豚鼠肺炎链球菌病感染和发病观察.doc

钰1)韦永芳2)张(1) 广东省实验动物监测所, 广州 510260; 2) 广州医学院实验动物中心)摘 要 报导肺炎链球菌在 1 个豚鼠封闭群中的感染, 并从临床、 病理剖检、 病原及发病特征等进行了较详细的观察。 发病豚鼠群在观察期内死亡 8616% , 死亡豚鼠中雌性豚鼠占4811% , 且死亡豚鼠表现明显的颌下淋巴结肿大化脓, 占 3018% 。从病豚鼠的颌下淋巴结及 肺病灶中均检出肺炎链球菌, 用该菌对小鼠和豚鼠进行致病力试验, 实现了急性感染, 受感 染动物出现了与自然病例相似的临床及病理特征, 从受感染动物和自然发病豚鼠的肺组织 中分离的致病菌都符合肺炎链球菌的病原学特征。 还讨论了肺炎链球菌对豚鼠不显性感染 的临床表现, 以及对豚鼠的肺炎链球菌感染的监控问题。关键词 肺炎链球菌, 豚鼠, 感染分类号 R 378112肺炎链球菌 (S t rep tococcu s p n eum on ia e) 是一类革兰氏阳性球菌, 它为人畜共患致病, 是实验动物和人的肺类及生殖道细菌感染的致病菌之一。健康人的带菌率高, 通常菌1呈不显性感染2 , 豚鼠、大鼠的敏感性高3 。本文报道了某单位一群感染肺类双球菌的豚鼠(C a v ia p orce l lu s) ,其临床症状表现为颌下淋巴结肿大、 妊娠母鼠流产、 出现死胎或畸胎, 并从病理剖检及病原分离鉴定、 致病力试验方面进行了详细观察。流行情况某单位从 1994 年 10 月引进 60 只种豚鼠, 其中 50 只母鼠, 10 只公鼠, 至 1995 年 8月淘汰和死亡的豚鼠共有 52 只, 占引进豚鼠的 8616% 。 详细情况见表 1。1表 1豚鼠发病和死亡情况每月母鼠死亡数颌下淋巴结明显肿大妊娠和产后母鼠死亡总数项目2 月份4 月份7 月份豚鼠数量比例16252810165225522528521052从 上表可以看出豚鼠出现淋巴结肿大, 占死亡豚鼠的3 0 18 % , 母鼠死亡率较高, 占收稿日期: 1996211201病理剖检对 4 只颌下淋巴结明显肿大的病豚鼠和 6 只死亡母豚鼠进行病理剖检, 其中 4 只病 豚鼠可见单侧或两侧颌下淋巴结肿大, 以单侧多见, 肿体直径 10 40mm , 并形成结缔组 织包膜, 与周围组织分离, 切开包膜, 流出乳白色脓汁, 其他部位淋巴结未见异常, 病 豚鼠肺部灰白色, 质地柔软, 表面有出血斑; 而 6 只死亡的妊娠母豚鼠和产后母豚鼠中 有 3 只母豚鼠出现颌下淋巴结明显肿大, 死亡母豚鼠肺部被膜紧张, 表面有出血点, 并 附有纤维素性渗出物, 切面流出大量泡沫状渗出液, 肺部出现肝样病变, 还有 1 只妊娠 母豚鼠肝脏出现脂肪变性, 其他脏器未见明显的病变。3切片镜检取 1 只病豚鼠的肺、 肝、 脾及肾进行病理切片和镜检, 肺表现淤血水肿、 出血, 出 现间质性肺类, 脾轻度充血, 肝肾轻度水肿。5 细菌学诊断对 4 只病豚鼠的病灶组织进行细菌学鉴定。(1) 涂片镜检: 病变组织 (颌下淋巴结、 肺组织) 直接涂片, 进行革兰氏染色和镜 检, 可见革兰氏阳性双球菌, 成双排列, 钝头相对, 尖头相背, 呈矛头状, 姬姆萨染色, 可见有荚膜的双球菌。(2) 培养性状: 将无菌采取的病变组织 (颌下淋巴结、 肺组织) 接种绵羊鲜血培养 基, 37培养 24 h , 可见细小、扁平、透明及有光泽的菌落, 菌落大小为 1 mm 左右, 中 心与边缘隆起, 呈现二层环状, 菌落周围可见绿色溶血环, 将细菌接种普通营养琼脂, 未 见细菌生长, 接种葡萄糖肉汤培养基, 培养 18 h , 肉汤变浑浊, 管底有少量沉淀, 培养36 h , 肉汤变清亮, 将所分离的培养物进行革兰氏染色和镜检, 仍可见成双排列的革兰氏 阳性细菌。4(3) 生化反应:见表 2。表 2致病细菌的生化反应项目触酶葡萄糖蔗糖乳糖麦芽糖蕈糖木糖卫矛醇 10% 去氧胆酸钠O p to ch in反应溶解敏感大于 5 mm-+-用上述鉴定过的肺类链球菌 24 h 葡萄糖肉汤培养液分别对普通级 KM 小鼠和豚鼠进行致病力试验。第 1 组 KM小鼠 4 只,18 20 g ,雌雄各半, 每只腹腔接种培养液 015mL , 对照 KM 小鼠 2 只, 雌雄各半, 用生理盐水代替培养液; 第 2 组豚鼠 4 只, 250 g 左右, 雌雄各半, 每只接种培养液 110 mL , 对照豚鼠 2 只, 雌雄各半, 用生理盐水代替培 养液。