细胞生物学技术.ppt

细胞生物学技术 第一部分 电子显微镜技术 第二部分 细胞化学技术 第三部分 分析细胞学技术 第四部分 培养细胞技术,第一部分 电子显微镜技术 第一章 绪 论 第二章 电子显微镜的基本理论 第三章 透射电子显微镜 第四章 扫描电子显微镜,一电子显微镜的诞生和发展 二电镜样品制备技术 三电镜技术在医学领域的应用,第一章绪论,一电子显微镜的诞生和发展（一）电子显微镜诞生的理论基础：1 任何快速运动的粒子都伴有电磁辐射 电子辐射波波长约为 0.05(比可见光的波长短十万倍)2 高速运动的电子在电场或磁场的作用下 会发生折射并聚焦,（二）电子显微镜的发展 30年代 第一台电子显微镜诞生（1931年）60年代 电镜种类增多 80年代 电子显微学 90年代 电镜计算机一体化,二、电镜样品制作技术 电镜样品制作技术是制作电镜标本的综合技术 1、基本样品制备技术 超薄切片技术 负染色技术 常规扫描样品制备技术 2、特殊样品制备技术 电镜酶细胞化学技术 电镜放射自显影技术 免疫电镜技术 电镜原位杂交技术,三、电子显微镜技术在医学领域的应用,电镜技术广泛应用于医学各个学科 细胞生物学 微生物学 组织学 病理学等学科,从显微水平提高到亚显微水平，为阐明组织 细胞的结构和功能发挥了巨大的作用 了解生物大分子合成和代谢情况 研究抗原抗体反应以及定位基因表达,（一）在细胞生物学和分子生物学中的应用,观察感染细胞内病毒形态结构 协助病毒性疾病的诊断 研究原虫、细菌、真菌、螺旋体等的超微结构,（二）电镜是直接观察病毒结构的唯一工具,不仅能看到骨表面的微细形貌，而且 可以看到骨细胞的超微结构和骨基质 中钙盐在胶原纤维间的沉积过程 揭示了肌细胞内肌微丝的排列和结构,骨组织,肌系统,（三）电镜技术在组织学中的应用,电镜是病理学研究和疾病诊断的重要手段 在基础实验病理的研究中得以广泛应用 在临床疾病的诊断中发挥重要作用 特别在肾脏疾病、肿瘤的诊断及鉴别诊断中电镜已成为不可缺少的工具之一,（四）电镜技术在病理学中的应用,区别低分化鳞癌和腺癌 低分化鳞癌特征 张力微丝和桥粒 低分化腺癌特征 细胞间的紧密连接 连接复合体，微绒毛 粗面内质网等,电镜在确定肿瘤的组织发生类型和分化程度上起重要作用,1 电镜技术在肿瘤诊断中的应用,对神经内分泌肿瘤的诊断 各种神经内分泌肿瘤中,无论其分化程度如何,是原发的还是转移的，在电镜下均可发现神经分泌颗粒。对黑色素瘤的诊断 在无色素性黑色素瘤细胞中可找到未成熟的前黑色素小体（这种前黑色素小体只有电镜下观察到）,由于各种肾脏疾病的超微结构病变各具特点，所以肾脏活检的电镜观察对疾病的早期诊断有十分重要的意义，是目前肾脏疾病诊断不可缺少的手段，特别是在遗传性肾炎性疾病的诊断中电镜起着决定性的作用,2.电镜技术在肾脏病中的应用,基底膜增厚、撕裂，颗粒状物质沉积和节段性的基底膜变薄 基底膜弥漫变薄为其特征，厚度相当于正常厚度的2/31/3，肾小球脏层细胞质中有大量髓鞘样小体,Alport综合症,薄基底膜肾病（良性家族性血尿）,Fabry病,凋亡细胞形态学变化及其发展过程主要是通过 透射电镜和扫描电镜观察到的，电镜可以较准 确地判定单个的凋亡细胞 凋亡细胞在电镜下具有一定的超微结构特征，细胞凋亡过程中出现一系列特征性的形态学变 化大致可分为三个阶段,3.电镜技术在细胞凋亡研究中的应用,一、电镜技术包括：电子显微镜和样品制备技术二、电子显微镜是以电子束做光源，电磁场做透 镜，具有高分辨率，高放大倍率的显微镜 三、样品制备技术是制作电镜标本的综合技术 包括普通样品制备技术和特殊样品制备技术四、电子显微镜技术是研究细胞超微结构最重要 的手段,广泛应用于医学各学科.,第一章 小 结,