[语文]疟原虫生活史讲义2010.ppt

,前 言,疟疾是一种严重危害人民身体健康的常见病、多发病。主要流行于广大农村，在农忙季节发病最多。在我省已有几千年的历史。引起该病的病原是疟原虫。寄生在人体的有间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫及蛋形疟原虫四种。分别引起间日疟、恶性疟、三日疟及蛋形疟。我省目前仅有间日疟流行，不时也有由外地输入的恶性疟病例报告。人体疟原虫的发育、繁殖需经过无性生殖与有性生殖两个阶段，分别在人体和媒介按蚊两个宿主体内交替进行。四种疟原虫的生活史基本相似，均分为红细胞外期（在人体肝脏内发育繁殖）、红细胞内期（在人体发育繁殖，形态见图）和孢子增殖期（在按蚊体内）三期。在人体内完成的是无性生殖，在蚊体内完成的是有性生殖期，因此，人为其中间宿主，蚊为其之终末宿主。,疟疾的传播是由于雌性按蚊叮吸疟疾患者时，将病人红细胞内各期疟疟原虫随同血液一并吸进蚊胃，但只有红细胞内有疟原虫雌雄配子体才能在蚊体内结合并不断发育成许多子孢子。当携带成熟子孢子的蚊虫叮咬健康人时，随着唾液将子孢子注入人体，它们在人体肝脏内发育成熟之后进入血液中的红细胞内繁殖，这时病人就出现发冷发热头痛出汗及间歇发作的临床症状。如果我们在病人第一次症状发作时就能查出疟原虫，在第二次发作时病人就能得到治疗，这样只要不发第三场，疟原虫的配子体在红细胞就不能发育成熟。那么媒介按蚊吸了病人的血也起不到传播的作用。因此早期诊断出疟疾病人，对阻断疟疾传播是疟防工作极主要的一环节。建立疟原虫门诊血检，就是为早期发现疟疾病人，使其得到早期治疗来阻断疟疾流行为目的。因此镜检人员熟练掌握检查疟原虫的技术是能否早期诊断出疟疾病例的关键。,疟 原 虫 生 活 史,疟原虫是疟疾的病原体。寄生于人体的疟原虫有间日疟原虫(Plasmodium vivax p.v）、恶性疟原虫（Plasmodium falciparum p.f）三日疟原虫（Plasmodium malariae p.m）及蛋形疟原虫（Plasmodium ovale p.o）四种，分别引起间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。目前，在我省只有间日疟和恶性疟。,疟原虫生活史,人疟原虫完成其生活史需要人和按蚊两个宿主。在按蚊体内进行有性繁殖，按蚊是疟原虫的终末宿主；在人体内进行无性增殖，人是疟原虫的中间宿主。,疟原虫在蚊体内的发育,当雌性按蚊叮吸疟疾患者血液时，各期疟原虫随同血液进入蚊胃。此时，除雌、雄配子体能在蚊胃内继续发育外，其他各期疟原虫与红细胞均被胃液消化。雌配子体的核经减数分裂发育为不活动的圆形雌配子。与此同时，雄配子体的核很快分裂为48小块，并由细胞浆向外伸出48条鞭毛状细丝，每份核块进入一条鞭毛状细丝内，称为“出丝现象,疟原虫在蚊体内的发育,随后卵囊逐渐长大，核和胞浆不断分裂，最后形成许多梭状的子孢子,成熟的子孢子可以从卵囊壁的微孔逸出，也可因囊壁承受不了内部的压力破裂后，扩散进入寄主的体腔，部分子孢子随着血淋巴而流入唾腺，当这种按蚊再度叮咬健康人时，子孢子随唾液进入人体，在人体内继续发育繁殖。,疟原虫在蚊体内的发育,疟原虫在蚊体内发育时间的长短取决于温度 条件：1630之间是疟原虫孢子生殖的适宜温 度，在此界限内温度愈高，发育愈快，低于是 16或高于30时，疟原虫发育变慢，并退化变 性，直至死亡。日温差幅度太大，对疟原虫发育 也不利。在自然条件下，气温在2426时，疟 原虫完成子孢子发育所需的时间，间日疟原虫为 10天，恶性疟原虫为12天，为疟原虫的外潜伏期。,疟原虫在人体肝细胞内的发育,红细胞外期，进行裂体增殖。当唾腺内含疟原虫在肝细胞内的发育时期统称为 有成熟疟原虫子孢子的雌性按蚊叮咬人时，子孢子随着唾液注入人体末梢血液。子孢子不能直接侵入红细胞，而是经血流到肝脏侵入肝细胞，在血循环内的子孢子，约经30分钟后全部消失。,疟原虫在人体肝细胞内的发育,侵入肝细胞的子孢子寄生在肝实质细胞原浆内，此时虫体变成圆形，核开始分裂，进行无性的裂体增殖，称为红细胞外期裂殖体；又因此时红细胞内尚无疟原虫寄生而称为红细胞前期。