巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 .ppt

.,1,药物分析,主讲：胡承波 Mobile:13594698076E-mail:重庆文理学院材料与化工学院化工制药系,第十章巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,.,2,本 章 主 要 内 容,第一节 巴比妥类药物的分析第二节 苯并二氮杂卓类的分析,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,.,3,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,学 习 要 求 一、掌握巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药及主要的理化性质；鉴别试验及含量测定的原理。二、熟悉 本类药物鉴别试验及含量测定的常用方法，特殊杂质与检查方法。,.,4,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,巴比妥及苯并二氮杂卓类药物均为临床上广泛应用的镇静催眠药。第一节 巴比妥类药物的分析一、巴比妥类药物的结构与性质巴比妥类药物均为巴比妥酸的衍生物，为环状酰脲类镇静催眠药，结构通式如下：,环状丙二酰脲类化合物：,.,5,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,本类药物的结构可大致分为两个部分：1.环状丙二酰脲、1,3二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性。2.取代基部分区别各种巴比妥类药物。巴比妥类药物是环状酰脲类的镇静催眠药；巴比妥类药物剂量由小到大，中枢抑制作用相继表现为 镇静、催眠、抗惊厥和麻醉作用；其中苯巴比妥还具有抗癫痫的作用。,.,6,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,典型药物,(Phenylbarbital),(barbital),.,7,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,(Secobarbital),戊巴比妥,(Pentobarbital),.,8,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,.,9,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,(二)主要性质性状白色结晶或结晶性粉末。熔点具有一定的熔点。溶解度微溶或极微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂，钠盐易溶于水，难溶于有机溶剂。稳定性在空气中稳定，一般加热易升华。六元环结构比较稳定，遇酸、氧化剂、还原剂时，环一般不会断裂，与碱液共沸时则水解开环，并产生氨气。,.,10,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,1、弱酸性该类药物的母核结构环状结构中含有1,3-二酰亚胺基团，可发生酮式-烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离。,一级电离,二级电离,烯醇互变,.,11,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,由于该类药物具有弱酸性(pKa:7.38.4)，可与强碱反应生成水溶性的钠盐。反之，钠盐加酸后成游离的巴比妥类药物，可提取分离出来。,.,12,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,2.水解反应,异戊巴比妥,巴比妥,.,13,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,巴比妥钠注射液不能预先配制进行加热灭菌，须制成粉针剂，临用时溶解。,苯巴比妥钠的水解,.,14,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,3.与金属离子反应 由于含有丙二酰脲或酰亚胺基团，在核实的pH值溶液中，可与银、铜、钴、汞等离子反应显色或产生有色沉淀，可用于本类药物的鉴别和含量测定。,a.与银盐的反应,.,15,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,b.与铜盐的反应：,巴比妥类铜吡啶,显色,巴比妥类紫色或紫色沉淀,硫巴比妥类绿色,.,16,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,本类药物与铜吡啶试液的反应机制为：,.,17,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,c.与钴盐的反应,Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2,异丙胺,无水甲醇或乙醇,.,18,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,d.与汞盐的反应巴比妥类药物+汞盐白色（可溶于氨试液）,.,19,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,4.与香草醛(Vanillin)的反应丙二酰脲中的氢比较活泼，与香草醛的浓硫酸作用下发生缩合反应，生成有色的产物。,戊巴比妥鉴别：取戊巴比妥10mg，加香草醛约10mg和硫酸2ml，混合后在水浴上加热2min，显棕红色。