长期低剂量摄入噻唑膦原药对大鼠毒性作用的研究.docx

长期低剂量摄入睡瞬原药对大鼠毒性作用的研究李本长，邓磊，周宁(江西省职业病防治研窕院南昌330006)摘要目的研究长期低剂量摄入曝理瞬原药对大鼠的毒性作用，确定其最大无作用剂量，为安全生产及慢性毒性实验提供剂量参考。方法将80只SD大鼠(雌雄各半)按体重随机分为4组，分别为睡唾瞬原药0.8mgkgbwd组、4.0mgkgbwd组、20.Omg/kgbwd和正常对照组。在实验结束后处死实验大鼠，同时检测血液学、血清生化、体重和脏器系数等指标，并对结果进行统计学处理。结果富剂量组雄、雌性大鼠体质量增长缓慢，雄性大鼠高剂量组TG明显低于对照组，雌性大鼠高剂量组A1.P明显高于对照组，雌性大鼠高剂量组TP、A1.B、TBI1.、CREA、G1.U明显低于对照组，雌性大鼠低、中、高剂量组CHE明显低于对照组，且有剂量效应关系：雄性大鼠高剂量组脑、肺、肾、肾上腺、睾丸的脏器重量系数明显高于对照组，雌性大鼠高剂量组脑、肺、肾的脏器重量系数明显高于对照组，窗剂量组的卵巢子宫的脏器重量系数明显低于对照组(PVO.05,p<0.01)o结论嘎哇瞬原药对雄、雌性大鼠经口染毒剂量为20.0mgkgbwd及以上时，对大鼠有毒性效应；长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠最大无作用剂量为4mgkgbwd°关键词嚏理瞬原药；长期；低剂量；除草剂1TheToxicitystudyoflong-termintakeoflow-doseFosthiazateinRats1.IBen-chang,DENG1.ei,ZHOUNing(JiangXiInstituteofOccupationalDiseasePrevention,Nanchang,330006)AbstractObjectiveTbstudythetoxicityofratsthatcausedbylong-termintakeoflow-doseFlumetsulamanddeterminethemaximalnon-effectofFlumetsuIam,inordertoprovidethereferencedoseforsafetyinproductionandchronictoxicityexperiment.MethodsAtotalof80SDrats(halffemaleandhalfmale)wererandomlydividedinto4groups,respectively,fortheorginaldrug0.8mgkgbwdgroup,4.0mgkgbwdgroup,20.0mgkgbwdandnormalcontrolgroupbasedonbodyweight.Executetheratsmeanwhiledetecttheindexesincludinghemology%biochemistrydetectionofserum、bodyweightandorganmoduleaftertheendoftheexperiment,andtheresultswereanalyzedstatistically.ResultsInthehighdosegroup,theweightslowgrowthinmaleandfemalerats,theTGinhighdosegroupofmale基金项目：江西省自然科学基金项目(20122BAB215026)作者单位：江西省职业病防治研究院；邮编：330006；邮箱：作者简介：李本长(1983.),男，毒理学硕士,主治医师，研究方向为农药与神经毒理学ratsandtheTP>A1.B>CREA>G1.Uinhighdosegroupoffemaleratswerelowerthannormalcontrolgroupobviously,theA1.Pinhighdosegroupoffemaleratswerehigherthannormalcontrolgroup,alsotheCHEinbothstudygroupoffemaleratswerelowerthannormalcontrolgroupobviouslyandhasdose-responserelationship,eventheratiosoforganandbodyinhighdosegroupthatincludingbrain>lung、kidney%adrenaltesticleofmaleratsandbrain%lung、kidneyoffemaleratswerehigherthannormalcontrolgroupobviously,alsetheovariananduterusinhighdosegroupoffemaleratswerelowerthannormalcontrolgroupobviously(p<0,05,p<0.01).ConclusionsWhentheoraldosesofFosthiazateat4.0mgkgbwdandabove,itcancausetoxiceffectsonrats,anditsmaximalnon-effectdoseoflong-termintakeoflow-doseFosthiazateonratsis0.8mgkgbwd.KeyWordsFosthiazate;1.ong-term;1.ow-dose;Phytocide嘎理瞬原药(Fosthiazate)出用是一种新颖、高效、广谱型非熏蒸型有机磷杀线虫剂，其学名为(R,S)-S-仲丁基9-乙基-2-氧代-1,3-睡喋烷3基硫代磷酸酯，具有优异的触杀性和内吸传导性，其广泛应用于植物寄生线虫的危害防治上，有效期可长达2-3个月，且施用效果不受土壤条件的影响，尤其适用于防治蔬菜类等农作物寄生线虫的危害。为了明确长期低剂量摄入嘎映瞬原药的毒性作用并确定其最大无作用剂量，我们依据GB15670-1995农药登记毒理学试验方法对烯草酮原药进行了大鼠经口毒性试验，现分析讨论如下，以供生产单位、使用者、同行及农业卫生监督管理部门参考。1材料与方法1.1 动物、试剂与仪器设备SPF级SD大鼠(9012Og)80只，雌雄各半，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，合格证号为SCXK(湘)2009-0004；睡啡瞬原药，主要成分为296%睡哩瞬，性状为浅黄色至红棕色油状液体，由国内某化工股份有限公司提供；BC-2800vet全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞)、全自动生化分析仪(TOSHIBATBA-40FR,日本)、ClinitekSTATUS拜施达尿分析仪(德国Bayer公司)和T1.TIOSG干化学尿析试纸条。1.2 实验动物染毒与处置实验动物适应饲养观察5d后，依据睡哇瞬原药急性经口1.D50的1/125、1/25、1/5将雌、雄大鼠随机分成低、中、而3个实验组及空白对照组，每组20只，雌雄各半。低、中、高剂量组雌雄大鼠染毒剂量分别为0.8mgkgbw>4.0mgkgbw>20.0mg/kgbw。将受试物混入饲料中连续喂饲90d,动物自由饮水进食。1.3 检测指标1.3.1 日常观察和体重每天观察并记录实验动物各种状态及异常表现。期间每周测动物体重一次,并按本次各剂量组体重结果配制下周各组喂饲用粉料。在动物染毒结束后称取空腹体重，用于计算各剂量组脏器系数。1.3.2 血液学检测13周试验结束，隔夜禁食，股动脉取血，测定RBC、HGB、P1.T.WBC和白细胞分类(淋巴、中性、单核)等指标。1.3.3血清生化检测股动脉取血5ml以3000rmin离心IOmin,分离出血清，测定A1.T、AST、A1.P、TP、A1.B、BI1.、BUN、CREAG1.UCHC)1.、TG、CHE等指标。1.3 .4脏器检查和脏器重量系数测定13周试验结束，取脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、睾丸、卵巢(含子宫)测定其脏器重量系数。1.4 统计学处理实验所得数据以又±S表示，采用SPSSI30软件包，组间均数比较采用1.SD”检验，数据分析采用单因素方差分析。2结果2.1 嘎理瞬原药对大鼠日常状态和体重的影响试验期间各组动物一般情况良好，无死亡、厌食和其它异常行为；高剂量组雄、雌性大鼠周平均体重分别从第2周和第1周开始至实验结束均明显低于对照组(,VO.05,p<0.01),其他显著性差异无毒理学意义，见表1、表2。表1长期低剂量摄入睡I理瞬原药对雄性大鼠体重的影响(X±S,=10)染毒周数对照组低剂量组中剂量组高剂量组095.50±2.5595.40±2.6895.00±2.3695.30±2.501128.30±9.12136.50±6.77*134.30±5.23*127.30±4.222193.00±6.62196.40±7.21196.60±9.11186.20±6.39*3256.70±8.93255.30±10.92250.00±14.81242.00±11.60*4326.70±11.86325.30±12.73322.30±19.51303.10±18.84*5368.50±12.55371.00±20.20372.30±24.55338.90±26.05*6417.00±19.97408.50±18.79374.80±22.91*348