4780.ELISA法检测水产品中氯霉素的残留量 开题报告.doc

职业技术学院毕业论文（设计）开题报告论文题目ELISA法检测水产品中氯霉素的残留量系 部 应 用 工 程 系 专业班级 生物技术及应用0701 学生姓名 学 号 指导教师 二九 年 十一 月毕业设计（论文）开题报告表论文题目ELISA法检测水产品中氯霉素的残留量所在专业生物技术及应用0701指导教师 学生姓名学 号一、研究背景氯霉素(Chloramphenicol，简称CAP)，又称氯胺苯醇，是一种广谱抗生素1。由于其价廉及优良的抗菌性、稳定的药性，曾在一段时间内作为饲料添加剂和细菌性疾病的治疗用药，特别是在水产品中，使用范围较广2。但氯霉素对骨髓造血机能有抑制作用，可引起血小板减少性紫癜、粒细胞缺乏症、再生障碍性贫血，腹胀、腹泻、食欲减退，口腔粘膜充血、疼痛、糜烂、口角炎和舌炎等。另外还可引起视神经炎、视力障碍、多发性神经炎、神经性耳聋以及严重失眠。因此，动物源性食品中氯霉素的残留受到世界各国和地区的高度重视。欧盟、美国、加拿大等国家禁止在食用动物中使用氯霉素，欧盟规定进口食品中氯霉素不得检出，方法检出限要求为0.3ug/kg3。目前公布的氯霉素检测技术方法有微生物法、放射免疫法、气相色谱法(GC)、液相色谱法(HPLC)、质谱分析等4，这些方法各有优劣。酶联免疫法(ELISA)具有特异性强、灵敏度高，样品预处理简单等优点，且不需要复杂的仪器设备，能在短短的几小时内检测几十个到上百个样品，非常适合大批量样品的检测工作5。酶联免疫吸附试验，是酶免疫测定技术中应用最广的技术。由于ELISA法具有快速、敏感、易于标准化等优点，使其得到迅速的发展和广泛的应用。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面6，使酶标记的抗原抗体在固相表面进行反应，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。二、主要研究的目的及内容主要介绍了免疫测定技术中应用最广泛的酶联免疫吸附试验方法（ELISA法）在水产品氯霉素残留量检测中的应用。介绍了ELISA法的测定原理，氯霉素的基本性质和它对人体的危害性。本文实验部分详细介绍了ELISA法检测4个水产样品中氯霉素残留量的方法，包括样品的预处理和酶联免疫测定的上板步骤。试验结果表明，4个水产样品（花莲，鲈鱼，甲鱼，南美白对虾）中氯霉素含量依次为0.011、0.011、0.014、0.009ug/kg，均低于国标限量值0.3ug/kg，符合动物源性食品出口欧盟和美国等国家的要求，可以进入市场。三、研究方法及措施酶联免疫吸附试验法（简称ELISA法），测定的基础是竟争性酶联免疫抗原抗体反应，所有的免疫反应都在微孔中进行。研究采用酶联免疫吸附试验法对4个水产样品氯霉素的残留量进行检测，判断其是否符合国标限量要求，以便为其进入市场提供监测依据。试验主要利用溶剂萃取技术对4个水产样品进行预处理，再利用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)测定样品中残留氯霉素含量。四、研究进度计划表完成日期范围 完成工作内容2009.10.20-2009.11.10 了解氯霉素残留测定的各种方法2009.11.11-2009.11.30 查找文献，确立实验方案2009.12.01-2009.12.31 采购实验材料，进行论文实验2010.01.01-2010.01.30 整理实验数据，参考文献，拟定论文大纲2010.02.01-2010.04.30 论文撰写，初步完成初稿2010.05.01-2010.05.31 对论文多次修改，直到定稿2010.06.01-2010.06.04 论文答辩五、 参考文献1田素娟,董斌,袁茵等.氯霉素竞争ELISA检测方法的研究J.中国预防兽医学报,2009,31(7):545-548.2张胜帮,董士华,刘继东等.酶联免疫检测法测定水产品中残留氯霉素的研究J.中国食品学报,2006,8(2):41-43.3GB/T22338-2008,动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定S.4黄冬梅,蔡友琼,毕士川等.酶联免疫(ELISA)法测定水产品中氯霉素残留量J.福建水产,2004,12(4):20-23.5陈国志.酶联免疫法检测食品中氯霉素J.中国热带医学,2004,4(2):4-6.6,张晓辉.酶联免疫吸附试验(ELISA)在水产品药物残留检测中存在的问题及对策J.河北渔业,2007,34(5):972-973.指导教师签字： 2009年11月18日