生物安全培训【院内讲课】 .ppt

1,实验室生物安全概述检验科 杨军2023年2月18日,2,内容提要,生物安全的含义病原微生物分类生物安全实验室的设立与管理实验室生物安全防护的基本原则,3,一、生物安全的含义和生物安全的由来,什么是生物危害？广义上的生物危害：指有害或有潜在危害的生物因子对人、环境、生态和社会造成的危害或潜在危害。实验室生物危害：指在微生物和生物医学实验活动过程中对人、环境、生态和社会造成的危害和对环境造成的污染。,4,实验室生物安全（laboratory biosafety)指在从事病原微生物实验活动的实验室避免对工作人员及相关人员的伤害、对环境污染及对公众的伤害、对操作对象的污染等而采取的综合措施。措施包括规范的实验室设计和精心施工、正确的实验设备的配置、适合的个人防护装备的使用（硬件）；实验人员的生物安全意识强化、严格管理、规范的操作规程（SOP)（软件）等实现其功能。,5,生物安全的由来,近年来世界范围的医院感染、实验室感染和动物饲养管理中造成的工作人员感染是生物安全产生的主要直接原因。,6,实验室感染的相关报道,80%是不明原因的感染20%感染的原因是明确的80%是由工作人员操作失误引起的20%是由设备故障引起的导致感染最多的4种实验室事故溢出和泼洒针头和注射器锐器、碎玻璃动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤,7,微生物实验相关事故1992年美国报告因工作感染艾滋病的人员13例，其中有1例是实验室工作者，12例是临床医生或护士1993年国内某医院报告225名医院工作人员HBV检测结果，医生护士、食堂工作人员、检验人员、其中检验人员感染率最高，阳性率为81.2%。多为主观估计错误及操作失误引发,8,微生物实验相关事故1941年美国发生74例实验室相关的吸入性布氏杆菌感染事故1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人员高5倍1974年丹麦某医院临床生化检验室的工作人员肝炎发病率比普通人群高出 7倍,9,微生物实验相关事故,2003 年9月10日新加坡实验室SARS病毒感染事件2003年12月16日台湾实验室 SARS感染事件2004年国家疾控中心病毒所实验室SARS感染事件（4月22日-6月1日，北京7例，安徽2例；隔离北京747人、病毒所161人，安徽117人）,10,原因:缺乏培训,知识,或经验 疏忽和粗心(不警醒)疲劳 图省事 无充足的工作时间;操作过快 未遵循安全的操作规程 对危险性认识不足,实验室意外事故,1.1,11,实验室生物安全的重要性,实验室生物安全已经构成了开展病原微生物实验的基本条件实验室生物安全涉及人的生命和环境安全，必须高度重视实验室生物安全工作是关系到经济发展、社会稳定、人民生命安全与健康的大事,12,二、病原微生物分类,病原微生物实验室生物安全管理条例人间传染的病原微生物名录 第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。（痘病毒科）第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。（高致病性禽流感 正粘病毒科、艾滋病病毒 逆转录病毒科、炭疽芽孢杆菌 结核杆菌 霍乱弧菌）,13,二、病原微生物分类,第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危 害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。（链球菌 沙门菌 军团菌 百日咳杆菌）第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。其中，第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。,14,名录涉及的病原微生物种类,15,三、实验室的设立与管理,国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定将实验室分为四个生物安全防护级别。一级生物安全防护实验室（BSL-1）二级生物安全防护实验室（BSL-2）三级生物安全防护实验室（BSL-3）四级生物安全防护实验室（BSL-4）三级、四级实验室应当通过实验室国家认可,16,病原微生物实验室等级,一类微生物二类微生物 三类微生物 四类微生物,四级生物安全（高度防护）实验室（BSL-4,P4）三级生物安全（防护）实验室（BSL-3，P3)二级生物安全（基础）实验室（BSL-2,P2)一级生物安全实验室（BSL-1,P1),17,实验室的设立与管理,高致病性病原微生物实验活动一级、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动，应当具备下列条件：（一）实验目的和拟从事的实验活动符合国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定（二）通过实验室国家认可（三）具有与拟从事的实验活动相适应的工作人员（四）工程质量经建筑主管部门依法检测验收合格符合条件发给从事高致病性病原微生物实验活动的资格证书新建、改建或扩建一、二级实验室向市主管部门备案三级、四级实验室还要向环境保护主管部门备案,18,实验室的设立与管理,实验室或者实验室的设立单位应当每年定期对工作人员进行培训，工作人员经考核合格的，方可上岗。从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室，应当每半年将培训情况向省级主管部门报告。从事高致病性病原微生物相关实验活动应当有2名以上的工作人员共同进行。进行健康监测，建立健康档案；必要时，应当对实验室工作人员进行预防接种。,19,四、实验室生物安全防护的基本原则,实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施（一级屏障），实验室的特殊设计和建设要求（二级屏障），严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入各实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人。生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。