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    免疫球蛋白专业知识讲座培训课件.ppt

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    免疫球蛋白专业知识讲座培训课件.ppt

    免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白专业知识讲座,2,Ig可分为分泌型(sIg)和膜型(mIg)。前者主要存在于血清及其他体液(组织液和外分泌液)中,具有抗体的各种功能,后者分布在B细胞表面,是B细胞表面的抗原识别受体。 血清电泳时,Ig主要分布于区,所以习惯上称为球蛋白或丙种球蛋白。,免疫球蛋白专业知识讲座,2Ig可分为分泌型(sIg)和膜型(mIg)。前者主要存在,免疫球蛋白(Ig),B淋巴细胞,B淋巴细胞,浆细胞,膜型Ig(BCR),记忆性B淋巴细胞,分泌型Ig,五种类型: IgG、IgM、IgE、IgA、IgD两种轻链:链和链,3,免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白(Ig)B淋巴细胞B淋巴细胞浆细胞膜型Ig(BCR,4,第一节 免疫球蛋白的结构,免疫球蛋白专业知识讲座,4 第一节 免疫球蛋白专业知识讲座,5,一、基本结构,Ig是由1000个以上的氨基酸组成的大分子,所有的Ig的基本单位都是由两条轻链和两条重链组成的对称结构,Ig单体中四条肽链两端游离的氨基端(N端)或羧基端(C端)的方向是一致的。,重链,轻链,二硫键,N端,C端,免疫球蛋白专业知识讲座,5一、基本结构 Ig是由1000个以上的氨基酸,6,重链,轻链,二硫键,N端,C端,轻链(L链):每条L链约有214个氨基酸残基,根据结构及抗原性不同分为型及型。,(一)轻链和重链,免疫球蛋白专业知识讲座,6重链轻链二硫键N端C端轻链(L链):每条L链约有214个氨,7,重链,轻链,二硫键,N端,C端,重链(H链):每条H链约有450-550个氨基酸残基,根据H链抗原性的差异可将其分为五类,即IgM、IgD 、 IgG、IgA和IgE,其相应的重链分别为链、 链、 链、链和链。,免疫球蛋白专业知识讲座,7重链轻链二硫键N端C端重链(H链):每条H链约有450-5,8,希腊字母表,免疫球蛋白专业知识讲座,8希腊字母表免疫球蛋白专业知识讲座,9,(二) 可变区和恒定区,免疫球蛋白专业知识讲座,9(二) 可变区和恒定区免疫球蛋白专业知识讲座,10,(二) 可变区和恒定区,1、可变区(V区):免疫球蛋白轻链和重链中靠近N端氨基酸序列变化较大的区域。 2、高变区(HVR)VH和VL各有三个区域在氨基酸残基的组成和排列次序上都比V区内其他区域更易变化,这些区域称为高变区。,免疫球蛋白专业知识讲座,10(二) 可变区和恒定区 1、可变区(V区):免疫球,11,图 免疫球蛋白的结构,高变区,铰链区,免疫球蛋白专业知识讲座,11图 免疫球蛋白的结构高变区铰链区免疫球蛋白专业知识讲,12,3、CDR :VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位,因该部位在空间结构上与表位(抗原决定基)形成精密的互补,故又称为互补决定区(CDR)。,图 抗体高变区与表位结合,免疫球蛋白专业知识讲座,123、CDR :VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位,13,3、CDR :VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位,因该部位在空间结构上与表位(抗原决定基)形成精密的互补,故又称为互补决定区(CDR)。