药物分析全书精要总结-药物分析全书精要总结.docx

全书总结药物分析总结1，新修本草，这是世界上最早的一部药典。2，国家药品（质量）标准：是国家对药品质量规格及检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应(经营）、使用、检验和行政、技术监督管理部门共同遵循的法定技术依据。是强制性的法定计术标准。3，药典（Pharmacopeia ）：国家关于药品质量标准的法典。4，5，2005年版主要内容一部：中药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂二部：化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品三部：生物制品（中国生物制品规程）6，其他重要规定·水浴温度： 除另有规定外，均指 98100 ·室温： 1030 ·冰浴： 0 ·放冷：指放冷至室温·阴凉处：不超过 20 ·凉暗处：避光并不超过 20 ·1 10 ：固体溶质1.0g或液体溶质1.0ml加溶剂使成10ml的溶液。·溶液的滴： 20 时，1.0ml水相当于20滴·恒重：供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下。 ·精密称定：称取重量应准确至所取重量千分之一。·称定：称取重量应准确至所取重量的百分之一。·约：指取用量不得超过规定量的±10%·标准品&对照品：用于鉴别、检查和含量测定的标准物质，指定单位制备、标定、供应。 标准品指用于生物检定、抗生素或生化药品含量或效价测定的标准物质，一般按效价单位计。 对照品一般指化学药品，按百分含量计。空白试验： 不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果。7，Solubility极易溶解 系指溶质1g（ml）能在溶剂不到 1ml中溶解；易溶 系指溶质1g（ml）能在溶剂1不到“10ml中溶解；溶解 系指溶质1g（ml）能在溶剂10不到30ml中溶解；略溶 系指溶质1g（ml）能在溶剂30不到100ml中溶解；微溶 系指溶质1g（ml）能在溶剂100不到1000ml中溶解；极微溶解 系指溶质1g（ml）能在溶剂1000不到10000ml中溶解；几乎不溶或不溶 系指溶质 1g（ml）在溶剂 10000ml中不能完全溶解。8，空白试验不出现正反应® 试剂等不干扰鉴别试验对照试验呈正反应® 试验条件正常9，药物的杂质检查一、 药物的杂质和纯度的概念1，杂质（Impurity，Related Substances，Product-Related Impurity ） 药物中存在的无治疗作用、或影响药物的疗效和稳定性、甚至对人体健康有害的物质。2，纯度（Purity） 药物的纯净程度。它是判定药品质量优劣的一个重要指标。对药物纯度的要求是随着生产工艺的改进、变化以及分离分析技术的发展而不断提高、完善的。3，药品质量标准中的杂质不包括变更生产工艺或变更原辅料而产生的新的杂质，也不包括参入或污染的外来物质。二、 药物中杂质的来源和分类1.杂质的主要来源 （1）生产过程中引入 原料药生产（合成：未反应完的原料、反应的中间体、副产物、残留溶剂；提取：药物结构、性质相近的物质、残留溶剂） 制剂生产*注意：生产设备也可能引入杂质（2）贮藏过程中引入：受外界条件影响（温度、湿度、光线、空气、微生物）而发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等变化2.杂质的分类（1）按杂质来源：一般杂质和特殊杂质。 一般杂质：指在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。 特殊杂质：指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。（2）按杂质结构：无机杂质和有机杂质。（3）按杂质性质：信号杂质和有害杂质。三、杂质的限量检查1杂质限量的概念 在不影响药物疗效和不发生毒性的前提下，药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几（）或百万分之几（ppm）来表示。