血浆脂蛋白及其代谢紊乱课件.ppt

编辑版ppt,1,血浆脂蛋白及其代谢紊乱,编辑版ppt,2,教学目标和要求,1、掌握脂蛋白的分类及其主要功能；高脂血症的分型及血液生化特点；血脂、脂蛋白和载脂蛋白测定的原理和方法。,2、熟悉各种脂蛋白的组成与结构要点；异常脂蛋白血症的原因；血脂检查前应注意的问题。,3、了解载脂蛋白的种类与生理功能；各个检验项目的临床意义和应用。,编辑版ppt,3,概 述 一、血脂及血浆脂蛋白（一）血浆脂蛋白的分类（二）血浆脂蛋白的组成与结构（三）载脂蛋白（四）脂蛋白受体（五）胆固醇酯转运蛋白 (六)血浆脂蛋白代谢 二、脂蛋白代谢紊乱（一）高脂蛋白血症 (二) 低脂蛋白血症,编辑版ppt,4,一、血脂及血浆脂蛋白,血脂：血浆脂类即血脂。包括游离胆固醇(free cholesterol，FC)、胆固醇酯(cholesterol ester，CE)、磷脂(phospholipid，PL)、甘油三(triacylglycerol，TG)、糖酯、游离脂肪酸(free fatty acid，FFA)等。,定义：,脂蛋白：脂类难溶于水，正常血浆脂类物质与蛋白质结合成脂蛋白的形式存在。,编辑版ppt,5,（一）血浆脂蛋白的分类,各脂蛋白密度和分子大小特点：脂蛋白颗粒的密度从CM到HDL是由小到大，而分子的大小则是由大到小。,编辑版ppt,6,超速离心法(ultra centrifugation method)亦称密度梯度法(density-gradient method) 依据不同脂蛋白的密度差异，在离心时漂浮速率不同而进行分离。Sf (Svedberg floatation rate),编辑版ppt,7,电泳法 (electrophoresis method) 依据血浆脂蛋白分子中蛋白质表面电荷多少的不同而分离。,编辑版ppt,8,编辑版ppt,9,（二）血浆脂蛋白的组成与结构,组成：,蛋白质、甘油三酯、磷脂（phospholipid，PL）、游离胆固醇（free cholesterol ，FC）及胆固醇酯（cholesterol ester，CE）等成分组成。,编辑版ppt,10,结构：,大致为球形颗粒，由两大部分组成，即疏水性的内核和亲水性的外壳（图10-1）。内核由不同量的CE与TG组成，表层由载脂蛋白、PL及FC组成，FC及PL的极性基团向外露在血浆中，载脂蛋白是兼性化合物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而亲水部分突出于脂蛋白颗粒的表面。,编辑版ppt,11,、乳糜 微粒（chylomicron,CM）物理性质：密度：0.95 g/ml Sf400 直径：80500nm 电 泳时处于点样点化学组成 ：载脂蛋白1-2 ： ApoB48、 A、C、。脂类 98-99：TG 85-95、磷脂 3-8，ch 2-8合成部位：小肠粘膜细胞（十二指肠、空肠） 功 能：运输外源性TG到全身各组织,编辑版ppt,12,应用：CM颗粒大，一般不致动脉粥样硬化, 但易诱发胰腺炎。近年研究表明， CM残粒(代谢残骸)可被巨噬细胞表面受体所识别而摄取，因而可能与AS有关。,编辑版ppt,13,、极低密度脂蛋白（very low density lipoprotein ,VLDL ）,物理性质：密度0.951.006 g/ml Sf 20400 直径30 80nm 电泳时pre-LP 位 化学组成：载脂蛋白5-10: ApoB100、C、E 脂类90-95 （TG 50-70， CH 10-25 PL 15-20）,编辑版ppt,14,合成部位：肝细胞功 能：运输内源性TG的主要形式应 用：血浆VLDL水平升高已被确认为冠心病 的危险因子。