课题3 血红蛋白的提取和分离课件.ppt

血红蛋白的提取和分离,新课导入,下面请看一条新闻,艾滋病研究进展 英国自然杂志登论文说，“”蛋白质可有效抑制艾滋病病毒的感染。 此后，世界各地的很多科学家开始研究“”蛋白质的结构，但到目前为止尚未有人宣称取得突破性进展。,提问,研究“TRIM5”蛋白质的第一步是什么？,根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附的性质、对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。,如何分离和提纯蛋白质？,课题重点,凝胶色谱法的原理和方法。,课题难点,凝胶色谱法的原理和方法。,凝胶色谱法,什么是凝胶？,凝胶是一些多糖类构成的内含许多贯穿的通道的微小多孔的球体。,内容解析,基础知识：,凝胶色谱法的原理,相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，在凝胶的外部移动，路程较长，移动速度较慢。,相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。,概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。,缓冲溶液,缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成。 调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。,缓冲溶液的配制,利用缓冲液模拟细胞内的PH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察和科学研究。,电泳,带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。,琼脂糖凝胶电泳,概念,分类,聚丙稀酰胺凝胶电泳,许多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团，它们在某个特定的pH下会带上正电或负电； 在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。,电泳的原理,相关链接,为什么有的血管是蓝色的？,携氧的血是鲜红色的，当你被划伤时，你看到的是鲜红的携氧血。,不携氧的血是深紫色的，当你献血时，血被抽到没有氧气的试管里，你看到的血是深紫色的。,深紫色的无氧血流经我们的静脉时却呈蓝色,为什么,不同的光线透过皮肤的方式不同：蓝光在皮肤表面被反射回来；红光透射得比较深；静脉中深色的血吸收大部分红光。所以我们看到的是皮肤表面反射的蓝光 。,另外一些生物，如蛇类和蟹类，用铜来运输氧气，所以他们有真正的蓝血。,课堂小结,缓冲溶液：,在一定的范围内，能够抵制外加少量强酸或强碱，使原来溶液PH值基本保持不变的混合溶液。,凝胶色谱法：,根据被分离的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离的方法。,1.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,2.琼脂糖凝胶电泳,常用的电泳方法：,电泳：,带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。,1. 随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质的研究和应用越来越深入，首先要做的一步是（）A. 弄清各种蛋白质的空间结构B. 弄清各种蛋白质的功能C. 弄清各种蛋白质的合成过程D. 获得高纯度的蛋白质,课后小练,2. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是（ ）A. 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B. 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C. 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D. 二者根本无法比较,A,3.人们用鸡的红细胞提取DNA，用人(猪、牛、羊）的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？,答： 鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。,4. 蛋白质的分离和提取的原理是什么？,答： 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。,谢 谢,