前带检查方法及参数确定方案.doc

前带检查基本原理图1 抗原抗体反应的剂量反应曲线在抗原抗体的反应中，生成的不溶性抗原抗体复合物与抗原抗体的比例密切相关，在适当比例时生成的不溶性抗原抗体复合物量最大，此时透过的光最少，相当于吸光度最大；大于和小于这个比例时，生成的不溶性抗原抗体复合物量都会减少，透过的光增加，吸光度减小。在这种情况下，浓度相差很大的两份样本（抗原），生成的不溶性抗原抗体复合物量可以相等，如果不进行前带检查，会得到相同的测定结果。如图7所示。因此，对于抗原抗体反应，有必要进行前带检查。前带检查仅适用于终点法，固定时间法和动力学法不进行前带检查。前带限指没有出现抗原过剩时允许的最大或最小PC值。前带检查判断方法：反应速度比法反应速度比法是根据在一定的相同的时间内，抗体过剩反应曲线能够达到平衡，如图2所示；而抗原过剩反应曲线达不到平衡，如图3所示。具体判断方法： (prozone limit)前带限【PCM】 【q1】【q2】【q3】【q4】 (prozone check distinction abs.lowlimit)前带检查吸光度下限值ABS【abs.lowlimit】 样本PC值： 若PC> PCM正常情况,PC值比较小.，给出“前带!”标记。以下两种情况，不再进行前带检查。（1） 样本终点吸光度A< abs.lowlimit（上升反应）或 A>abs.lowlimit(下降反应)。（2） 样本反应度绝对值R>RCMAX(最大浓度标准品反应度绝对值)。上述q1q4为测光点.且满足 0<q1<q2<q3<q4<反应时间终点.前带检查的几点说明：1. 为提高前带检查的可靠性，7180项目参数界面设有一项前带检查吸光度的下限值(prozone check distinction abs.lowlimit)，在设定值以下时，不能进行前带检查。因为在很低浓度时，反应曲线达不到平衡，这种情况下的反应曲线类似与抗原过剩的反应曲线。因此有必要设置前带检查的吸光度下限值。2. 其次，考虑到反应度R>RCMAX(最大浓度标准品反应度)时，测试结果不再计算，即使计算，测试结果已经很大，并会给出相应报警，因此该种情况下也不必检查。3. 由于除alycon160外，大部分生化仪（如日立、奥林巴斯、雅培、贝克曼、岛津、sysmex等）均把抗原过剩检查称为前带检查，因此建议BS生化仪抗原过剩检查项（采用反应速度比法）改名为前带检查。参数确定方案1. 配置各种浓度水平的溶液(浓度水平覆盖前带.等价带及后带),找出如图1所示的抗原抗体反应的剂量反应曲线.2. 取测光点q1q4, 要求0<q1<q2<q3<q4<反应时间终点,q1,q2取反应曲线的前几个点(反应最快的部分,要求在反应曲线拐点以前), q3,q4取反应曲线的最后几个点(一般反应曲线达到了平衡) .如图2中,q1可取1,q2可取5,q3可取29,q4可取34.3. 根据2中的测光点,计算出各浓度水平的PC值,从而找出前带和后带之间的阈值PCm4. 前带检查吸光度下限值abs.limit取所配溶液的最低浓度水平的终点吸光度.图2 抗体过剩的时间反应曲线图3 抗原过剩的时间反应曲线