.80±29.98*7435.40±22.32435.20±16.57404.70±29.47*371.30±31.53*8462.00±27.74457.10±29.07433.90±33.40*397.50±31.82*9477.20±30.36472.90±29.25457.20±45.01424.40±31.17*10492.80±31.91485.30±36.52446.80±38.67*419.60±24.49*11520.90±38.65518.60±39.85499.70±49.97452.90±28.06*12492.90±41.92488.20±45.51467.2±41.77421.10±27.01*13546.20±45.58541.70±38.89511.10±49.33440.10±22.10*与对照组比较夕VO.05,*与对照组比较p<0.Ol表2长期低剂量摄入睡理瞬原药对雌性大鼠体重的影响(X±S,=10)染毒周数对照组低剂量组中剂量组高剂量组092.60±5.3892.30±5.5292.00±5.4092.20±4.641132.40±8.61127.10±11.40126.80±6.02120.80±4.89*2181.50±15.55179.30±15.56172.60±9.12162.40±8.07*3203.10±17.08208.40±16.74200.20±10.67189.20±ll.14*4227.40±22.40226.00±15.03221.90±9.36206.70±12.81*5249.00±28.03244.30±23.73235.50±10.85215.20±17.93*6266.50±29.97264.90±20.30251.80±11.67234.40±13.73*7271.30±23.05269.00±19.00258.00±16.93238.70±16.08*8279.20±32.18281.10±26.13270.90±12.00253.30±16.19*9279.70±32.83280.10±22.20265.20±12.74231.90±18.16*10281.60±23.06284.70±23.50267.80±11.34210.40±14.07*11301.00±33.02297.40±24.14284.10±15.42238.70±19.94*12281.60±25.64288.50±26.18274.20±12.14199.00±21.55*13298.30±34.64303.40±30.34287.40±10.42241.70±19.63*与对照组比较夕V0.05,*与对照组比较夕V0.012.2 嘎嘿瞬原药对大鼠脏/体系数的影响雄性大鼠高剂量组脑、肺、肾、肾上腺、睾丸的脏器重量系数明显高于对照组(p<0.01),雌性大鼠高剂量组脑、肺、肾的脏器重量系数明显高于对照组(p<0.05,p<0.01),高剂量组的卵巢子宫的脏器重量系数明显低于对照组(pV0.01),见表3、表4。表3长期低剂量摄入睡喋瞬原药对雄性大鼠脏器系数的影响(M±S,/2=10)脏器名称对照组低剂量组中剂量组高剂量组腺脑心肺肝脾肾上”肾篇0.415±0.038O. 269 ± O. 028O. 341±0. 0272. 703±0. 125O. 169±0. 022 0.618±0. 049 0.012±0. 002O. 786 ÷ O. 063O.412±0. 037O. 268 ± O. 027O. 336 ± O. 0392. 716±0. 327O. 179±0.014O. 630 ± O. 049 0.011±0. 002O. 768 ± O. 080O.437 + 0. 027O. 288 ± O. 030O. 366 ± O. 0312. 742±0. 196O. 175±0. 021O. 653 + 0. 0410.012±0. 0020.816÷0. 068O.506 + 0. 034*O. 283 ± O. 021O. 389 ± O. 039*2. 837 ± O. 333O. 183±0. 028O. 690 + 0. 057*0.016±0. 002*O. 999 ÷ O. 088*与对照组比较p<0.05,*与对照组比较p<0.01表4长期低剂量摄入睡喋瞬原药对雌性大鼠脏器系数的影响(X±S,/2=10)脏器名称对照组低剂量组中剂量组高剂量组脑心肺肝脾0.706 + 0. 0740. 708 ±0. 0670.712 + 0. 0330. 820 ±0. 061*0. 342±0. 0300. 314±0. 0380. 349 ±0. 0520. 346 ±0. 0230. 496 ±0. 