44 饲料中粗脂肪的测定.ppt
4.4 饲料中粗脂肪的测定,索氏提取法,江西农业大学动物科技学院,2/1/2023,前言,脂类（lipid）亦译为脂质，是一类不溶于水而能溶于非极性溶剂的生物有机分子。其化学本质是脂肪酸和醇所形成的酯类及其衍生物。脂类的元素组成主要是C H O,有些尚含N S P。,2/1/2023,前言,按化学组成分类:单纯脂类 脂肪（fat）:甘油三酯（三酰甘油)蜡（是长链脂肪酸和长链一元醇或固醇形成的酯）复合脂类 磷脂（含磷酸和含氮碱）糖脂（含糖）硫脂（含硫酸）衍生脂类（类脂）：由单纯脂类或复合脂类衍生而来或与它们关系密切。萜类：天然色素、香精油、天然橡胶 固醇类：固醇（甾醇、性激素、肾上腺皮质激素）其他类脂：维生素A、D、E、K等。,2/1/2023,前言,粗脂肪（Crude fat 或ether extract，EE）饲料中可以溶于脂溶性溶剂（乙醚、石油醚、氯仿等）的物质总称，除包括脂肪外，还包括可溶于乙醚的其它有机物质，如游离脂肪酸、有机酸、腊质、固醇类、脂溶性维生素、色素等，故称为粗脂肪或乙醚提取物。同时，样品中结合状态的脂类（主要是脂蛋白）不能直接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法。测定方法：油重法、残余法、水解法。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,1适用范围 适用于多种单一饲料、混合饲料、浓缩饲料和配合饲料的分析。2原理 索氏（Soxhlet）脂肪提取器中用乙醚反复浸提饲料样品，使其中脂类物质溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收，直接称量盛醚瓶中的脂类物质重，即可计算出饲料样品中的粗脂肪含量。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,2原理 它是利用溶剂的回流和虹吸原理，对固体混合物中所需成分进行连续提取。当抽提管中回流下的溶剂的液面超过索氏提取器的虹吸管时，抽提管中的溶剂流回圆底烧瓶内，即发生虹吸。随温度升高，再次回流开始，每次虹吸前，固体物质都能被纯的热溶剂所萃取,溶剂反复利用，缩短了提取时间，所以萃取效率较高。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,3.试剂 无水乙醚或石油醚（分析纯）4.仪器设备,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,4测定步骤（1）索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在1052烘箱(4.5)中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。（2）称取试样15g(准确至0.0002g)，于滤纸筒中，或用滤纸包好并标号，放入105烘箱中，烘干120min（或称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度（？），滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,4测定步骤（3）用长镊子将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60100mL（抽提瓶容积的2/3），在6075的水浴(用蒸馏水)上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次(含油高的试样约70次)或用滤纸点滴检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。（4）取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入1052烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.001g为恒重。抽提瓶增加的重量即为粗脂肪重量。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,5测定结果的计算计算见下式：粗脂肪()(m2m1)m100式中：m 风干试样重量，g；m1已恒重的抽提瓶重量，g；m2已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。6重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量在10以上(含10)允许相对偏差为3。粗脂肪含量在10以下时，允许相对偏差为5。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,操作中应注意的问题：测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。（为什么，大家想想！）这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。脱水处理！试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。适宜的样品粉碎粒度！,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,操作中应注意的问题：将称好的样品转移到定性滤纸上打包，并用脱脂棉线扎紧。扎包 在包好样品的定性滤纸外面，用铅笔标记样品号。记号 不要用油笔或钢笔等标记，以免被乙醚冲洗掉。滤纸包放入抽提管中时，不能超过虹吸管上端。抽出的油应是清亮的。否则应重做。,2/1/2023,一、油重法测粗脂肪含量,操作中应注意的问题：取出滤纸包放入相应铝盒中，在室温通风口处使乙醚挥发，不要立即放入(1052)烘箱中烘干，否则会引起燃烧。必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存在或用明火加热，保持室内良好通风！否则,2/1/2023,二、残余法测粗脂肪含量,1原理 用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，来计算粗脂肪含量。2步骤 按油重法（1）、（2）、（3）操作。当脂肪浸提干净后取出小包，置于干净表面皿上凉干2030min，然后装入同号码称量瓶中，置1052烘箱内烘至恒重。,需要称量抽提瓶重量吗？,2/1/2023,二、残余法测粗脂肪含量,3计算粗脂肪()(m2m1)m100式中：m1为装有试样滤包或筒浸提前烘干后质量，g；m2为装有试样滤包或筒浸提烘干后质量，g；m为试样质量。问题讨论：1、样品中脂肪抽提干净的判断。2、为什么粗脂肪测定时要对样进行品烘干,2/1/2023,脂肪测定仪,2/1/2023,
