焦炉逸散物致基因组DNA异常甲基化改变的研究.docx

焦炉逸散物致基因组DNA异常甲基化改变的研究段化伟I何志妮2马俊香I张波2牛勇I宾萍I戴宇飞I陈雯2肖永梅2郑玉新I1.中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所，中国疾病预防控制中心化学污染与健康安全重点实验室，北京，100050；2.中山大学公共卫生学院预防医学系，广州，510080Email：焦炉作业工人在生产过程中暴露于高浓度的焦炉逸散物，其中含有大量致突变和致癌性的多环芳燃化合物。流行病学研究表明长期暴露多环芳燃化合物与焦炉工肺癌的发生存在明显的因果关系。大量研究表明，基因组DNA和肿瘤相关基因的异常甲基化改变、基因组不稳定性是致癌过程中的几个重要方面。目前，关于焦炉逸散物暴露人群的DNA甲基化研究并不多见，我们招募82名焦炉工和62名非多环芳煌暴露的对照组工人。通过检测其工作环境中多环芳燃的浓度和尿中1-羟基花水平，评估其暴露水平。利用彗星实验和胞质阻滞微核实验分别检测个体DNA和染色体损伤改变。基因组DNA经亚硫酸盐修饰后，以长散在重复序列(1.INE-I)代表基因组甲基化水平，O'-甲基鸟嚓吟-DNA甲基转移酶(MGMT)为候选基因甲基化研究；利用焦磷酸盐测序技术对上述基因进行甲基化定量分析。同时收集焦炉作业炉顶区域的焦炉逸散物，以人支气管上皮细胞(16HBE)为体外模型，经焦炉逸散物有机提取物处理后，检测候选基因甲基化改变和蛋白表达水平改变。我们发现焦炉逸散物中有较高浓度的多环芳烧，焦炉工的尿中1-羟基花浓度、OIiVe尾距和淋巴细胞微核率也显著高于对照组。焦磷酸盐甲基化测序发现，与对照组相比，焦炉工淋巴细胞基因组1.INET甲基化水平降低，其中位数是59%(四分位数间距(IQR)为58.3-59.7%),对照组是63%(IQR=58.9-64.1%),差异有统计学意义(尸0.001)。'基因启动子区甲基化水平也呈降低趋势4.56%(3.59-5.55%)比5.34%(4.12-6.12%),片0.018,并具有位点特异性。1.INE-I和MGMT启动子区甲基化水平与尿中1-羟基花浓度呈负相关趋势，提示多环芳燃暴露可导致基因组和J暇板启动子区甲基化水平降低。此外,1.INET甲基化与彗星Olive尾距和微核率分别呈负相关趋势。将MGMT甲基化水平按二分位法分组后，在低J暇小甲基化组中也有较高的淋巴细胞微核率。体外细胞学实验也证实了高浓度焦炉逸散物暴露后，细胞基因组和轨弱7启动子区呈低甲基化改变，该甲基化异常改变可能与BPDE-DNA加合物的形成有关。研究表明，1.NET和,侬力启动子区低甲基化改变可以作为评估焦炉逸散物或多环芳嫌暴露人群健康损害的生物标志物，或可用于肿瘤高风险人群的早期健康监护。