真菌诊断进展北京协和医院 王辉.ppt
真菌诊断进展,北京协和医院细菌室 王 辉 徐英春 陈民钧,曲霉菌半乳甘露聚糖（GM）,曲霉菌细胞壁上一种多聚糖抗原可以从血清、脑脊、胸水、BALF检测到方法：ELISA（BioRad）：敏感性高 1ng/mlLatex agglutination：15ng/ml,拟青霉,甘露蛋白,过氧化物酶,欧、美标准有争议,判定标准的进化,阳性预值,合适的判定折点：1.0,0.7,0.5?在儿童的应用价值？食物中的GM可以被吸收，假阳性？哌拉西林/他唑巴坦治疗，假阳性？非血液病患者应用不多抗真菌治疗对结果的影响？,半乳甘露聚糖(GM)检测存在的问题,自体移植,骨髓增生异常,血友病,胸部,早期多形式治疗,早期胸部CT,逐渐升高,酵母菌、丝状真菌细胞壁成分不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属不能检测：隐球菌和接合菌美国FDA已批准，欧洲部分国家已注册敏感性、特异性：90左右,D葡聚糖的价值,美国大多数研究限于念珠菌菌血症其他真菌感染（侵袭性曲霉菌病）的研究资料少假阳性：血液透析；接受血制品治疗（免疫球蛋白）抗生素对结果的影响？,D葡聚糖的价值,两种试验敏感性、特异性相当都可以在早期诊断侵袭性曲霉病，但是D葡聚糖可能出现更早两者结合，可以互补弥补GM假阴性可能同样在粒细胞缺乏患者用的多，其他患者有待研究,半乳甘露聚糖(GM)与D葡聚糖的比较,PCR方法,核酸PCR鉴定：处于研究阶段，自制靶位点：大多数研究采用18s RNA基因更深入的研究，以及与抗原法的比对,氟康唑念珠菌的药敏,折点适合粘膜感染、侵袭性念珠菌感染重申：SDD只要采用高剂量，疗效接近SSDD的成功率高于R菌株,真菌感染的诊断,直接涂片真菌培养组织病理真菌培养是“金标准”,真菌直接涂片的诊断价值,诊断阳性率高BALF培养阳性率40，涂片64，涂片培养67(Ann Intern Med 1997,29:535;Respir Med 1992,86:243)快速:2-4hr可以报告结果有助于鉴别感染类型有隔菌丝：曲霉菌属唑类抗真菌药（伊曲康唑、伏立康唑）有效无隔菌丝：毛霉目（根毛霉属、根霉属、毛霉属、犁头霉属、小克银汉霉属）两性霉素B敏感,The lancet,2003,3:230-240,真菌直接涂片的诊断价值,肺毛霉菌病：真菌培养的阳性率不高怕“冷”组织匀浆可能会破坏毛霉菌，“假阴性”有时，直接涂片是唯一诊断手段诊断肺毛霉菌病的治疗价值首选肺叶切除次选两性霉素B（唑类抗真菌药无效）卡氏肺孢子菌：无法体外培养,The lancet,2003,3:230-240,气道分泌物中分离出念珠菌的意义,人类口腔正常定植菌，正常人2055痰中可以分离出念珠菌属念珠菌肺炎少见发病率大约0.234.525例ICU患者的尸体解剖研究：10例（40）念珠菌培养阳性，只有2例（8）是真正的念珠菌肺炎,El-Ebiary M.Am J Respir Crit Care Med 1997,156:583-590,定量培养对念珠菌肺炎的诊断价值,28例非粒细胞缺乏患者纤支镜保护性毛刷（PSB）以103cfu/ml作为阳性判定标准24例（85.7）PSB念珠菌103cfu/ml没有一例是真正的念珠菌肺炎,Rello J.Chest 1998,114:146-149,限制气道分泌物酵母菌报告的影响,美国Ilinois大学微生物室 2001年11月前，把呼吸道标本分离出的所有“酵母菌”都报告给临床医生2001年11月后仅报告隐球菌和丝状真菌病人的住院时间、花费、不必要的抗真菌治疗有显著下降（p0.05）病人的住院病死率不但没有增加，反而有所下降（从18.7%降到14.3%，p=0.37）,Barenfanger J.J Clin Microbiology 2003,41(12)：5645-5649,气道分泌物中分离出曲霉菌的意义,免疫功能正常：定植76例曲霉菌培养阳性非粒细胞缺乏患者48例定植，19例曲霉菌球，慢性坏死性肺曲霉菌病7例，2例曲霉菌支气管炎，无一例急性侵袭性曲霉菌肺炎粒细胞缺乏/白血病：阳性预测值8090中低危患者：广谱抗生素治疗、营养不良、肾移植、HIV感染者、实体器官移植、长期糖皮质激素治疗：阳性预测值1030结合胸部影象学、血清抗原检测，以及气道分泌物直接镜检,Perfect JR.Clin Infect Dis 2001,33:1824-1833,