放冷，小心加入乙醇5ml，即显紫色并变成蓝色。,有色物质,香草醛,巴比妥类药物,浓硫酸,+,.,20,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,5.紫外吸收光谱特征,240nm,255nm,A.H2SO4液(0.05mol/L,未电离)B.pH9.9缓冲液(一级电离)C.pH13NaOH液(1mol/L,二级电离),1,5,5-三取代巴比妥类药物不存在二级电离，最大吸收波长不变。,5,5-二取代和1,5,5-三取代巴比妥,.,21,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液(0.1mol/L),硫代巴比妥的紫外吸收光谱,.,22,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,6.薄层色谱行为特征供试品主斑点的大小与对照品溶液斑点进行比较。7.显微结晶鉴别,药物本身晶形,反应产物晶形,.,23,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,二、鉴别试验(一)丙二酰脲类的鉴别试验该反应为巴比妥类药物母核的反应，是本类药物的共性。可作为该类药物的一般鉴别项。1、银盐反应 取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。2、铜盐反应取供试品约50mg，加吡啶溶液(110)5 ml，溶解后，加铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。,.,24,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,(二)特征基团反应1、利用硫元素的鉴别试验如硫代巴比妥类的鉴别,硫代巴比妥类与巴比妥类的区别,.,25,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,2、利用不饱和取代基的鉴别试验如含有不饱和取代基的司可巴比妥钠的鉴别试验。,I2,褪色,Br2,KMnO4,.,26,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,3、利用芳香取代基的鉴别试验具有芳香取代基的巴比妥类药物，如苯巴比妥及其钠盐的鉴别：a.硝化反应,苯巴比妥与NaNO2-H2SO4反应生成橙黄色橙红色,区分苯巴比妥与不含芳环取代的巴比妥类药物。,b.硫酸-亚硝酸钠反应,.,27,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,(三)特征熔点进行鉴别试验如司可巴比妥钠的熔点为97；苯巴比妥钠的熔点为174-178.(四)吸收光谱特征药物与标准品进行比较。,.,28,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,三、特殊杂质检查(一)苯巴比妥的特殊杂质检查苯巴比妥的合成工艺：,.,29,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,.,30,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,1.酸度的检查,中间体乙酰化不完全时，与尿素缩合产生的杂质,苯基丙二酰脲,酸性较强,检查方法取本品0.20g，加水10ml，煮沸搅拌1min，放冷，滤过后，取滤液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得显红色。,.,31,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,2.乙醇溶液澄清度检查中间体I杂质的量，利用其在乙醇中溶解度小的性质进行检查。方法：取本品1.0g，加乙醇5ml，加热回流3min，溶液应澄清。,.,32,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,3.中性或碱性物质主要指中间体I的副产物：2-苯基丁酰胺（脲）或分解产物等杂质。这些杂质不溶于NaOH 试液而溶于乙醚。而苯巴比妥具有酸性，溶于氢氧化钠溶液。提取重量法测定杂质含量：,.,33,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,四、含量测定 银量法 溴量法 巴比妥类药物的含 酸碱滴定法 量测定方法 紫外分光光度 提取重量法 HPLC法、GC法,.,34,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,（一）银量法 基于巴比妥类药物在合适的碱性溶液中，可与银离子定量成盐，可采用银量法测定本类药物及其制剂的含量。如苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它们的制剂，中国药典均采用银量法测定其含量。优点：操作简便，专属性较强。其他的杂质不与硝酸银反应。缺点：受温度影响较大；接近滴定终点时反应较慢。滴定终点以溶液出现浑浊为终点指示难以观察。,为了克服这些缺点：溶剂系统：甲醇3无水碳酸钠 终点指示：电位法指示（Ag玻璃电极系统）,.,35,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,测定方法与计算 例如:异戊巴比妥及其钠盐的测定：取本品约0.2g，加甲醇40ml使溶解，新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15ml，照电位法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定，即得。