4、FR:V区中CDR之外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化,称为骨架区(FR)。5、恒定区(C区):L链羧基末端1/2及H链羧基末端的3/4或4/5肽链,氨基酸数量、种类、排列次序及含糖量都比较稳定,称之。,免疫球蛋白专业知识讲座,133、CDR :VH和VL的HVR区共同构成抗原结合部位,14,人抗白喉外毒素(IgG),人抗破伤风外毒素(IgG),白喉外毒素,破伤风外毒素,注:人抗白喉外毒素与人抗破伤风外毒素它们的V区不同,但C区可相同,具有相同的抗原性。,免疫球蛋白专业知识讲座,14人抗白喉外毒素(IgG)人抗破伤风外毒素(IgG)白喉外,15,(三)铰链区,铰链区,高变区,免疫球蛋白专业知识讲座,15(三)铰链区铰链区高变区免疫球蛋白专业知识讲座,16,(三)铰链区,位于CH1和CH2之间有一个富含脯氨酸、不形成-螺旋、易发生伸展及一定程度的转动的区域称为铰链区。 此区易与各种蛋白酶接近,且对木瓜蛋白酶和胃蛋白酶敏感。,免疫球蛋白专业知识讲座,16(三)铰链区 位于CH1和CH2之间有一个富含脯氨酸,17,免疫球蛋白专业知识讲座,17免疫球蛋白专业知识讲座,18,(四)功能区,1、L链可分为可变区(VL)和恒定区(CL)两个功能区。 2、H链功能区:IgG、IgA和IgD的H链各有一个可变区(VH)和三个恒定区(CH1、CH2、CH3)共四个功能区;IgM和IgE则多有一个CH4共五个功能区。,免疫球蛋白专业知识讲座,18(四)功能区 1、L链可分为可变区(VL)和恒定区(,19,CH4,CH4,免疫球蛋白专业知识讲座,19CH4CH4免疫球蛋白专业知识讲座,20,二、Ig的其它结构,1、接合链(J链):是连接两个或两个以上Ig单体的成分,存在于二聚体sIgA和五聚体IgM中,IgG、IgD、IgE为单体,无J链。 2、分泌片(SP):由上皮细胞合成与分泌,与J链共同组成分泌型IgA( SIgA )。,免疫球蛋白专业知识讲座,20二、Ig的其它结构 1、接合链(J链):是连,21,免疫球蛋白专业知识讲座,21免疫球蛋白专业知识讲座,22,三、免疫球蛋白的水解片段,(一)木瓜蛋白酶的水解片段 可在铰链区H链间双硫键近N端切断,共得三个片段。 1、Fab段(抗原结合片段)2个 2、Fc段(结晶片段)1个,免疫球蛋白专业知识讲座,22三、免疫球蛋白的水解片段 (一)木瓜蛋白酶的水解,23,免疫球蛋白专业知识讲座,23免疫球蛋白专业知识讲座,24,(二)胃蛋白酶的水解片段 可在铰链区H链间双硫键近C端切断,共得大小两个片段。 1、F(ab)2 1个 2、pFc,免疫球蛋白专业知识讲座,24 (二)胃蛋白酶的水解片段免疫球蛋白专业知识讲座,25,第三节 抗体的生物学功能,免疫球蛋白专业知识讲座,25第三节 抗体的生物学功能免疫球蛋白专业知识,26,一、特异性识别和结合抗原,Ig重要的功能是与相应抗原特异性结合,从而在体内介导多种重要的生理和病理效应(中和毒素,清除病原微生物等);在体外检测相应的抗原或抗体。这是由其V区的氨基酸种类和空间构型决定的。,免疫球蛋白专业知识讲座,26一、特异性识别和结合抗原 Ig重要的功,27,免疫球蛋白专业知识讲座,27免疫球蛋白专业知识讲座,28,二、激活补体,1、IgG1-3、IgM可通过经典途径激活补体,IgM激活补体能力最强。 2、聚合的IgG4、IgA可通过旁路途径激活补体。