裂殖体在肝细胞内逐渐长大，不断进行核分裂，经一定时间，细胞浆也分裂，并分别包绕核，形成许多裂殖子，成为成熟的裂殖体。,疟原虫在人体肝细胞内的发育,成熟裂殖体直径为4560微米，内含 数以万计的呈圆形或卵圆形裂殖子。随着 裂殖体增殖发育成熟，被寄生的肝细胞破 裂，裂殖子释入血液，侵入红细胞，开始 红细胞内其发育。从子孢子侵入人体内发 育至此所需时间，间日疟原虫为8天，恶性 疟原虫为56天，为疟疾的内潜伏期。,疟原虫在人体红细胞内的发育,分为红细胞内期裂体增殖和配子体形成两部分。在肝细胞内发育成熟的裂殖子进入血液后，一部分被吞噬细胞吞噬，一部分侵入红细胞，开始红细胞内的裂体增殖，称红细胞内期。,疟原虫在人体红细胞内的发育,裂殖子摄食红细胞内和血红蛋白和其他营 养物质，逐渐发育为小滋养（环状体）；其后核增大，胞浆渐多，呈阿米巴样运动，称大滋养体或阿米巴样体。间日疟原虫 的阿米巴样运动显著，恶性疟原虫较不显 著。,疟原虫在人体红细胞内的发育,疟原虫分解血红蛋白的代谢产物，成为疟色素，积蓄于细胞浆内，随着虫体发育，疟色素逐渐增多，其色泽形状因种而异。成熟的裂殖体，核的数量及其排列为各种疟原虫的特点之一。如间日疟原虫，核通常为16个，排列不规则；恶性疟原虫核通常为818个，排列不规则。每个核被一份胞浆包绕，称为裂殖子。,疟原虫在人体红细胞内的发育,裂殖体成熟后，被寄生红细胞破裂，裂殖 子和疟色素等内含物质进入血液，一部分 裂殖子被巨噬细胞吞噬，一部分裂殖子再 侵入健康红细胞，开始新的一次发育，如 此循环往复。完成每次红细胞内期裂体增 殖所需时间间日、恶性疟原虫均为48小时 左右。,疟原虫在人体红细胞内的发育,在周围血液内，除恶性疟原虫，其余种疟原虫的各个发育时期均可查到，恶性疟原虫红内期的发育增殖是在深部血管中进行，因此，在一般情况下，仅环状体和近成熟的配子体出现于周围血液。人体免疫力的产生，尤其是经过多次发作所产生的免疫力，若使疟原虫红细胞内期裂体增殖受到一定程度的抑制，可出现自然停止发作。,疟原虫在人体红细胞内的发育,红细胞内疟原虫经过几次裂体增殖后，部分裂殖子进入红细胞后不再进行裂体增殖，而发育成雌，雄配子体。这是疟原虫有性生殖的开始。间日疟原虫配子体较早，在无性体出现后23天出现，复发病人比较初发病人出现早。,疟原虫在人体红细胞内的发育,疟原虫分解血红蛋白的代谢产物，成为疟色素，积蓄于细胞浆内，随着虫体发育，疟色素逐渐增多，其色泽形状因种而异。成熟的裂殖体，核的数量及其排列为各种疟原虫的特点之一。如间日疟原虫，核通常为16个，排列不规则；恶性疟原虫核通常为818个，排列不规则。每个核被一份胞浆包绕，称为裂殖子。,疟原虫在人体红细胞内的发育,配子体在末稍血液内存在23天后成 熟。恶性疟配子体是在内脏组织的小血管 内发育，一般发病后512天成熟的配子体 才在周围血液内出现。成熟的两性配子体 被雌性按蚊吸入后，便在蚊体内进行有性 生殖,如仍滞留在人体血液内，经一段时间 便衰老死亡。,疟原虫的寿命,疟原虫在人体内有一定的寿命，恶性疟原虫约1年，其中大部分只活到68个月；间日疟原虫为1年半至3 年，不超过4年。人体免疫力对疟原虫的生存是有影响的，所以，这里说的疟原虫的寿命与指疟原虫在一定条件下的寿命；或者说是感染后的疟疾病程。,疟疾的复发与复燃,经长期实验研究。近年国外学者提出间日疟原虫的子孢子在发育繁殖上呈多态现象，具有遗传学上不同的两个型，即速发型和迟发型。两型子孢子同时进入肝细胞后，速发型子孢子立即开始红细胞外期裂体增殖，成熟后的裂殖子随被寄生肝细胞破裂而随着血流进入红细胞内繁殖，到达一定原虫数后，引起症状发作。,疟疾的复发与复燃,迟发型子孢子进入肝细胞后，不迅速进行裂体增殖，而处于发育缓慢的休眠状态，称休眠体（Hypnozoite），其休眠时间因虫株而异。经过一段或长或短时间休眠后，再继续进行裂体增殖发育成裂殖子后，进入血内开始引起症状发作。