试验组 KM 小鼠在接种 24 h 后出现死亡, 剖检可见肺出血, 腹膜出血, 腹腔液增多,对照组表现正常, 将试验组 KM 小鼠的腹腔液接种绵羊鲜血琼脂培养基, 均能检出与原 来相同的细菌。试验组豚鼠在接种 24 h 后全部死亡。死前豚鼠呼吸急促,剖检时, 可见肺出血, 腹腔出血, 腹腔液和胸腔液增多, 从心血及腹腔液中分离到与原来相同 的细菌, 对照组豚鼠表现正常。通过上述动物致病力试验, 断定所分离的肺类链球菌对小鼠敏感,性死亡。 试验组豚鼠的病变与自然发病豚鼠的病症相似。引起小鼠 24 h 急结果与讨论通过对病豚鼠病变组织的细菌学诊断以及动物实验, 初步断定该豚鼠群感染了严重 的肺类链球菌病, 并且该菌是导致豚鼠群致病死亡的原因。 在其它一些豚鼠肺炎链球菌 病中未见颌下淋巴结肿大的报道3, 4 , 本文报道的致病豚鼠群颌下淋巴结肿大占病死豚鼠 的 30% 以上, 这说明颌下淋巴肿大也是该病的临床症状之一。至于在动物试验中没有观 察到感染豚鼠出现淋巴结肿大, 这可能与我们的试验中接种部位、感染途径、感染剂量、 感染致病时间太短 (急性感染) 有关。豚鼠对肺炎链球菌病的敏感性高, 肺炎链球菌能引起豚鼠出现肺炎、 心外膜炎、 胸 膜炎和败血症等病变, 一般呈不显性感染, 但在气温突然变化、 垫料潮湿、 妊娠、 运输 和营养障碍等因素的影响下, 将可能导致肺炎链球菌病的发生。 该实验动物中心的这批豚鼠来源于外省区, 原准备引进作为繁殖种群, 但在引种 2 个月后就开始出现颌下淋巴 结肿大和妊娠豚鼠流产或死亡等现象, 这可能是这批豚鼠在引进之前就已感染肺炎链球 菌, 在运输过程中受到一些应激, 并且又是在气温较高的季节配种, 这样就造成豚鼠, 特 别是成年的怀孕母豚鼠发病率和死亡率增高, 也有可能是引进后管理问题造成感染所致。 因此, 在引进种鼠时, 应严格进行检疫, 减少外界的应激, 避免在气温高的季节配种繁 殖, 同时, 也要严格管理和加强监测, 防止大的感染。患病豚鼠颌下淋巴结有时出现自行化脓和溃烂, 排于外界环境中, 并感染其他健康 豚鼠, 造成整群感染, 因此, 如果发现豚鼠颌下淋巴结出现红肿等症状, 应及时淘汰, 必 要时可采用药物治疗或疫苗进行免疫。71977. 174 17612B ux to n A , F ra se r G. D ip lococcu s p neum on iae, A n im a l M ic ro b io lo gy,L und E , H en r ich sen J. L abo ra to ry d iagno sis se ro lo gy and ep idem io lo gy o f S t rep tococcu s p neum o2n iae. In: M e tho d s in m ic ro b io lo gy, 1978. 241 262Sa ito M , M u to T , H a ruzo no S. A n ep izoo t ic o f p neum o co cca l infee t io n o ccu r red in inb red gu inea31983, 32: 29 37-p ig co lo b ie s. E xp A n im ,J G 福克斯 (萧佩衡等译). 实验动物医学, 豚鼠的生物学和疾病. 北京: 农业出版社, 1991.200 218王永坤主编. 实验动物微生物监测, 肺炎双球菌. 北京: 农业出版社, 1992. 40 44R E 布坎南, N E 吉本斯, 等. 伯杰细菌鉴定手册 (第八版) , 肺炎链球菌. 北京: 科学出版社,1984. 688 689456In fec t io n an d D iseae o f S t rep tococcu s p n eum on ia ein C a v ia p o rce l lu sZ h u a n g Y u W e i Y u ang h u ongKeywords S t rep tococcu s p neum on iae, C av ia p orce l lu s, infec t io n