药物中杂质的检查，一般也不要求测定其含量，而只检查杂质的量是否超出限量杂质限量检查（Limit Test)2、杂质限量的计算3、一般杂质的检查方法（参考课件）42氯化物检查法 标准液：NaCl标准液 硫酸盐检查法 标准硫酸钾溶液铁盐检查法 盐酸酸性溶液、标准铁溶液：硫酸铁铵FeNH4(SO4)2·12H2O重金属检查法 标准铅溶液：硝酸铅、硫代乙酰胺法、炽灼破坏法、硫化钠法、微孔滤膜法砷盐检查法 标准砷溶液：三氧化二砷方法：第一法(古蔡氏法)、第二法(二乙基二硫代氨基甲酸银法 ；Ag-DDC法)古蔡法 （Gutzeit）：加 KI 和 SnCl2目的：© 还原 As5+；© 抑制SbH3生成；© 形成锌锡齐， 使氢气的生成连续均匀。醋酸铅棉花：吸收H2S酸碱度检查法溶液颜色检查法 第一法：目视比色法:标准比色液进行比较的方法第二法：分光光度法:规定波长处吸收度值第三法：色差计法 易炭化物检查法澄清度检查法 与浊度标准液比浊的进行检查 炽灼残渣检查法 目的:控制有机药物和挥发性无机药物中存在的非挥发性无机杂质。干燥失重测定法 概念:药品在规定条件下,经干燥后所减失的量,以百分率表示；热分析法残留溶剂测定法4，特殊杂质的检查方法原理: 利用药物和杂质在物理和化学性质上的差异10，巴比妥类药物的分析环状结构不开环水解开环碱液酸、氧化剂、还原剂 有本类药物的结构知其具有：弱酸性（1，3位等）、水解反应（碱）、与重金属离子的反应（含有丙二酰脲或酰亚胺结构；与银盐的反应可用于本类药物的鉴别和含量测定）、与香草醛（Vanillin）的反应（丙二酰脲基团中氢比较活泼）、紫外吸收、色谱行为、晶型11，巴比妥类药物鉴别试验丙二酰脲类鉴别反应、测定熔点、利用特殊取代基或元素（利用不饱和取代基的鉴别试验；药典收载的有司可巴比妥钠与高锰酸钾反应，碱性溶液；利用芳环取代基的鉴别试验；硫元素的鉴别试验-区别硫代巴比妥类药物与巴比妥类药物，药典2005对注射用硫喷妥钠的鉴别采用了此法）12，巴比妥类药物（特殊）杂质检查（一） 苯巴比妥1） 酸度控制副产物苯基丙二酰脲量2） 溶液的澄清度控制乙醇不溶性杂质，副反应产物苯巴比妥酸杂质的含量（二） 司可巴比妥钠 溶液的澄清度：司可巴比妥钠极易溶于水，溶液应澄清，否则药物中含有水不溶性杂质13，巴比妥类药物含量测定 银量法（与银离子定量成盐）、溴量法（不饱和键） 14，芳酸及其酯类药物的分析14-1 结构性质 重点：阿司匹林（aspirin）14-2 鉴别试验 1）与铁盐的反应 紫色配合物1-1）水杨酸及其盐6+ 4 FeCl3 + 12 HCl1-2）氯贝丁酯 生成羟肟酸铁配位化合物；该反应多用于羧酸及其酯类的鉴别NH2OH×HClKOHH+Fe3+氯贝丁酯3） 重氮化-偶合反应具有芳伯氨基（或潜在；贝诺酯），加酸水解后产生游离的芳伯胺基，在酸性溶液中，与亚硝酸钠试液进行重氮化反应，生成重氮盐，再与碱性-萘酚偶合生成橘红色沉淀。4)水解反应14-3特殊杂质检查1-1）阿司匹林中特殊杂质检查可能杂质：合成过程中：未反应完的酚类，生成的副产物苯酚、醋酸苯酯、水杨酸苯酯、乙酰水杨酸苯酯，乙酰化不全产生的水杨酸；等贮藏中阿司匹林水解产生的水杨酸1-2）检查a.溶液的澄清度 阿司匹林溶于碳酸钠溶液，杂质不溶b.游离水杨酸 水杨酸氧化生成的一系列醌类有色杂质对人体有害；水杨酸可在弱酸性溶液中与高铁盐反应而成紫堇色，而阿斯匹林（无游离酚羟基）不发生该反应。c.易碳化物 检查易被硫酸碳化显色的低分子有机杂质2-1）对氨基水杨酸钠中特殊杂质检查间氨基酚 2-2）检查方法2-2-1 双相滴定法 药典2005利用间氨基酚易溶于乙醚，而对氨基水杨酸钠不溶于乙醚的特性，用乙醚提取分离杂质后，乙醚提取液中加入适量水和指示剂，用盐酸滴定，以消耗一定量盐酸滴定液来控制其限量。该法为双相滴定法，所生成的盐酸盐在乙醚中不溶，而转溶入水相中。2-2-2 HPLC3-1）氯贝丁酯中特殊杂质检查 对氯酚14-4含量测定一、酸碱滴定法 直接滴定法、水解后剩余滴定法、两步滴定法二、亚硝酸钠滴定法 芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性水溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点。