,编辑版ppt,15,、低密度脂蛋白（low density lipoprotein ,LDL）,物理性质：密度1.0061.063g/ml 、 Sf 0-20 电泳时处于-LP 化学组成：载脂蛋白2025: ApoB100 、脂类 75-80（TG 5-10% 、 CH 45-50% PL 20%） 合成部位： 在血浆中由VLDL经过IDL转化而来（主要） 一部分肝细胞合成（次要）,编辑版ppt,16,功能：携带胆固醇由肝脏转运到全身血浆中应用：LDL相对较小,易于穿过动脉内膜，是首要的致AS性脂蛋白。已证明AS斑块中的胆固醇主要来自循环中的LDL。,编辑版ppt,17,、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）,物理性质： 密度1.063-1.21 g/ml , Sf 0 ,直径 7-10 nm,电泳时处位于-LP 化学组成：载脂蛋白45-55, ( ApoA、A、D),脂类 45-55（TG 2-7,CH 18-25 ,PL 26-32）,编辑版ppt,18,HDL按密度大小可分为HDL1、HDL2和HDL3。HDL1 又称为HDLc，仅在摄取高胆固醇膳食后才在血中 出现，健康人血浆中主要含HDL2和HDL3。合成部位： 1.一部分肝细胞合成（主要），小肠也可合成 2.VLDLHDL功能： 将肝外组织细胞表面的胆固醇摄入并酯化再转运 到肝内的载体进行代谢（逆向转运CE）。应用：HDL有防止动脉粥样硬化的作用。 HDL被认为是一种抗AS的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子。,编辑版ppt,19,5、脂蛋白(a)LP-(a)，Lipoprotein(a) 1963年被发现。组成与结构类似于LDL，但分子量、颗粒较大，电泳较慢。 脂类：TG、PL、FC、CE 组成 蛋白质：ApoB100、Apo(a)(特色)结构：类似于LDL,编辑版ppt,20,临床意义： 血浆LP(a)是导致As的独立危险因子,因Apo(a)与纤溶酶原具有高度同源性，在纤溶系统多个环节发挥作用，从而影响As的发生和发展。,编辑版ppt,21,TGrich Lipoprotein,Chrich Lipoprotein,编辑版ppt,22,血 浆 脂 蛋 白 的 组 成 特 点,编辑版ppt,23,（三）载脂蛋白,脂蛋白的蛋白部分称为载脂蛋白(apolipoprotein，Apo),定义：,种类：,按1972年Alaupovic建议的命名方法，用英文字母顺序编码，分为ApoA、B、C、D、E、F、G、H、J等。由于氨基酸组成的差异，每一型又可分若干亚型。,编辑版ppt,24, apoA：目前发现有四种亚型，即apoA，apoA，apoA，apoA。apoA和apoA主要存在于HDL中。,编辑版ppt,25, apoB：有两种亚型，即在肝细胞内合成的apoB100；小肠粘膜细胞内合成的apoB48。apoB100主要存在于LDL中，而apoB48主要存在于CM中。,编辑版ppt,26, apoC：有四种亚型，即apoC，apoC，apoC，apoC。VLDL主要存在的载脂蛋白是apoB100和apoC。 apoD：只有一种。 apoE：有三种亚型，即apoE2，apoE3，apoE4。,编辑版ppt,27,功能： 转运脂类物质。 作为脂类代谢酶的调节剂：LCAT可被apoA，apoA，apoC等激活，也可被apoA所抑制。