,免疫球蛋白专业知识讲座,28二、激活补体 1、IgG1-3、IgM可通过经典途,29,三、结合Fc受体,1、调理作用,免疫球蛋白专业知识讲座,29三、结合Fc受体1、调理作用免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白专业知识讲座培训课件,31,三、结合Fc受体,1、调理作用2、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用3、介导型超敏反应,免疫球蛋白专业知识讲座,31三、结合Fc受体1、调理作用免疫球蛋白专业知识讲座,32,免疫球蛋白专业知识讲座,32免疫球蛋白专业知识讲座,33,四、通过胎盘和粘膜,1、IgG是唯一能从母体胎盘转移到胎儿体内的Ig。 2、IgA 通过消化道和呼吸道粘膜,构成分泌型IgA,是机体粘膜局部免疫的重要因素。,免疫球蛋白专业知识讲座,33四、通过胎盘和粘膜 1、IgG是唯一能从母体,34,第四节 各类抗体的生物学特性,免疫球蛋白专业知识讲座,34第四节 免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白(Ig),B淋巴细胞,B淋巴细胞,浆细胞,膜型Ig(BCR),记忆性B淋巴细胞,分泌型Ig,五种类型: IgG、IgM、IgE、IgA、IgD两种轻链:链和链,35,免疫球蛋白专业知识讲座,免疫球蛋白(Ig)B淋巴细胞B淋巴细胞浆细胞膜型Ig(BCR,36,一、IgG,1、 IgG是血清中含量最高的Ig。2、 IgG是唯一能通过胎盘的抗体, 对防 止新生儿感染起重要作用。,免疫球蛋白专业知识讲座,36一、IgG1、 IgG是血清中含量最高的Ig。免疫球蛋白,37,二、IgM,1、IgM由5个单体通过一个J链和二硫键连接成五聚体, 分子量最大,故又称巨球蛋白。 2、在个体发育过程中, IgM是最早出现的Ig。,免疫球蛋白专业知识讲座,37二、IgM 1、IgM由5个单体通过一个,38,三、IgA,IgA分血清型和分泌型两种类型。 血清型IgA 主要为单体,占血清总量的10-20%,在血清中不显示重要的免疫作用。,免疫球蛋白专业知识讲座,38 三、IgA IgA分血清型和分泌型两,39, 分泌型IgA(SIgA ) 1、为二聚体,由两个IgA单体,一个J链和一个分泌片共同组成。 2、婴儿可从初乳中获得SIgA 。出生46个月后开始合成IgA。,免疫球蛋白专业知识讲座,39 分泌型IgA(SIgA )免疫球蛋白专业知识讲座,40,四、IgE,1、以单体形式存在,在种系进化中最晚出现,并且在血清中含量最低。2、IgE为亲细胞性抗体,是引起型超敏反应的主要抗体。,免疫球蛋白专业知识讲座,40四、IgE1、以单体形式存在,在种系进化中最晚出现,并且,41,五、IgD,主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生;以单体形式存在于血清中,含量不到血清总量的1%;膜结合型IgD(SmIgD)构成BCR是B细胞分化成熟的重要表面标志。,免疫球蛋白专业知识讲座,41五、IgD 主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生,42,第四节 人工制备抗体,一、多克隆抗体 用天然抗原免疫动物所产生的抗体,是由许多B细胞及其子代即多种纯系细胞所产生的多种抗体的混合物,称之。,免疫球蛋白专业知识讲座,42第四节 人工制备抗体 一、多克隆抗体,43,二、单克隆抗体(McAb) 是应用杂交瘤技术制备的,针对单一抗原表位,由一个B细胞分化增殖的子代细胞集团合成的高特异性和高均一性抗体,称之。,免疫球蛋白专业知识讲座,43 二、单克隆抗体(McAb)免疫球蛋白专,44,本章重点,1、概念:抗体、免疫球蛋白、多克隆抗体、单克隆抗体。2、Ig的基本结构和功能。4、免疫球蛋白的生物学功能。5、各类Ig的主要特征及功能。,免疫球蛋白专业知识讲座,44本章重点1、概念:抗体、免疫球蛋白、多克隆抗体、单克隆抗,

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