三、双相滴定法 四、高效液相色谱法15，胺类药物的分析芳胺类药物盐酸普鲁卡因注射液扑热息痛盐酸普鲁卡因胺因其分子结构中具有芳酰胺结构，可被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁形成配位化合物羟肟酸铁。 提取酸碱滴定法 本法是依据本类药物的盐酸盐或硫酸盐可溶于水，而药物本身为游离碱不溶于水，可以溶于有机溶剂的一般通性进行的。常用的方法是，将供试品溶于水或矿酸中，加入适量的碱性试剂使药物游离后，用适当的有机溶剂提取。提取液蒸干，残渣加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定；或在提取液中加过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴。（关键词：溶解性差异，碱化，提取，滴定）氨基醚衍生物类药物（盐酸苯海拉明和茶苯海明）15，杂环类药物的分析异烟肼(isoniazid)尼可刹米(nikethamide)§3. 苯骈二氮杂卓类药物（镇静剂） 地西泮（安定）(diazepam)酸性染料比色法酸性染料比色法是利用碱性药物，在一定的PH条件下，可与某些酸性染料结合显色，而进行分光光度法测定药物含量的方法。（P229）16，生物碱类药物的分析17，维生素类药物的分析VB1（水溶性）硝酸铅反应、氯化物反应VC（水溶性）维生素C（vitamin C），又称抗坏血酸，在化学结构上和糖类十分相似，有四种光学异构体（两个手性碳C4/C5），其中以L构型右旋体的生物活性最强。中国药典及美、英、日、等国药典收载的均为L-抗坏血酸（L-ascorbic acid）。 酸性：分子结构中二烯醇基，尤其是C3-OH，受共轭效应的影响，酸性较强（pK1=4.17）； C2-OH的酸性极弱（ pK2=11.57 ），故维生素C 一般表现为一元酸，能与碳酸氢钠作用生成钠盐。（注：如图，-不饱和酮结构，在电荷的分布上，表现为氧负-吸电子效应，1正，2负，3正，电荷正负交替，因此3位带正电荷，表现出强的吸电子性，故呈现酸性，2位反之） 还原性：分子结构中的二烯醇基具极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢维生素C ，加氢又可还原为维生素C 。在碱性或强酸性溶液中进一步水解为2,3-二酮古洛糖酸而失去活性（内酯环开环水解）。维生素C 与碳酸钠可生成单钠盐，与氢氧化钠作用，内酯环水解生成酮酸盐。鉴别试验 硝酸银反应、2，6-二氯靛酚钠反应-利用了VC的还原性含量测定-维生素C 具有较强的还原性碘量法2,6-二氯吲哚酚法 VA（水不溶） 维生素A1（视黄醇，retinol），中国药典收载的维生素A为全反式维生素A醋酸酯的精制植物油溶液。鉴别试验三氯化锑反应（Carr-Price反应）-维生素A 和亲电试剂氯化高锑（V）作用形成不稳定的正碳离子,显蓝色。反应在无水、无醇条件下进行。紫外吸收光谱薄层色谱VE（水不溶） 维生素E（vitamin E）：-生育酚（tocopherol）及其各种酯类。 中国药典收载的维生素E为消旋-生育酚醋酸酯（ dl tocopheryl），收载的制剂有粉剂、片剂、注射剂、胶丸。 维生素E（vitamin E）：苯并二氢吡喃(色满醇)衍生物, 苯环上有一个乙酰化的酚羟基结构决定性质：1）长的烷基链决定其水不溶性 2）苯环决定其紫外吸收性 3）乙酰化的酚羟基水解后体现出酚类易被氧化的性质鉴别试验硝酸反应 酸性水解再氧化 酚羟基三氯化铁反应 碱性水解再络合 酚羟基紫外光谱 0.01%无水乙醇液在波长284nm处有最大吸收, 在波长254nm处有最小吸收.薄层色谱法 薄层板: 硅胶G薄层板 展开剂: 环己烷-乙醚(4:1) 显色剂: 硫酸 结果: 生育酚、生育酚醋酸酯、生育醌的Rf值分别为0.5、0.7、0.9。HPLCIR杂质检查 酸度（制备过程中引入的游离醋酸）生育酚（乙酰化不完全） 中国药典采用硫酸铈滴定法检查维生素E中的游离生育酚，限量为2.15%。原理： 游离生育酚具强还原性，可被硫酸铈定量氧化，用消耗硫酸铈滴定液的体积控制游离生育酚的限量。显色剂：二苯胺（此反应可用于含量测定）正己烷（残留溶剂：GC-FID、HP-5、外标法）含量测定利用水解产物游离生育酚易被氧化的性质 铈量法将铁(III)还原为铁(II)后，与不同试剂生成配位化合物进行比色测定。硝酸氧化、邻苯二胺缩合测定荧光。