由此引起的临床症状，称为临床复发；若仅出现原虫血症，称为原虫复发,疟疾的复发与复燃,恶性疟原虫无迟发型子孢子，不 产生休眠体，即无真正的复发；临床 上所见停止发作后重新出现发作，是 由于原虫数因药物或免疫力一度压低 后重新升高所引起，称复燃或再燃。,生活史小结,雌按蚊肝细胞红细胞（小滋养大滋养体裂殖体小滋养体再循环或配子体雌按蚊),复习题,1.何谓中间宿主？何谓终末宿主？2.疟原虫的终末宿主及中间宿主是什么？3.何谓疟疾的复发及复燃？4.疟疾复发的根源是什么？5.寄生人体疟原虫有哪几种?6.通常是镜检疟原虫哪一期原虫？7.间日疟和恶性疟完成一个红内周期需多长 时间？8.间日疟和恶性疟在肝脏内发育需要多 少时间？这段时间称为什么期？,血 片 制 作,标签,1血涂片分厚薄两种。,薄片是借推片把血液薄薄地涂布于载玻片，使血细胞平铺在玻片上。薄血膜干燥快，原虫形态极少变形，多用于观疟原虫形态和鉴别虫种。另一种是厚片，血量为45立方毫米，涂成圆形的血膜，直径为0.81厘米。这厚片阳性检出率高，适于发现轻度感染者。,血膜的制作（取血时间）,取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有利时机；3648小时，可检出裂殖体；发作一、二次后，配子体出现较多。恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。,血膜的制作（取血操作）,取血方法:采血部位一般人为耳垂，指头，通常在耳垂取血（现场取血建议用大头针采血，一人一针，避免血传疾病）。先用75%酒精棉球消毒取血部位（冬季用手捻动耳垂使其充血后再行消毒），待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方，右手持消毒针迅速刺入耳垂下端12毫米，不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向挤压出血。,取血量及涂片法（涂片操作）,薄血膜 取洁净的载玻片2张，1张平置在桌上，以左手拇指，食指夹持载玻片两端（手指切勿接触玻片表面），用另一张边缘平滑（最好为磨口边缘）的载玻片做推片，用推片一端边缘的中点从取血部分取约1微升的血量（相当于1/4火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，并形成2530度夹角，待血液向两侧扩展约2厘米长度时，均匀而迅速地轻轻向左推出（约2.5厘米长）。,制作血膜的注意事项,1.玻片清洗时，避免玻片碰撞、磨损。制作血膜的载玻片必须完全清洁而毫无油渍或污垢。制片时，手指只能持载片的边缘，不能接触玻片表面，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜脱落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，才能使推出的血膜均匀一致。,2.刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不一溶血和着色而影响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜红蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。,3.血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽可能2448小时内固定染色；冬天也不能超过72小时。放置时间越久，厚血膜越不易脱血，染色效果也差。若不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定（13分钟）然后用过滤清水对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以后染色。,血膜染色原理及方法,吉氏染色方法,吉氏染色法配方：吉氏染色粉10g 中性甘油500ml 纯甲醇500ml 配制时，取吉氏染色粉10g置于大研砵中，加少量甘油充分研磨，边加边磨，至500ml甘油加完为止。