LpL（脂蛋白脂肪酶）可被apoC所激活，apoA也有辅助激活作用；也可被apoC所抑制。HL（肝脂酶）可被apoA激活。,编辑版ppt,28, 作为脂蛋白受体的识别标记：apoB可被细胞膜上的apoB，E受体（LDL受体）所识别；apoE可被细胞膜上的apoB，E受体和apoE受体（LDL受体相关蛋白，LRP）所识别。apoA参与HDL受体的识别。,编辑版ppt,29, 参与脂质交换：胆固醇酯转运蛋白（CETP）可促进胆固醇酯由HDL转移至VLDL和LDL；磷脂转运蛋白（PTP）可促进磷脂由CM和VLDL转移至HDL。 作为连接蛋白：apoD可作为LCAT与apoA之间的连接蛋白，构成apoA-apoD-LCAT复合物，与胆固醇的酯化与转运有关。,编辑版ppt,30,人血浆载脂蛋白的结构、功能及含量,编辑版ppt,31,（四）脂蛋白受体,定义：,脂蛋白受体是一类位于细胞膜上的糖蛋白。它能以高度的亲和方式与相应的脂蛋白配体作用，从而介导细胞对脂蛋白的摄取与代谢，进一步调节细胞外脂蛋白的水平。,编辑版ppt,32,脂蛋白与脂蛋白受体的作用：,不仅是运送脂蛋白至细胞所必需，也是从血和外周组织中有效清除具有潜在致动脉粥样硬化的脂蛋白所必需的。,种类：,已有很多种，主要有LDL受体、残粒受体（remnant receptor）及清道夫受体（scavenger receptor）。,编辑版ppt,33,LDL受体,从细胞膜内到细胞膜外，其功能结构区域名称依次为：配体结合结构域、表皮生长因子（EGF）前体结构域、糖基结构域、跨膜结构域和胞液结构域,编辑版ppt,34,LDL受体： 不仅能识别ApoB100，也可识别ApoE，在细胞结合、摄取和降解LDL及其它含ApoB100的脂蛋白过程中起中介作用，对维持细胞和全身胆固醇平衡起重要作用。,功能,残粒受体： 能识别ApoE，是清除血液循环中CM残粒和-VLDL残粒的主要受体，它也能结合含ApoE的HDL。,清道夫受体： 主要存在于巨噬细胞表面,介导修饰LDL(包括氧化LDL和-VLDL)从血液循环中清除。,编辑版ppt,35,（五）胆固醇酯转运蛋白,定义：,血浆中脂蛋白部分含有一种特殊的转运蛋白，能促进血浆各脂蛋白间胆固醇酯、甘油三酯和磷脂的单向或双向转运和交换，这类特殊转运蛋白称脂质转运蛋白（lipid transfer protein,LTP）。,组成：,胆固醇酯转运蛋白（cholesterol ester transfer protein,CETP）,磷脂转运蛋白（phospholipid transfer protein,PTP）,甘油三酯转运蛋白（triglyceride transfer protein,TTP）,编辑版ppt,36,(六)血浆脂蛋白代谢,外源性代谢途径：指食物中摄入的胆固醇和甘油三酯在小肠中合成CM及CM代谢的过程 。,内源性代谢途径：指肝脏合成VLDL，然后转变为IDL和LDL，并被肝脏或其它器官代谢的过程,胆固醇的逆向转运：HDL参与将胆固醇从外周组织运输到肝脏的过程。,编辑版ppt,37,乳糜微粒的代谢,编辑版ppt,38,编辑版ppt,39,将食物中的甘油三酯转运至肝和脂肪组织（转运外源性甘油三酯）。,CM的生理功能,编辑版ppt,40,VLDL的代谢,组装形成新生HDL,IDL,编辑版ppt,41,将肝合成的甘油三酯转运至肝外组织（转运内源性甘油三酯）。,VLDL的生理功能,编辑版ppt,42,编辑版ppt,43,LDL的代谢,编辑版ppt,44,摄入组织细胞的胆固醇具有以下功能： 抑制HMG-CoA还原酶的活性，调节胆固醇的合成； 抑制LDL受体的合成，调节外周组织对胆固醇的摄取； 激活ACAT，促进组织细胞对胆固醇的酯化。