每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3（或24.83mg的C11H17N2NaO3）。原料药：直接滴定法（容量分析法）,.,36,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,注意事项（1）无水碳酸钠应新鲜配制（2）硝酸银滴定液应新鲜配制,.,37,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,（二）溴量法 凡在5位取代基含有不饱和键的巴比妥类药物，其不饱和键能与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法测定其含量。中国药典收载的司可巴比妥钠采用本法测定。其测定原理可用下列反应式表示：,（定量过量）,Br2+2KI 2KBr+I2,（剩余）,I2+2Na2S2O3 2NaI+Na2S4O6,.,38,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,司可巴比妥钠测定 取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。,.,39,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,(三)酸碱滴定法 巴比妥类药物呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴定，或在非水溶液中用强碱溶液直接滴定。常用的方法如下：1.在水乙醇混合溶剂中滴定 基于本类药物在水中的溶解度较小，滴定时多在醇溶液或含水的醇溶液中进行，这样可避免反应中产生的弱酸盐易于水解而影响滴定终点。常以麝香草酚酞为指示剂，滴定至淡蓝色为终点。,.,40,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,异戊巴比妥,水醇,溶解,麝香草酚酞,NaOH,淡蓝色,.,41,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,如异戊巴比妥醇溶液的滴定测定法：取本品0.5g,精密称定，加乙醇20ml溶解后，加麝香草酚酞指示剂8滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3。,终点指示：电位法,原因：操作过程中易于吸收二氧化碳，而使得终点的淡蓝色褪去，采用空白对照也难以得到满意的效果。,.,42,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,2.非水滴定法 巴比妥类药物在非水溶液中的酸性增强，用碱性标准溶液滴定时，终点较为明显，可获得比较满意的结果。测定时常用的有机溶剂有二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿、丙酮、无水乙醇、苯、吡啶、甲醇-苯（15:85）、乙醇-氯仿（1:10）等；常用的滴定剂有甲醇钾（钠）的甲醇（或乙醇）溶液、氢氧化四丁基铵的氯苯溶液等；常用的指示剂为麝香草酚蓝等，也可用玻璃-甘汞电极系统，以电位法指示终点。如巴比妥、司可巴比妥以及戊巴比妥的非水溶液的含量测定。（P275-286）,.,43,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,（四）紫外分光光度法 巴比妥类药物在酸性介质中几乎不电离，无明显的紫外吸收。但在碱性介质中电离为具有紫外吸收特征的结构，因而可采用紫外分光光度法测定其含量。本法灵敏度高，专属性强，广泛应用于巴比妥类药物的原料及其制剂的含量测定，以及固体制剂的溶出度和含量均匀度检查，也常用于体内巴比妥类药物的检测。,.,44,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,药名,max(nm),E,巴比妥,240,538,苯巴比妥,253,320,戊巴比妥,240,310,异戊巴比妥,238,440,司可巴比妥,240,330,硫喷妥,305,930,NaOH,溶液,(0.1mol/L),溶剂,pH9.4,硼酸盐缓冲液,pH9.4,硼酸盐缓冲液,.,45,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,1.直接测定的紫外分光光度法 本法是将供试品溶解后，根据溶液的pH，在最大吸收波长（max）处，直接测定对照品溶液和供试品溶液的吸收度，再计算药物的含量。单组分定量的方法：1）.吸收系数法（绝对法）,.,46,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,2）.标准曲线法 3）.对照法,.,47,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,2.提取分离后的紫外分光光度法 提取分离的主要目的是消除干扰物质对测定的影响。根据巴比妥类药物具有弱酸性，在氯仿等有机溶剂中易溶，而其钠盐在水中易溶的特点。如测定苯巴比妥含量：巴比妥类药物适量，加水使其溶解后，加酸酸化，用三氯甲烷提取巴比妥类药物，三氯甲烷提取液加入pH7.27.5的缓冲液，振摇，分离弃去水相缓冲液层，再用氢氧化钠自三氯甲烷中提取巴比妥类药物，调节碱提取液的pH值，然后选用相应的吸收波长进行测定。,.,48,第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,（五）高效液相色谱法 如苯巴比妥片的含量分析 色谱条件：ODS柱；流动相：乙腈-水（30：70）检测波长：220nm 理论塔板数按苯巴比妥峰计算不得低于2000，苯巴比妥与相邻色谱峰的分离度应符合要求。,.,49,