然后将此研磨液转入1000ml 棕色试剂瓶中，直500ml甲醇洗净为止。盖紧瓶塞在室温中放置35日或在此7温箱12天即可应用。如需急用可放置60水浴箱中2 4小时可用，但染色效果较差，常偏碱。,染色方法：除瑞氏染色法外，染色前，须先用；甲醇或无水酒精将薄血膜固定。要注忌勿使甲醇延及厚血膜，否则血红旦白即凝固不能溶解，无法查见疟原虫。厚血膜可先用蒸馏水或清水溶血。吉氏染液染色：将血片朝一个方向插入染色缸中，再倒入新配的2%吉氏染液（吉氏原液2毫升同中性蒸馏水98毫升混匀），浸没厚、薄血膜，染色30分钟。然后取出，用清水轻轻冲洗干净后，将血膜朝下插在晾片板上，待干镜检。,瑞氏染色方法,瑞氏染液配制：瑞氏染色粉 0.2 g 甲醇 100ml 甘油 3 ml将瑞氏染色粉置于研钵内,加入甘油充分研磨,然后加入甲醇洗出研钵中的甘油溶液，倒入玻璃瓶中，摇匀后过滤应用。瑞氏染色方法：先在厚薄血膜间用蜡笔划一横线，再滴加瑞氏染液510滴，另加清水24滴于薄血膜上，经过2分钟后，再加与染液等量的水于薄血膜上的染液中，混匀后引过横线地厚血膜上，使厚薄血膜同时染色35分钟，水洗，晾干。吉氏、瑞氏混合染色法：取吉氏、瑞氏原液各半混匀，再将此液用水稀释成5%染液，染色的方法步骤同吉氏染色法。,血 片 镜 检,血片镜检：镜检疟原虫一定要以厚血膜为主，薄血膜仅作 虫种和编号之用；镜检用的目镜 一般以5 7 为宜，物镜必须用油镜（100），载物台要配有移动器；镜检时从血膜的一端开始，自上面下，自左而下，逐个视野顺序查看。发热病人血片至少要查完200个视野以上；结果报告分阳性疑似阴性三种，阳性至少要查见一个典型疟原虫（并需鉴定虫种和期别）方可确定，阳性血片全部保留，保留部分阴性血片备查：镜检站对所查血片应按血检登记本中的项目逐一登记，血检结果应尽快报出，最迟不超过2小时（恶性疟原虫立即上报），对上级单位由每月汇总上报一次。,白细胞与疟原虫比例计算法,先用常规方法算出每立方毫米血液中白细胞数，然后在油镜下检查薄血膜，计算一定数量白细胞时所观察到的疟原虫数，从而推算每立方毫米血液中含疟原虫数。例如白细胞总数为6000，在见到500个白细胞的视野中查到100个疟原虫，则每立方毫米血液中的疟原虫数为 60001005001200个。,影响染色效果的因素,染料甲醇和甘油不纯常使所配成的染液偏酸或偏碱影响着色。因此，新配制的染液需要试染，经过测定，以酸碱度最适宜的水去稀释，才能取得较好的着色效果。新配制的染液，因色素尚未充分溶解，一般染色力较弱且常带碱性。染液放置越长，染色力逐渐增加，尤以吉氏染色为甚，故应在故应在使用前12周配制。染液配好后，盛染液的瓶子应盖紧，以免影响染液质量。,1、染剂和溶剂的质量：,2、染液的新旧：,3、染液的稀释浓度：染液浓度高，着色块。各种细胞着色深，薛氏点点等粗大显著；染液浓度低，则着色慢各种细胞内部结构着色均匀清晰。如环状体子孢子及疟色素均在用稀染液较长时间染色后显现出颜色分明，但薛氏点茂氏点则不大显现成不能查见。4、染色时间：染色时间长，化学反应充分完成，染色效果好，反之则染色效果差。外界温度高时，染色化学反应快，着色快，染色时间可缩短；气温低时则时间应延长。因此，染色时间要随着染液的质量新旧浓度和染色时的气温而伸缩。,5、稀释和冲洗用水：,染液的稀释用水和染色后的冲洗用水，应该是中性的蒸馏水或煮沸过滤的冷开水。在没有蒸溜水的条件下，可用井水河水泉水或雨水。为使厚薄血膜着色较好，必须使稀释的染液呈中性或偏碱性，即以pH7.07.2的水稀释。当染色结果发生偏兰（碱）或偏红（酸）时，可用酸碱度与之相反的缓冲液冲洗血片。如染色太兰，可用pH较低的缓冲液冲洗；如染色太红，则用pH较高的缓冲液冲洗。如染色过深可以适当延长冲洗时间，予以校正。