,编辑版ppt,45,将胆固醇由肝转运至肝外组织。,LDL的生理功能,编辑版ppt,46,HDL的代谢,编辑版ppt,47,编辑版ppt,48,将胆固醇由肝外组织转运至肝（胆固醇的逆向转运）。,HDL的生理功能,编辑版ppt,49,二、脂蛋白代谢紊乱,（一）高脂蛋白血症,定义：,高脂血症（hyperlipidemia）是指血浆中胆固醇或/ 和甘油三酯水平升高。血浆脂类以血浆脂蛋白形式存在，因此，高脂血症一定是高脂蛋白血症（hyperlipoproteinemia）。,近年来，已逐渐认识到血浆中HDL降低也是一种脂代谢紊乱。,编辑版ppt,50,从原因分类 原发性高脂蛋白血症 继发性高脂蛋白血症,编辑版ppt,51,原发性高脂蛋白血症 原发性高脂蛋白血症是由遗传因素造成蛋白质缺陷引起的脂蛋白代谢紊乱，包括Apo、酶和受体的缺陷等几种情况。1967年Fredrickson将原发性高脂蛋白血症分为6种表型。,编辑版ppt,52,型高脂蛋白血症（家族性高CM血症） 1.发病原因： 常染色体隐性遗传 （1）LPL遗传性缺陷 （2） ApoC缺乏 Apo C缺陷(缺乏或结构异常) LPL活性 CM中的TG不能被水解 CM变成CM残粒受阻 CM在血浆中堆积。2.临床表现： 常伴有视网膜止血症、腹痛、胰腺炎、肝脾肿大等，发病多在儿童期。,编辑版ppt,53,3.生化特征：（1）血清外观：乳白色混浊，4过夜，血浆上层出现“奶油样”上层（由CM构成），下层为透明至混浊。 （2）血脂分析：TG ，胆固醇正常或轻度增高。 （3）电泳图谱：正常人无CM带，此时有区带深染。 （4）脂蛋白分析：CM （5）血浆LPL活性降低，肝脂酶正常，毛细血管内皮细胞LPL活性因其辅助因子ApoC缺乏而低下。,编辑版ppt,54,IIa型高脂蛋白血症(家族性高胆固醇血 症）,1.发病原因： 主要为LDL受体缺陷，常染色体隐性遗传 (1) LDL受体缺乏或减少 (2) LDL受体活性（与LDL结合能力）降低 (3) LDL受体入胞（内吞）障碍，即 LDL受体可与LDL形成复合物，但不能被内吞。 以上均导致LDL不能以正常速度进入细胞而堆积于血浆中，久之则使LDL-Ch大量沉积在动脉管壁 AS。,编辑版ppt,55,2.临床表现： 黄色瘤、角膜弓状云、AS等，纯合子患者在青春期即发生AS和冠心病，可致死。3.生化特征：（1）血清外观：透明，少有混浊（2）血脂分析：胆固醇 ，TG正常。（3）电泳图谱：区带深染、增宽（4）脂蛋白分析：LDL ，ApoB ,编辑版ppt,56,b型高脂蛋白血症（高-LP合并高 前-LP血症，混合型高脂蛋白血症） 1.发病原因： 主要因ApoB100过多生成，导致血浆VLDL、LDL过量生成而分解并不加快，从而堆积。常染色体显性遗传。 2.临床表现： b型与a的主要区别是前者LDL受体活性正常，患者多合并肥胖，糖代谢及胰岛素分泌异常，易伴发黄色瘤及动脉粥样硬化症。,编辑版ppt,57,3.生化特征： (1）血清外观：少有混浊 （2）血脂分析：胆固醇 、TG （3）电泳图谱：-LP和Pre -LP区带均深染，但两者并不融合。 （4）脂蛋白分析： LDL 、 VLDL ,编辑版ppt,58,型高脂蛋白血症(高-VLDL血症，宽-脂蛋白血症)1.发病原因： 主要为ApoE异常所致，显性遗传 ApoE分为ApoE2、E3、E4等，性质上的差异主要在于与ApoE受体(VLDL受体等)的结合能力不同，E2几乎不能与VLDL受体结合。