以及每一范围测试的成功或失败。光强测试结果,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,94,光强测试失败可能的原因在流通池内有吸收光辐射的溶剂或气泡。流通池污染光学部件污染（消色差透镜，窗口）建议采取的措施确保流通池中用水做介质，没有气泡。进行流通池测试。如测试失败，更换流 通池窗口。用乙醇和不起毛的布擦洗光学部件。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,95,流通池测试一旦把流通池装入检测器以及把流通池取下，就要测试全波长范围内（190-950nm)氘灯和钨灯的光强，测的光强比值表明流通池对光吸收的大小。这 一测试用于确定流通池窗口是否被污染。测试开始后1 nm的狭缝自动进入光 路，把增益设定为零，为消除溶剂对吸收的影响，在流通池中注入水进行实 验。流通池测试评估Agilent化学工作站自动计算评估光强值，光强比的大小（典型值在0.5-0.7 之间）决定于流通池窗口被污染的情况和流通池的类型。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,流通池测试结果,96,流通池测试失败（比值低）可能的原因在流通池内有吸收光辐射的溶剂或气泡。流通池污染建议采取的措施确保流通池中用水做介质，没有气泡。更换流通池窗口。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,97,暗电流测试这项测试用于了解各个光电二极管的漏电情况，可用于检查在特定波长下会 影响线性关系的漏电光电二极管。测试时狭缝系统退出光路，切断一切射到 二极管阵列上的光线，然后测定每个光电二极管的漏电电流，并用图显示。每个二极管漏电电流(用数值表示)应落在限定的范围（红色 带）之内。,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,98,暗电流测试,暗电流测试失败可能的原因 光学单元有毛病。建议采取的措施 更换光学单元,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,99,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,100,清洗流动池,Agilent 1100/1200 DAD故障诊断,日常维护,101,清洗流动池,Agilent 1100/1200 VWD故障诊断,日常维护,102,清洗流动池如果流动池被污染可先用以下方法处理:在不连接色谱柱的情况下先用高纯水冲洗20分钟，然后用5硝酸冲洗2小时，最后再用高纯水冲洗至流出液中性即可。如上述方法不行，就需更换流动池的检测窗。上述处理方法也适用于DAD的流动池。,Agilent 1100/1200 VWD故障诊断,日常维护,103,Question?基线噪音大可能由那些原因引起?,Agilent 1100/1200 紫外检测器日常维护，故障诊断,104,Answer基线噪音大可能由那些原因引起 泵压不稳，气泡，色谱柱污染，系统管路污染，流通池污染，灯强度不足，光学系统老化或污染，参数设置不合理,Agilent 1100/1200 紫外检测器日常维护，故障诊断,105,Agilent 1100/1200 其它检测器使用注意事项及日常维护,Agilent 荧光检测器(FLD)使用注意事项及日常维护.PMT GAIN:放大因子，该值大则信号高，但噪音也会随之增高，所以需优化。LAMP:有两种模式：standard 和economy。RESPONSE TIME：通常用4S。由于水性流动相长时间留在流动池会有藻类生长，而藻类会产生荧光，所以可添加有机溶剂如5的乙腈或甲醇。如怀疑流动池被污染可用以下步骤清洗之：1 用双蒸水冲洗30分钟以上.2 用注射器注射65硝酸入流动池并使其留在流动池约1小时。(注意，为了防止过压，请缓慢注射).3 用双蒸水冲洗干净。,106,Agilent 1100/1200 其它检测器使用注意事项及日常维护,Agilent 折光示差检测器使用注意事项及日常维护溶液瓶和废液瓶应高于泵和检测器，这样使流动池产生轻微压力有助于提高检测器的性能。RID的耐受压力最高只有5bar,所以如要串联其它检测器时务必将RID放在最后。一定要使用控温功能令光路恒温，为了防止结晶应将温度设置至少高于室温5以上。使用合适的response time通常用4S。一定要预先混合好流动相，如果是四元泵，请使用转接头(P/N 0100-1847)旁路比例阀。某些流动相与柱配合时会造成基线噪音。如乙腈/水作流动相与含氨丙基柱。,107,Agilent 1100/1200 其它检测器使用注意事项及日常维护,Agilent 折光示差检测器使用注意事项及日常维护RID基线漂移通常是溶剂变化引起的，如乙腈/水混合溶剂乙腈会挥发。四氢呋喃(THF)会形成过氧化物。某些吸水溶剂等，这些变化都会引起基线的变化从而造成基线漂移。,Agilent 1100/1200 HPLC日常维护总结,109,定期清洗溶剂过滤头（35浓硝酸浸泡1小时，不要使用超声波清洗）流动相应经过0.45um或更小孔径的滤器过滤，如果使用滤膜，注意有机膜与水膜的区别(聚四氟乙烯能适用于所有溶剂)根据情况更换Purge阀内的在线过滤头（Purge阀打开，纯水5ml/min，压力超过10bar时需更换）注意清洗在线脱气机及比例阀，尤其是长期使用水相或缓冲盐的通路，使用纯水冲洗后，再使用甲醇冲洗，可以打开Purge阀，使用5ml/min的流速。污染比较严重时，可以使用IPA清洗。一般的流程，例如A：Buffer B:MeOH C:Water D:CH3CN分析：A:B:D=20:30:50清洗：C 100%30min，B 100%30min,Agilent 1100/1200 HPLC日常维护总结,110,安装有seal wash组件的，无论是否使用缓冲盐，开泵之前都应该使之充满流动的液体（10%IPA水溶液）并调流速为20滴/分钟。正相色谱、反相色谱切换时应使用IPA过渡，长期使用正相，应更换正相柱塞密封垫样品进样之前最好过滤，如果样品量太少，可以适当抬高进样针的位置流动相pH大于9.5或小于2.3时，进样阀应更换TefzelTM转子密封圈注意不同检测器流通池耐压问题，尽量避免使用pH9.5的流动相，以防腐蚀流通池石英窗，避免使用可能析晶的流动相，防止流通池堵塞