着色较好的血片，红细胞呈淡红色，嗜酸性细胞的颗粒呈鲜红色，淋巴细胞及疟原虫的胞浆呈兰色或淡兰色，白细胞的核呈紫兰色，疟原虫的核呈红色,薄血膜中常见的血液成分,中性白细胞,血小板,大单核球,淋巴球,红血球,酸性球,间日疟血象,1 环状体,2滋养体,3 裂殖体,雄配子体,雌配子体,中性分裂核粒细胞,淋巴细胞,间日疟原虫被寄生红细胞胀大,色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多,恶性疟原虫被寄生红细胞大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，数少,红血球：正常。大小：较大，约为红 细胞直径1/3。胞浆：环状，浅蓝色。核：红色，一个，偶有二个。色素：没有。,间日疟 环状体,小滋养体似环状，亦称环状体和一个环状体有2个核。大滋 养体呈阿米巴样，核一个，胞浆不规则，常含一个或几个空泡，色素黄褐色，细小杆状，散在分布。被寄生的红细胞明显胀大，褪色，常可见数量多、红色、细小的薛氏点。成熟大滋养体约 比正常红细胞大1.5倍，几乎充满红细胞。,小滋养体 环状体,红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等，分布均匀，数 目较多，鲜红色薛氏小 点。大 小：较大。胞 浆：不规则，浅兰色，出现阿米巴伪足，有泡。核：红色，一个。色 素：有，细小杆状，黄褐色，分布不均匀。,间日疟 大滋养体,红细胞：胀大，褪色，可有薛氏小点。胞 浆：较不规则，空泡小或消失，浅兰色。核：红色，分裂为二个以上。色 素：褐黄色，分布不均匀。,间日疟未成熟裂殖体,红细胞：胀大，褪色，可见薛氏 小点。大小：个体较大。胞浆和核：裂殖子1224个平均16个，排列不规则 核红色，胞浆浅兰色。色素：黄褐色常集于疟原虫的一边。,间日疟成熟裂殖体,形状大小：圆形，虫体较大。胞 浆：浅兰色。核：一个，较大，疏松，有明 显不着色带。色素：黄褐色，散在分布。,间日疟小（雄）配子体,形状大小：圆或椭圆，较大。胞 浆：深兰色。核：一个，较小，深红色常偏于一边，核周可见明显不染色带。色 素：黄褐色，均匀散在，数目较多。,间日疟大（雌）配子体,恶性疟原虫形态：环状体,均为红细胞直径的1/6；环纤细；核1个2个；一个红细胞寄生2个环状体的常见,红细胞：大小正常，颜色较深可见茂氏小点。大 小：虫体较小。胞浆和核：裂殖子836个平均1824个，排列 不规 则或呈二重排列，核红色胞浆兰色。色 素：黑褐色，集中于中央或一侧。,恶性疟成熟裂体,大配子体腊肠腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，位于中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周围。,小配子体新月形，两端较尖；核小，致密，深红色，位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周围,恶性疟配子体,厚血膜中疟原虫的形态,厚血膜中常见的血液成分,中性球,酸性球,中性球,大单核球,淋巴球,血小板,厚血膜中疟原虫的形态,厚血膜由于用血量较多，涂制的血膜小，红细胞重叠且干燥慢，致使虫体皱缩，空泡消失，胞浆变形，其形态改变的程度与疟原虫运动的强弱、空泡有无和大小有关。各期疟原虫在发育中，大小滋养体明显的阿米巴样运动，其他期仅有轻微运动；大、小滋养体含明显空泡，裂殖前期的空泡不明显或消失，成熟裂殖体和配子体均无空泡。,厚血膜疟原虫形态鉴定,厚血膜与薄血膜一样，主要根据各期疟原虫的形态特征，虫体大小，和疟色素的特点等。其中色素为疟原虫所固有，在鑒别时尤为重要。因此对各种疟原虫色素颗粒的大小，色泽和分布情况要熟练掌握。虫体大小可借中性白细胞来对比。一个中性白血病的大小约二倍于红细胞。如果红细胞“影子“尚存，就更加易鑒别。,呈环状或因空泡消失而变成各种形状，形状的改变因胞浆向核的一侧，或同时向二侧收缩，或围住核，或环中间有几处裂开而决定。间日疟原虫小滋养体大于恶性疟小滋养体，核较大，胞浆较厚，常呈“！”或“，”等。常伴有各期疟原虫。,小滋养体,间日疟小滋养体 恶性疟小滋养体,呈阿米巴样或缩成各种形状，常见有些原虫的胞浆缩为圆形，核和色素均被包在中间，着色很深，只能看到深蓝色的胞浆和黄褐色的色素折光，核模糊不清，或仅于调节显微镜的亮光时，才隐约可见。