植物脱毒技术.ppt

植物脱毒,一、脱毒苗培育的意义二、脱毒的方法三、脱毒苗生根培养与驯化移栽四、脱毒苗鉴定五、脱毒苗保存与繁殖,一、脱毒苗培育的意义,（一）植物病毒的危害（二）病毒传播的方式（三）脱毒苗培育的意义,二、脱毒的方法,（一）茎尖培养脱毒（二）热处理脱毒（三）茎尖脱毒与热处理相接合（四）微体嫁接脱毒法（五）愈伤组织培养脱毒（六）珠心胚培养脱毒法（七）花药培养脱毒（八）抗病毒药剂法,（一）茎尖培养脱毒,1微茎尖培养脱毒机理2微茎尖培养脱毒的过程,马铃薯脱毒,马铃薯脱毒技术,2023/2/14,任务一 外植体选取及消毒,选择：选取生长旺盛、健壮、无病或患病相对较轻的的植株。切取4-6cm的顶芽或侧芽，除去外部可见的小叶。消毒：先用自来水冲洗30mink，再用75%的酒精漂洗几秒到十几秒，然后用0.1%的氯化汞或20倍的次氯酸钠液消毒10-15min。消毒后的材料用无菌水冲洗3次。,任务二 准备培养基,初代培养：MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LGA3+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L琼脂，PH5.8继代增殖：MS+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L琼脂，PH5.8,2023/2/14,将消毒后的材料在解剖镜下进行剥离，如果是用于快速繁殖的茎尖材料可带2-4个叶原基或更多，如果是用于脱毒的切取0.1-0.5mm,带1-2个叶原基，并迅速接到培养基上。,解剖镜下剥取茎尖,任务三 茎尖剥离和接种,任务四 继代培养,（二）热处理脱毒,1热处理脱毒的原理2热处理脱毒的方法温烫处理脱毒法热空气处理脱毒法3影响热处理脱毒的因素4热处理的优缺点,（三）茎尖脱毒与热处理相接合,（四）微体嫁接脱毒法,（五）愈伤组织培养脱毒,（六）珠心胚培养脱毒法（七）花药培养脱毒（八）抗病毒药剂法 三氮唑核苷、5-二氢尿嘧啶、双乙酰-二氢-5-氮尿嘧啶、,三、脱毒苗生根培养与驯化移栽,四、脱毒苗鉴定,（一）直接观察法（二）指示植物鉴定法 1汁液涂抹鉴定 2小叶嫁接法,3双重芽接法4双重切接法,（三）抗血清鉴定法（四）分子生物学鉴定法 1双链RNA法（dsRNA）2核酸杂交技术 人工合成能与病毒碱基互补的(cDNA）3聚酶链反应技术（PCR)（五）电镜检测法,五、脱毒苗的保存与繁殖,（一）脱毒苗的保存1隔离保存2离体保存（1）低温保存（2）超低温保存 快速冷冻法 慢速冷冻法 分步冷冻法 干燥冷冻法（二）脱毒苗繁殖,