,20,安全设备和个体防护（一级屏障）,安全设备和个体防护是确保实验室工作人员不与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备、级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。,21,安全设备和个体防护（一级屏障）,必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风净化装置的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确保安全的设备。必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品，如个人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩。,22,一级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。包含微生物举例 大肠杆菌 格鲁伯耐格里原虫 感染性犬肝炎病毒 枯草杆菌,23,一级生物安全防护实验室,实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗,实验室设计及建造,24,一级生物安全防护实验室,一般无须使用生物安全柜等专用安全设备工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套,安全设施和个体防护,25,一级生物安全防护实验室,工作过程中禁止非工作人员进入实验室。接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及存储食物,标准微生物操作规程,26,一级生物安全防护实验室,使用机械移液器吸取液体，禁止口吸制定尖锐器具的安全操作规程按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活（如高压）。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。,标准微生物操作规程,27,二级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。包含微生物举例：麻疹病毒 沙门氏菌 乙型肝炎病毒 HIV 血清学检测 衣原体 志贺氏菌,28,二级生物安全防护实验室,满足一级实验室(标准微生物操作规程)各款要求，在此基础上特别注意 制定出入制度 实验室人口贴上生物危险标志 制定实验室特定的生物安全操作规则 每年一次最新安全培训制度每年生物安全进行评估生物危险级,特殊微生物操作规程,29,二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程,禁止用手处理破碎的玻璃器具。使用塑料器材代替玻璃器材。培养基、组织、体液及其它具有 潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌。用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止用手直接从注射器取下。用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。,30,二级生物安全防护实验室,工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)必要时收集从事危险性工作人员的本底血清严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体和备案制度。每半年进行一次 HIV 抗体检测，并保留样品实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案禁止将无关动物带入实验室,特殊微生物操作规程,31,二级生物安全防护实验室,处理以下致病微生物时应在生物安全柜(级)中进行，包括:高浓度 大容量 有喷溅可能性上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行。级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测。,安全设施和个体防护,32,二级生物安全防护实验室,在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。,安全设施和个体防护,33,安全设施和个体防护,当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使用面部保护装置应有相应的SOP,34,个人防护装备,个人防护装备(Personal Protective Equipment,PPE)是指用于防止工作人员免受物理、化学、生物等有害因子伤害的器材和用品，保护实验人员免于感染性材料的各种方式的暴露，避免实验室相关感染。,35,个人防护用品,防护服 符合GB19082-2003标准防护口罩 符合GB19083-2003标准防护眼镜 视野宽阔、透明度好、防溅、防雾手套 一次性乳胶或橡胶手套鞋套 防水、防污染长筒胶鞋 医用工作服 医用工作帽 呼吸防护用品,36,防护装备穿脱顺序,穿 脱呼吸防护器 外层手套（全面罩、半面罩等）眼罩、放入消毒液中鼻夹，气密性(脱去外层手套)帽子或头罩 防护服，内面朝外眼罩 帽子防护服 呼吸防护器鞋或鞋套 鞋或鞋套 手套 内层手套 洗手,37,个人呼吸防护用品,38,国产医师专用正压防护器材,39,防 护 斗 篷,40,41,42,43,三级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素。通常已有预防的疫苗。包含微生物举例 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 鼠疫杆菌 炭疽杆菌 Q热病原体 HIV(血清学检测除外)澳大利亚立克次氏体 加拿大立克次氏体,44,四级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行，带有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。包含微生物举例 黄病毒 埃博拉病毒 中欧蜱传脑炎病毒,45,一级屏障：个人防护装备、生物安全柜、高压灭菌器、离 心机罩、洗眼器二级屏障：独立的送、排风系统、中央空调、按“三区二缓”进行分区,46,谢谢大家！,