有些胞浆皱缩断裂成几个团块，大小不一，互不连接，核位于胞浆之中或外边色素分布不匀。有些则仅见胞浆和色素而核看不清楚。,大滋养体,三种疟原虫的裂殖体前期及裂殖体，除虫体略有缩小而着色较深外，几乎与薄血片一样。间日疟裂殖体较大，恶性疟和三日疟均较小。三日疟裂殖子较大，间日疟次之，恶性疟较小。,裂殖体,恶性疟裂殖体,间日疟裂殖体,间日疟均呈圆形，间日疟小配子体，核大，元形或星状,胞浆较少，着色淡，色素粗大，数量较多。大配子体与成熟大滋养体相似，但配子体的色素颗粒粗大，多而分散，有沿边分布的现象。,间日疟大小 配子体,间日疟配子体,恶性疟配子体,恶性疟配子体呈新月形或腊肠形，常见其边缘上附着一小块皱缩的红细胞膜，有时可见缩成圆形，核位于中央，色素散在核周，其外为一圈胞浆，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和色素，或核和胞浆均消失，只留下色素。,疟原虫与其它物体的鉴别,厚血膜可因染液的酸碱度影响，只看到小滋养体的核而不见胞桨；只看到疟色素并无其它结构；或者只见胞桨断裂的残块。滋养体，它与涂片和染色过程中所沾污的杂质包括来自空气的灰尘、真菌、孢子，来自取血时沾污的污垢、细菌，染料残渣，白细胞裂后散出之颗粒、碎片，网状红细胞的残骸等容易误为疟原虫。一般来说，在血膜上疟原虫和其他物体两者之一具有一定数量时，不难区别。但是，当两者数量都很少又不典型时，则鉴别比较困难。这时应 另外取血检查，不可轻易下结论。下面几种情况，容易误为疟原虫，应注意鉴别,1、疑似疟色素：血膜上的染料残渣及灰尘，有时可依据其颗粒大小，色泽及分布范围加以区别。转动微螺旋时，可见它浮于红细胞之上，与原虫不在一个平面上。2、疑似疟原虫核：细菌尤其是球菌或白细胞破裂后散出的颗粒，认为红色小点，与疟原虫的核相似，最易混淆。但球菌形体较大，边缘光滑，常见许多个聚集一处，分布较广。中性和酸性白细胞的颗粒，着色较淡，边缘整齐，附近常有白细胞的碎屑。3、疑似疟原虫胞桨：网状红细胞残核通常为兰色，与疟原虫的胞桨相似，有时因与上述红点巧合一起，而容易误为疟原虫。鉴别时如形同大滋养体，可据疟色素的特点加以区别；如形同小滋养体，可依据虫体大小、折光是否均匀及核与胞桨是否在一个平面上加以区别。,疟原虫与其它物体形态鉴别,服药后疟原虫形态,抗疟药物可以使疟原虫的形态发生各种变化。同一类型的药物对疟原虫的形态引起的变化大致相同。一般说，药物作用对大、小滋养体和裂殖体前期的形态变化较大，配子体的形态变化较小,最明显的变化有外观破碎、色素早期凝集和裂殖体缩小等。服药后疟原虫形态的变化，是考察药物效果效果的一种方法。现将几种常用的抗疟药治疗后间日疟原虫的形态变化,两种药物治疗后间日疟原虫形态的改变是相似的小滋养体常呈蜘蛛状，核着色深，胞桨着色淡而模糊，其边缘不规则，有时可见退化的原虫呈胞杆状贴于红细胞的边缘。,奎宁和氯奎,裂殖体的核疏松，或破裂成几个碎块，形状不规则色素常凝结成粗大颗粒或块状，排出虫体之外。配子体核疏松或破裂成几块，胞浆稀少或形成空洞，色素结成块状.,裂殖体前期,核疏松，有的破裂成几块，胞浆稀少，甚至破碎，形成空洞，色素常凝结成粗大颗粒或块状，分布于胞浆的边缘或全部被排出虫体之外，有些红细胞内只见核和胞浆而无色素，或只见薛氏点而原虫完全退化消失。,大滋养体,服用氯喹 疟原虫形态变化,间日疟原虫小滋养体的核和胞浆均变为稀少。空泡常增大，或缩成固实小体，大滋养体的核疏松，形状细长，或裂成几个，有些核中间可见空洞，胞浆稀少或破碎，色素凝结成粗大颗粒，裂殖体核常裂成碎块，大小不一，胞浆稀少，色素凝结成几块，有时被排出虫体外。未被药物杀灭的大滋养体可继续发育，但在发育尚未成熟前核及胞浆即开始分裂，因此，裂殖体小而圆，只含几个裂殖子。配子体的核疏松，胞浆稀少或破碎，色素颗粒粗大，常分布,服用伯喹治疗后 疟原虫形态变化,服用伯喹治疗后 疟原虫形态变化,1.疟疾是由疟原虫寄生于人体肝细胞和红细胞而引 起的一种严重寄生虫病。2.能寄生在人体的疟原虫有4种，P.v多见多发；P.f严重，来势凶，脑型疟。