0580. 468 ±0. 0620. 474 ±0. 0610. 570 ±0. 082*2. 904 ±0. 1802. 830 ±0. 2822. 928 ±0. 1762. 993 ±0. 1730. 207±0.0190. 197 + 0. 0230. 200±0. 0140. 202 ±0. 020肾0.722±0.0520.683±0.0390.730±0.0560.782±0.047*肾上腺0.021±0.0030.023±0.0050.020±0.0080.024±0.002卵巢子宫0.331±0.0600.313±0.0800.318±0.0590.243±0.083*与对照组比较PVo.05,*与对照组比较pV0.012.3 噫喋瞬原药对大鼠血液学指标的影响雄、雌性大鼠各剂量组血液学指标未见明显异常变化，见表5、表6。表5长期低剂量摄入睫噗瞬原药对雄性大鼠血液学指标的影响(5±S,=6)检查项目对照组低剂量组中剂量组高剂量组WBC(X109/1.)RBC(×10121.)HGB(g1.)淋巴细胞()单核细胞()中性粒细胞(%)8.30+4.378.16÷0.28160.17÷5.8171.03+6.223.87÷2.6825.10+4.206.02÷1.468.19+0.27161.83÷5.0466.33÷4.533.60÷1.5930.07+3.078.42+4.758.12÷0.30162.33÷4.4664.10÷5.14*6.98±2.62*28.92+5.836.30÷1.868.15÷0.25165.33÷4.4672.97±4.402.48±0.3724.55÷4.13*与对照组比较pV0.05,*与对照组比较pV0.01表6长期低剂量摄入睡畔瞬原药对雌性大鼠血液学指标的影响(5±S,/7=6)检查项目对照组低剂量组中剂量组高剂量组WBC(X109/1.)3.28±1.074.63±2.885.53±2.064.88±1.41RBC(×10121.)7.90±0.427.76±0.257.61÷0.638.17+1.20HGB(g1.)162.83±6.49157.33±4.72154.17±8.59166.50±28.37淋巴细胞()74.65÷2.7072.82÷4.1969.77÷11.4173.22+6.46单核细胞()2.77±0.502.93±0.302.80±1.023.05±0.80中性粒细胞()22.58±2.6224.25±3.9727.43±10.7423.73+5.90*与对照组比较pV0.05,*与对照组比较pV0.012.4 嘎嚏瞬原药对大鼠血清生化指标的影响雄性大鼠高剂量组TG明显低于对照组(PVO.05),雌性大鼠高剂量组A1.P明显高于对照组(P<0.05),TP、A1.B、TBI1.sCREA.G1.U明显低于对照组(0VO.05,p<0.01),雌性大鼠低、中、高剂量组CHE明显低于对照组，且有剂量效应关系(p<0.01),其它显著性差异无毒理学意义，见表7、表8。表7长期低剂量摄入嚷喋瞬原药对雄性大鼠血清生化指标的影响(X±S,=6)检查项目对照组低剂量组中剂量组高剂量组A1.T(U/1.)37.33÷5.6135.33÷6.4134.17÷2.9333.50+6.35AST(U/1.)212.17÷51.04185.00±50.61196.50+38.86182.33÷47.19A1.P(U/1.)126.33+38.19109.17÷11.50121.83÷27.06139.50±65.49TP(g1.)73.33±2.5078.83±2.7975.50±3.2172.33±2.58A1.B(g1.)39.97±1.0940.25±0.9641.45±1.18*40.98±1.02TBI1.(mol1.)0.13±0.050.12±0.040.15±0.120.13±0.08BUN(mmol1.)5.37±0.895.63±1.075.23±0.765.17±0.68CREA(mol1.)72.67±4.7273.67±5.6874.17±8.1370.33±9.44G1.U(mmol1.)3.88±0.464.77±0.223.53±1.064.37±1.00CHO1.(ol1.)1.73±0.331.89±0.402.12±0.23*1.87±0.23TG(mmol1.)1.17±0.201.01+0.321.12±0.500.73±0.07*CHE(U/1.)168.67+83.64139.67±32.36163.00±40.27136.83±22.01*与对照组比较pV0.05,*与对照组比较pV0.01表8长期低剂量摄入嚷喋瞬原药对雄性大鼠血清生化指标的影响(X±S,=6)检查项目对照组低剂量组中剂量组高剂量组x)z7 7 !