高效液相色谱法 日本药局方 色谱柱：id 4mm，长1530cm的不锈钢柱。固定相：ODS流动相：甲醇-水（49:1）检测器：紫外检测波长：292nm分离度：应大于2.6(生育酚与其醋酸酯)精密度：峰高的相对标准偏差应小于0.8%(n=3)气相色谱法：简便快速、专属性强。各国药典多采用，适于VE尤其制剂测定。载气：氮气固定相：硅酮（OV-17）柱温：265°C检测器：FID18，甾体激素类药物（steroid hormone drugs）的分析 是指分子结构中含有甾体母核的激素类药物。分子结构中均具有环戊烷并多氢菲母核，是临床上较为重要的一类药物。环戊烷并多氢菲母核分类 肾上腺皮质激素（皮质酮的衍生物）皮质酮 雄性激素与蛋白同化激素 睾酮（睾丸素）衍生物 可供分析主要结构特征：A环的4-3-酮结构睾丸素 雌激素 孕激素鉴别试验与强酸的呈色反应 甾体母核反应 机理：4-3-酮 浓硫酸 质子化 正碳离子（共轭体系） 显色官能团的反应酮基的反应-羰基试剂C17-醇酮基的反应-醇酮基（还原性） 甲酮基或活泼亚甲基的反应-与羰基相连的碳上有活泼氢酚羟基的反应-酚羟基临位活泼易被取代氟元素的反应乙炔基的反应-端基炔的重金属反应测定衍生物熔点酯类的反应紫外分光光度法红外分光光度法：各国药典收载的甾体激素类药物，几乎都采用红外光谱作为鉴别方法之一。薄层色谱法高效液相色谱法-中国药典采用HPLC鉴别醋酸氟轻松软膏（字写得不对？氢？）等十余个品种。特殊杂质检查 其他甾体阅读材料pdf：甾体总结19，抗生素类药物的分析-内酰胺类抗生素氨基糖苷类抗生素（Aminoglycosides antibiotics）四环素类20，药品质量标准的制订（阅读）21，中药制剂分析概论（阅读）1）中药制剂分析特点 化学成分多而复杂 质量受多种因素影响 易吸潮、染菌、有效成分常不稳定 有效成分含量一般较低2）22氮测定法及其应用凯氏定氮法23，药物制剂分析 注意：做含量均匀度检查的药物，不再做重量差异检查注意：做溶出度/释放度检查，不再做崩解时限（？）ppt计算题（阅读）24，药物现代仪器分析法25，供试品前处理与测定方法效能指标（阅读）-对最后大题的思路有一些启示26，糖类及苷类药物的分析鉴别实验1） 灼烧实验2） Molish反应3） Fehling和Benedict 反应4） 三氮唑衍生物试验5） Barfoed 反应6） Saliwanoff 反应7） 比旋度法8） TLC法27，生化药物和基因工程药物分析简介（自己掌握）28，大题的想法（仅供参考）1） 第一种大题（即需选一种方法，但要深入）解决策略以通法为主，首先是分析方法的选择，需对几个特别通用的方法进行深入学习，举例：HPLC（可用于定量、定性、含量测定）所用的色谱柱首选通用柱十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）、硅胶、氨基硅胶三种。（老师出题一般不会超过常用范畴）。但一定需分清楚正相还是反相键合相色谱-反键合相色谱法采用非极性键合相为固定相，如十八烷基硅烷（应用最广泛）；氰基键合相（正相）是质子受体，对双键异构体或含双键数不同的环状化合物有较好的分离能力；氨基键合相（正相）上的氨基可与糖分子的羟基选择作用，在糖的分离中广泛应用。流动相中水相的pH应维持在28，否则会引起硅胶溶解。检测器首选可见-紫外检测器。定量方法可用归一化法或标准品对照法，但尽可能选用内标法 在反相键合相色谱中，由于固定相是非极性的，所以极性弱的溶剂洗脱能力强；例：以ODS为固定相的反相色谱中，甲醇的洗脱能力比水强。 对于结构鉴定，还是以结构决定性质进行分析，潜在的基团（如芳伯胺等）需认真对待，芳伯基的重氮化反应，肽键类似物的茚三酮反应，酰胺键/羧酸等的羟肟酸铁反应，红外，紫外，TLC，HPLC等等 对于杂质限量检查，还是以结构决定性质为主，杂质的来源有合成过程，仪器设备，制剂过程等等，然后进行结构的分析，除了化学方法外，TLC的高低浓度对照法，HPLC等通用方法需懂一些，以便不会20分大题空白。 如果是要做质量标准的制定，内容一定要了解。例如1， 名称2， 性状3， 鉴别4， 检查5， 含量测定6， 贮藏建议拿药典自己看看，大体内容及方法。2） 需要给出更多的方法，其实还是以通法为主，红外，紫外，TLC，HPLC，核磁，容量分析（原料药）,然后对结构进行分析，进行专有反应的选择。 仅供参考，大家加油,祝考好