3.疟原虫需要人-蚊转换宿主后，才能完成生活史；蚊为按蚊属。4.P.v可有复发，其机理是子孢子有速发型和迟发型，复发是迟发型子孢子所致；P.f无复发。5.疟疾的典型发作症状是：冷、热、汗。6.疟疾的临床症状主要是：贫血、肝脾肿大。,小 结,7.疟原虫的感染阶段为：红内期无性体（输血）或子孢子（蚊咬）。8.疟原虫的致病阶段是：红内期无性体。9.疟疾的诊断：主要是在外周血红细胞内查见疟原虫各期形态，亦可用血清学和PCR检测协助。10.P.v全国流行,P.f南方山区;P.V与P.f可混合感染;P.m与P.o则较少见。11.输血可传播疟疾。,1构成疟原虫的三个基本要素是什么？2被间日疟和恶性疟寄生的红血球有何化？3在周围血液中可以见到P.V和P.f哪些期的 疟原虫？4薛氏小点和茂氏小点有那些不同的特点？5.简述P.V和P.f大小配子体的形态特点6.影响染色效果的因素7.疟原虫与其它物体的鉴别,思考题:,间日疟原虫 雄配子体,间日疟原虫 雌配子体,间日疟原虫 环状体,间日疟原虫 环状体,厚血片间日疟原虫,间日疟原虫大滋养体,间日疟原虫裂子体,间日疟 各期形态,间日疟原虫厚血膜,疟疾临床诊断及治疗,疟疾是严重危害人类健康的重要传染病，是世界卫生组织确定的全球三大公共卫生问题之一。全球有107个国家和地区，约32亿人口受到疟疾的威胁，每年3.5-5亿疟疾病例，有100多万人死于恶性疟。疟疾主要流行于我省疟疾主要在襄樊、随州、孝感、荆门四市的18个县（市、区）流行，按地理划分仍然大致为三片，枣阳、襄阳、老河口三市（区）交界的乡镇为一片，曾都、广水、孝昌三县市交界的乡镇为一片，宜城、南漳、东宝三县市交界的乡镇为一片，其流行范围逐渐缩小。在国内主要流行地方在云南、海南、安徽等。非洲撒哈拉沙漠以南的大部分国家以及东南亚、中南美洲等热带国家或地区，非洲国家最为严重，95%为恶性疟原虫感染。,在亚洲的发达国家或地区如日本、韩国、以色列、中国香港特别行政区等传染性疾病发病率较低，但仍存在着危险因素。前往文莱、缅甸、柬埔寨、东帝汶、印度尼西亚、老挝、马来西亚、菲律宾、新加坡、泰国、越南、中国、朝鲜、韩国、阿富汗、孟加拉、不丹、印度、马尔代夫、尼泊尔、巴基斯坦、斯里兰卡、伊朗、伊拉克、阿曼、沙特阿拉伯、叙利亚、也门、亚美尼亚、阿塞拜彊、格鲁吉亚、塔吉克斯坦、土库曼斯坦、乌兹别克斯坦、土耳其这些国家或地区旅游和工作应注意避免感染疟疾。,疟疾的病原体为疟原虫，疟疾通过蚊虫传播，但是只有按蚊属的少数蚊种才能传播疟疾。人群对疟原虫普遍易感。感染人体的疟原虫有四种，即恶性疟、间日疟、三日疟和卵形疟原虫，目前三日疟和卵形疟比较罕见。我国对亚、非、拉发展中国家的援助项目日益增多，这些地区的大多数国家存在疟疾流行，为提高医务人员对疟疾的诊治和防护能力，特编写疟疾诊治要点，供参考。,一、早发现 通过询问病人到过有疟疾流行的地区和国家，具体发病时间及临床症状。二、早诊断 及时进行病原学诊断及血常规检查。疟疾病人一般白血球总数正常和偏低，嗜酸性增高。血色素偏低，严重病人出现红血球总数下降，血小板减少。三、早治疗 根据 实验室病原学诊断为阳性病人应及时进行治疗。,一、临床表现有规律的发冷、发热、出汗是疟疾发病的典型特征：多数病例在发热前有时间长短不一的寒战或畏寒，体温在短时间内很快上升，持续数小时后下降并伴有不同程度的出汗。病人有溶血性贫血症状，白细胞不增加。间日疟每2天发作1次，多见于中午前后或下午，但恶性疟一般1天1次或无明显规律，有时出现消化道、神经系统症状，尤其见于重症恶性疟患者。,1发冷期：患者始感四肢和背部发冷、继而周身寒颤、面色苍白、口唇等发绀，同时伴剧烈头痛、肌肉和关节酸痛，有时有恶心、呕吐，常持续数分钟至2小时不等，体温开始迅速上升。2发热期：患者的体温常可达40以上，脸色潮红，结膜充血，周身燥热，口渴，头痛加剧，呼吸急促。儿童、特别是5岁以下的患儿甚至出现谵妄、惊厥等症。此期一般持续24小时。,3出汗期：始为面颊部和双手微汗，继而波及全身，体温迅速下降，甚至有降至35者。发热时的各种症状随之消失，患者顿感通体舒适，惟乏力疲劳，常安然入睡。