正常人基因型多为ApoE3/E3，其与VLDL受体的结合力正常，但型患者多为ApoE2/E2型，其与VLDL受体的结合力大为降低，导致VLDL在血浆中堆积。,编辑版ppt,59,2.临床症状黄色瘤，AS和冠心病等3.生化特征：（1）血清外观：混浊，表面薄层奶油层 （2）血脂分析：TG，Ch （3）电泳图谱：出现-VLDL ；LP和Pre LP区带连接在一起形成宽而深染的色带，故称宽-病。亦称高-VLDL血症。（4）脂蛋白分析：IDL 、(-VLDL),编辑版ppt,60,型高脂蛋白血症(家族性高TG血症或高VLDL血症) 本症为高脂蛋白血症中常见的类型，我国一半以上的高脂蛋白血症属于此型。常染色体显性遗传。 1.发病原因： 由于VLDL合成亢进和/或VLDL分解受阻。机制不详。,编辑版ppt,61,2.生化特征：（1）血清外观：混浊，4冰箱过夜无奶油层（2）血脂分析 ：TG、Ch正常或轻度升高。 （3）电泳图谱： Pre 深染，（4）脂蛋白分析： VLDL，所以称高VLDL血症 3.临床表现： 多在成年人发现，青少年少见。患者很少有黄色瘤等皮肤特点，易发生冠心病，但不如、型严重。其他的症状可有肥胖、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、葡萄糖耐量异常及高尿酸血症等。,编辑版ppt,62,型高脂蛋白血症(高CM和高前-LP血症) 1.发病原因： ApoC LPL活性 其它原因导致的LPL活性 VLDL中的 CM、 TG降解受阻,编辑版ppt,63,2.临床表现： 常于20岁前发病，家族史明显者，丘疹状黄色瘤的发病率可高达3050，并伴有胰腺炎、肝脾肿大；葡萄糖耐量异常、尿酸血症以及缺血性心脏病等。 3. 生化特征：（1）血清外观：上层奶油层、下层混浊。（2）血脂分析：TG Ch 正常或（3）电泳图谱：可见CM及前脂蛋白深染（4）脂蛋白：CM 、 VLDL ,编辑版ppt,64,编辑版ppt,65,编辑版ppt,66,继发性高脂蛋白血症(secondary hyperlipoproteinemia) 继发性高脂蛋白血症(secondary hyperlipoproteinemias)比原发性高脂蛋白血症更为多见，成人的发病率为35，常继发于糖尿病、肝胆疾病和肾病等。过量摄入糖或饮酒也可引起继发性高脂蛋白血症。（1）糖尿病;（2）甲减; （3）肾病综合征; （4）急性肝炎; （5）酗酒.,编辑版ppt,67,三、脂蛋白代谢紊乱与动脉粥样硬化,（一）动脉粥样硬化定义,动脉粥样硬化（atherosclersis，AS）是指动脉内膜的脂质、血液成分的沉积，平滑肌细胞及胶原纤维增生，伴有坏死及钙化等不同程度的病变的一类慢性进行性病理过程。动脉粥样硬化主要损伤动脉壁内膜，是血管壁纤维化增厚和狭窄的一种病理改变。,编辑版ppt,68,（二）动脉粥样硬化危险因素,1、高脂血症 2、高血压 3、吸烟 4、性别 5、内分泌因素 6、遗传因素等 上述危险因素中，高脂血症、高血压和吸烟是促进AS发病全过程的三大因素。,编辑版ppt,69,（三）动脉粥样硬化发病机制学说,脂源性学说,癌基因学说,病毒学说,细胞因子学说,受体缺失学说,内皮细胞损伤学说,编辑版ppt,70,（三）动脉粥样硬化发病机制,多种原因使血管内皮细胞受损，单核细胞黏附其上侵入内膜，并分化成巨噬细胞。与此同时血小板黏附并分泌多种因子，使血管壁中膜平滑肌细胞游走进入内膜，巨噬细胞和平滑肌细胞泡沫化形成泡沫细胞，进一步使游走进入内膜的平滑肌细胞增殖，形成粥样硬化斑块。