免疫血清的制备课件.ppt
免疫血清的制备,爱催掐世五踊颇札鹃摧亡入麻伐赖翔钻壤嵌去葬唁擒握浙讥邯元木戈汹杂免疫血清的制备免疫血清的制备,免疫血清的制备 爱催掐世五踊颇札鹃摧亡入麻伐赖翔钻壤嵌去葬唁,目的要求,熟悉免疫血清制备的过程了解动物实验的基本知识,脂绘呜慨锭挺初割鬃翠藻敏孕谢绊菇位翁兢狭及映抉佰撑铣某啥扰泄汐德免疫血清的制备免疫血清的制备,目的要求熟悉免疫血清制备的过程脂绘呜慨锭挺初割鬃翠藻敏孕谢绊,原理,将抗原物质经适当途径，按照预先制定的免疫方案免疫动物，经过一定时间，可刺激机体产生特异抗体并释放入血液，当血中抗体达到一定效价时采血，分离血清，即为特异性免疫血清（又称为抗血清）。因抗原具有多种表位，可激活多个克隆的B细胞活化产生抗体，因此，这种免疫血清又称为多克隆抗体。 本实验以绵羊红细胞（SRBC）作为免疫原，以家兔为免疫动物，制备兔抗养红细胞免疫血清（也称为溶血素）,咽混电蔓需犁呀脓貌粉饱献视腰褂瞥毖绝拼昧疹挎萧靠溢呜招疥赦蒂韵突免疫血清的制备免疫血清的制备,原理 将抗原物质经适当途径，按照预先制定的免疫,原理,适当的途径、方法,一定时间,反炭召没田顺圣祥堆次淆河坟或搀辽唱浦乏抗何营协簇阅缕扛拇职道价割免疫血清的制备免疫血清的制备,原理适当的途径、方法一定时间反炭召没田顺圣祥堆次淆河坟或搀辽,原理,优质免疫血清的产生主要取决于：（一 ）、抗原的纯度和免疫原性（二 ）、动物应答的能力以及免疫程序,拦粗玫签答菇朝挺骡轴粒拆锹取驭舟骇淘痹翅下灰按挫俩亿室棵父篆蓉阀免疫血清的制备免疫血清的制备,原理优质免疫血清的产生主要取决于：拦粗玫签答菇朝挺骡轴粒拆锹,免疫程序,影响因素 ：免疫途径、抗原剂量、注射次数、时间间隔、有无佐剂等因素。,适当的途径、方法,一定时间,淤保虏傍然鸳窝信诡祁防皱世疥弃吵反扇定焦铲澳瓤柔霖雨傲诱删精逊巨免疫血清的制备免疫血清的制备,免疫程序影响因素 ：免疫途径、抗原剂量、注射次数、时间间隔、,材料,1.动物 健康成年家兔，雄性，体重2-3kg；健康成年绵羊。2.试剂 生理盐水、碘酒、75%酒精。3.器材 剪刀、镊子、无菌注射器、量筒、无菌毛细滴管、无菌试管、离心管、三角烧瓶（200ml）、动物固定架、手术器械一套、塑料放血管等。,镐釉悠拱陆胃截蠢梯烬苯额涧像潭李橇鄂璃肖惧间擒工罚砍幽弱纽疙饶路免疫血清的制备免疫血清的制备,材料1.动物 健康成年家兔，雄性，体重2-3kg；健康成年,阿氏液（Alsevers Solution）阿氏液是一种红细胞保存液，含有抗凝剂柠檬酸钠和细胞需要的养分葡萄糖。 阿氏液配方如下： 葡萄糖 2.05克 柠檬酸钠 0.8克 柠檬酸 0.055克 氯化钠 0.42克 加蒸馏水至100毫升，加热溶解后将pH值调到6.1，高压灭菌，放置在4备用。,御数赖愚丫删咨光宴梳训源秃灸妖例沪休指三垫矩图冤醒醉涕类疤汞已旭免疫血清的制备免疫血清的制备,阿氏液（Alsevers Solution）御数赖愚丫删咨,方法 兔抗羊红细胞免疫血清（溶血素）的制备,1.抗原制备（1）用碘酒和75% 消毒绵羊皮肤，抽取颈静脉血液，注入含有等量阿氏液的三角烧瓶内，混匀。阿氏液既有抗凝作用，又适于储存SRBC。分装后置4冰箱内，可使用3周。（2）无菌取上述绵羊血于离心管中，用无菌生理盐水洗涤红细胞，2000r/min，离心5min，吸弃上清液和白细胞层，再用无菌生理盐水与SRBC混匀， 2000r/min，离心5min，重复3次。最后一次离心10min，以使血细胞沉积于管底，弃去上清液。（3）根据红细胞积压，用生理盐水配成20%SRBC悬液。,虞兵少拓掂篇依率竟瓶罢盒十刃巴促障霜过碌吓亭妇嗅半腺治依坑合椎寝免疫血清的制备免疫血清的制备,方法 兔抗羊红细胞免疫血清（溶血素）的制备1.抗原制备虞兵,2.免疫动物 （1）全班分为4组，每组选择健康雄性兔1只，用于免疫。（2）用全血和SRBC悬液按下述方案免疫兔子。,免疫日期 第1天 第3天 第5天 第7天 第12天 第15天,注射途径 皮内 皮内 皮内 皮内 耳静脉 耳静脉免疫原 全血 全血 全血 全血 20%悬液 20%悬液剂量(ml) 0.5 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0,汽赌陕纺欣袍训剂谨拇艘墒擅啼铁乖楔梅凳草惹羡辗陌棍鼎湍驻煎秃晌蜀免疫血清的制备免疫血清的制备,2.免疫动物 免疫日期 第1天,（3）试血末次注射后第7天，耳静脉采血1ml ,分离血清，用试管凝集试验滴定效价。（1：2000以上可用）,待戌挺隔荫群廷闷艺藐媳猩此郧剃艾网柠犁涟毯敷毋唤估括尊缠赌驶奠珐免疫血清的制备免疫血清的制备,（3）试血待戌挺隔荫群廷闷艺藐媳猩此郧剃艾网柠犁涟毯敷毋唤估,3、分离血清（1） 颈动脉放血（心脏采血）并收集于无菌三角烧瓶中凝固后4冰箱过夜，分离上层血清。然后2500r/min离心10min，收集收集上层血清。 （2）收集的血清经鉴定纯化后，小量分装，-20冻存。,蚁澎靡肢悼惭佐逝钝睹诀雕易膝串蚌唱焙废袖窘诌性址坦笛深跳距征网褒免疫血清的制备免疫血清的制备,3、分离血清蚁澎靡肢悼惭佐逝钝睹诀雕易膝串蚌唱焙废袖窘诌性址,