此期一般持续24小时。4间歇期：病人感疲劳、乏力，无其他明显症状。,二、诊断要点 根据流行病学史、临床表现以及实验室检测结果等予以诊断。1流行病学史 即病人是否到过疟疾流行区。接诊医生询问病人是否有疟疾传播季节在疟疾流行区住宿、夜间停留的历史。2临床表现 典型的临床表现呈周期性发作，每天或隔天发作一次。发作时有发冷、发热、出汗等症状。发作多次后可出现脾大和贫血。重症病例出现昏迷等症状。,3实验室检查 血涂片染色显微镜检查疟原虫是确诊疟疾的常规手段，查到疟原虫是最可靠的病原学证据。近年发展的疟疾快速诊断方法也可作为病原学诊断依据。4假定性治疗 有些发热病人虽然临床表现疑似疟疾，但感染史不明，镜检也没发现疟原虫，可以给予抗疟药作为假定性治疗。,三、治疗要点（一）治疗原则 治疗的原则是及时、全程、足量、联合用药。由于疟原虫容易对药物产生抗药性，必须短时间血液中达到足够治疗量才能取得良好效果而不致产生抗药性。,（二）间日疟的治疗 氯喹1.5克分三天服，第一天0.6克，第、天0.4克。加服伯喹180mg，分八天服（每日22.5mg）。儿童酌减。,（三）恶性疟的治疗(选用以下一种疗法)1、双氢青蒿素:口服总剂量480mg。分7天服，每天1次，每次60mg,首剂加倍。2、双氢青蒿素哌喹片剂：口服总剂量8片（每片含双氢青蒿素40mg，磷酸哌喹320mg），首剂2片，首剂后68小时、24小时、32小时各 2片。以上药物需加服伯氨喹，口服总剂量45mg，分2天服，每次22.5mg。,（四）重症疟疾的治疗(选用以下一种疗法)1蒿甲醚：每天肌注1次,每次80mg，连续35天，首剂加倍。若原虫密度大于15万/l，首剂给药后46小时，再给予80mg肌注。2青蒿琥酯：每天静脉注射1次，每次60mg，连续35天，首剂加倍。若原虫密度大于15万/l，首剂给药后46小时，再给予60mg静脉注射。注射时,需先将5%碳酸氢钠注射液1ml注入含青蒿琥酯60mg粉针剂中，反复振摇23分钟，待溶解澄清后，再注入5ml等渗葡萄糖或生理盐水，混匀后缓慢静脉注射。配制后的溶液如发生混浊,则不能使用。上述两种疗法，待患者病情缓解后,应改用口服剂型完成所需的疗程。,（五）重症疟疾的对症处理 应尽快控制高热和抽搐，促进病人清醒。同时及早发现及时处理并发症,则是提高治愈率，减少死亡的关键。,1退热镇静 可用氯丙嗪和异丙嗪各0.51mg/kg体重、安乃近1015mg/kg体重肌内注射。隔6小时可反复使用,务求把体温控制在38以下。反复使用退热药时，应慎重，要密切注意观察。2脑水肿 使用脱水剂甘露醇；体温要降至37以下；液体维持负平衡。,3中枢性呼吸衰竭 使用脱水剂；使用呼吸中枢兴奋剂；超高热并呼吸衰竭者，必须快速物理降温；保持呼吸道畅通，氧气吸入。4心力衰竭 减轻心脏负荷；使用强心药洋地黄丙甙；防止肺水肿。,5休克 补充血容量；注意纠正酸中毒和心功能不全；酌情选用血管活性药物多巴胺、阿拉明等。6代谢性酸中毒 用5%碳酸氢钠溶液5ml/kg体重静脉滴注，时隔46小时后以半量给予。7溶血 停止使用可能引起溶血的药物，如奎宁、伯氨喹、砜类或退热药等；使用肾上腺皮质激素；输入5%碳酸氢钠5ml/kg体重，以后酌情以半量重复给12次；充足输液和利尿，严重贫血者输血。,8肾功能衰竭早期少尿而怀疑肾衰时，可使用甘露醇静注；确诊肾衰后，应严格限制液体入量；透析疗法。9重度贫血病人未清醒而红细胞数在200万个/l以下者，应予以输血。,四、预防要点 目前还没有可应用的有效疟疾疫苗，预防疟疾主要依靠个体防护。预防的方法有：（1）加强健康教育 加强防疟知识的宣传教育，提高个人防护意识，改变户外露宿的习惯。（2）减少人蚊接触 使用蚊帐、安装纱门纱窗、蚊香熏蚊、涂抹驱蚊剂，从事野外作业穿长袖衣裤，防止蚊子叮咬。（3）预防服药 在疟疾严重流行地区，根据不同情况，可对高危人群进行预防服药，但一般使用不超过三个月，可在以下两种方案中任选一种：1磷酸哌喹：每次服600mg,每月1次,睡前服。2氯喹：每次服300mg,每710天服1次。,欢迎提问题和宝贵意见 万分感谢！制片：王重新 毛重喜 周水茂,