多糖分离纯化及含量测定课件.ppt
多糖分离纯化及含量测定,服从真理,就能征服一切事物,多糖的提取方法1.溶剂提取法水提醇沉法、酸提法、碱提法、超临界流体萃取法2.酶解提取法单一酶解法、复合酶解法3.强化提取法超声波辅助提取法、微波辅助提取法、高压脉冲法,1.溶剂法:水提醇沉法多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗漉,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70%左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置一定的时间,多糖的质量分数和得率均较高。,影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。该种方法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。,溶剂法:酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH值下难以溶解;含有胺基的多糖可使用乙酸或盐酸调节提取液成酸性进行提取,然后再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。,影响多糖提取率的因素有:水的用量、pH值、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。因此酸提法也存在一定的不足之处,溶剂法:碱提法有的酸性多糖,或分子量较大的多糖,在热水中溶解度不大,一般在稀碱溶液中溶解度较大,所以常用稀的NaOH溶液或Na2CO3溶液提取。不过用稀碱溶液提取时,提取温度必须保持在10以下,否则多糖容易发生降解反应。多糖在碱性溶液中稳定,例如粘多糖的提取多采用碱提取法。,多糖碱法提取虽然可提高多糖的收率,且可缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质如蛋白质,粘度过大,过滤困难,且有些多糖在碱性较强时会水解。通常先用热水法提取,然后残渣再用稀碱溶液提取,这样可将大部分多种类型的多糖提取出来,溶剂法:超临界流体萃取法超临界流体是指物质处于临界温度和临界压力以上时的状态,这种流体兼有液体和气体的特点,即密度大,粘稠度小,有极高的溶解,渗透到提取材料的基质中,发挥非常有效的萃取功能。而且这种溶解能力随着压力的升高而增大,提取结束后,再通过减压将其释放出来具有保持有效成分的活性和无溶剂残留等优点。,超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术。由于CO2的超临界条件(Tc=31.26,Tp=738MPa)容易达到,常作为超临界萃取的溶剂,在压力为840MPa时的超临界CO2足以溶解任何非极性、中极性化合物,在加入夹带剂后则可溶解极性化物。,由于糖类的化合物分子量较大、羟基多、极性大,用纯二氧化碳提取产率较低,加入夹带剂或加大压力则可提高提取率。该法的缺点是设备复杂,运行成本高,提取范围有限。,6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。斯宾诺莎7、自知之明是最难得的知识。西班牙8、勇气通往天堂,怯懦通往地狱。塞内加9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。赫尔普斯10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。笛卡儿,Thank you,拯畏怖汾关炉烹霉躲渠早膘岸缅兰辆坐蔬光膊列板哮瞥疹傻俘源拯割宜跟三叉神经痛-治疗三叉神经痛-治疗,