/ 一 1.LLLL uuu /(x < /(x o G LTSTLPP(LB AAATALTBI1.(molL) BUN (mmolL) CREA (molL) GLU (mmolL) CHOL (mmolL) TG (mmolL)CHE(UZL)41.17÷15. 55191.00÷45. 5168. 67÷19.0184. 67 ÷ 7. 2346. 70 ÷ 3. 540. 18÷0. 087. 29÷1.7682. 17÷7. 084.71+0. 472. 49÷0.211.22÷1.061679. 20 ÷ 600. 4328.00 ±4. 56*173. 17÷43. 6060. 50÷12. 0581.83÷6. 3744. 97 + 3. 140. 15 + 0. 086. 69÷0. 6879. 00 ÷ 4. 005. 36÷0. 952. 55 + 0. 350.61 + 0. 051259. 70÷412. 28*30.50÷4. 04183. 33÷36. 4458. 17+10. 3083. 17÷4. 5446. 28+1.970. 12÷0. 047. 64÷1.9281. 17÷7. 144. 38÷0. 712. 36÷0. 250. 97÷0. 681047. 80 ÷ 190. 40*30.67 + 7. 09192. 33÷59. 9288. 83+10. 38*72. 83+1. 94*41.58÷0. 74*0. 10 + 0. 00*6. 03 + 0. 7868. 17÷2. 32*3.61 + 0. 45*2. 44÷0. 520. 69÷0. 20466. 33+100. 74*与对照组比较"VO.O5,*与对照组比较pV0.013讨论长期低剂量摄入睡哇瞬原药的大鼠经口毒性试验的结果表明，雄、雌性大鼠高剂量组体质量增长较对照组缓慢，表明FoSthiaZale原药有一定的毒性作用。实验动物体质量的变化是反映动物机体中毒效应及毒物毒性的最基本指标也雄性大鼠高剂量组TG明显低于对照组，雌性大鼠高剂量组A1.P明显高于对照组，雌性大鼠高剂量组TP、A1.B、TBl1.CRE.G1.U明显低于对照组(,雌性大鼠低、中、高剂量组CHE明显低于对照组，且有剂量效应关系，提示受检样品对雄、雌性大鼠肝脏功能和糖类代谢及对雄性大鼠肝功能有一定影响(p<0.05,7<0.01);脏器重量系数是提供受试物靶器官的重要指标，试验结果表明，雄性大鼠高剂量组脑、肺、肾、肾上腺、睾丸的脏器重量系数明显高于对照组，雌性大鼠富剂量组脑、肺、肾的脏器重量系数明显高于对照组，高剂量组的卵巢子宫的脏器重量系数明显低于对照组(pV0.05,p<0.01)o上述试验结果表明，实验动物体质量、生化指标和脏器重量系数相互支持，具体协同作用机制有待进一步深入研究。本次试验表明，睡唾瞬原药对雄、雌性大鼠染毒剂量为4.0mgkg.bw.d及以上时，对大鼠有毒性效应。因此，在本试验条件下，长期低剂量摄入噬哇瞬原药对雄、雌性大鼠经口毒性的最大无作用剂量均为O.8mgkg.bw.do喙噗瞬原药在我国具有较大开发价值及较好的推广使用前景,越来越多地受到生产厂家的重视。为此,对其毒性的检测监控和毒性管理成为迫在眉睫的新的课题。本项目通过长期低剂量摄入噬映瞬原药的经口毒性动物试验,对其毒性作用特点进行了观察,相关指标表明该药对大鼠的生长,对大鼠的肝功能、糖类代谢和体质量等有一定影响,在实际生产和应用中应予以注意。参考文献1 ChabrierC,HubervicJ,QueneherveP.EvaluationoffoshtiazateinbananafieldsinMartiniquetJ.Nematropica,2002,32(2):137-148.2 KimpinskiJ,ArsenaultWJ,SandersonJB.FosthiazateforsuppressionPratylenchuspeneransinpotatoonprinceEdwardislandJ.JournalofNematology,1997,29(4s):685-689.3罗秀满，刘玉法，文IJ自发.RP-HP1.C法测定杀虫剂噬噗瞬原药含量J.山东师范大学学报2010,25(2)：61-62.4GB15670-1995.农药登记毒理学试验方法.5周银平，李玲玲，焦茂兴，等.敌草隆原药对大鼠的亚慢性毒性试验J毒理学杂志，2007,21(2)：157-159.作者简介：李本长(1983。，男，毒理学硕士,主治医师，研究方向为农药与神经毒理学。江西省职业病防治研究院毒理/实验动物中心基金项目：江西省自然科学基金项目(20122BAB215026)邮编：330006地址：电话：E-mail：