,编辑版ppt,71,粥样硬化斑块形成,编辑版ppt,72,引起动脉粥样硬化的脂蛋白,LP（a）,B型LDL,变性LDL,脂蛋白残粒,编辑版ppt,73,脂蛋白残粒,富含TG的CM和VLDL经LPL水解生成脂蛋白残粒（CM残粒和IDL），并转变成富含胆固醇酯和APoE的颗粒沉积于血管壁。,编辑版ppt,74,变性LDL,LDL的蛋白组分经化学修饰，使其正常的立体构象发生改变，生物学活性也有相应变化，这种化学修饰的LDL称为变性LDL或修饰LDL（modilied LDL）。变性LDL包括：乙酰LDL、氧化LDL、糖化LDL,编辑版ppt,75,乙酰LDL 是LDL中的APoB100赖氨酸残基被乙酰化产生修饰的LDL，激活巨噬细胞，并经清道夫受体介导，使巨噬细胞摄取乙酰LDL而转化为泡沫细胞，促进AS形成。,编辑版ppt,76,B型LDL,血中LDL-C升高，LDL被氧化是AS发生的前体条件，但有部分冠心病患者血清LDL-C在正常范围？LDL一般分为A型和B型两个亚组分，其中B型是小而密的LDL，是动脉粥样硬化发生的高危险因素。,编辑版ppt,77,B型LDL如何致动脉粥样硬化？,通常高TG患者会有高SD-LDL（小而密LDL）和低HDL表型血浆中过高的TG会转移到LDL和HDL中，成为LPL更好的底物伴随LDL中TG不断水解，LDL颗粒被转化为小而密LDL富含TG的小而密LDL不易通过LDL受体介导途径从循环中清除，会在血浆中停留，且抗氧化性弱，易被氧化且被巨噬细胞摄取，促进AS的发生,编辑版ppt,78,LP（a）,主要载脂蛋白为Apo（a）Apo（a）的胜利功能可能是转运脂质到末梢细胞，LP（a）是公认的致动脉粥样硬化的独立危险因素。,编辑版ppt,79,HDL的抗动脉粥样硬化功能,主要通过参与体内胆固醇酯逆转运起抗动脉粥样硬化作用，包括对LDL氧化抑制、中和修饰LDL培基活性以及抑制内皮细胞黏附分子的表达等功能,脱泡沫化作用,抗泡沫化作用,编辑版ppt,80,指形成的泡沫细胞脱去胆固醇使蓄积的CE在中性胆固醇酯水解酶（NCEH）的催化下，水解成FC，然后移出细胞外至HDL，称为NCEH途径,脱泡沫化作用,编辑版ppt,81,在修饰LDL处理巨噬细胞的实验体系中同时加入HDL，使泡沫细胞的形成受到抑制。一旦HDL被氧化为oxHDL，则失去这种抑制作用,抗泡沫化作用,编辑版ppt,82,抗泡沫化时来自溶酶体的FC有两种转移途径途径一：在内质网首先被ACAT酯化，在经NCEH脱酯反应依赖途径转运至细胞膜途径二：不通过NCEH，在肝脏经胆固醇酯逆转运系统直接移至细胞膜,编辑版ppt,83,巨噬细胞,化学修饰LDL,HDL,溶酶体分解,清道夫受体,ACAT,NCEH,FC,CE,巨噬细胞抗泡沫化与胆固醇酯的循环,编辑版ppt,84,脂蛋白代谢紊乱的主要检测指标 一、总胆固醇（TC） 二、甘油三酯（TG） 三、脂蛋白 四、载脂蛋白 五、磷脂 六、游离脂肪酸 等,编辑版ppt,85,目前临床上开展的血脂测定项目包括TC、TG、HDL及其亚类胆固醇、LDL-C、Lp（a）以及部分载脂蛋白如ApoAI、ApoB等。其中TC、TG、HDL-C、LDL-C测定是血脂测定的四个基本指标。血浆4冰箱中过夜观察其分层现象及清澈度可初步估计各种脂蛋白的变化状况。血浆脂蛋白电泳结合TC、TG水平有助于高脂血症分型。,概况：,编辑版ppt,86,血脂测定标准化：,血脂分析前变异来源于：生物因素，如年龄、性别、种族等因素的个体差异。生活方式，包括饮食习惯、吸烟、运动及应激等。临床方面包括疾病或药物引起的脂代谢改变。血标本采集与处理方面,准确测定应从分析前的准备开始，包括受试者的准备，标本采集，合格的试剂、校准物的选用，检测方法选择。,方法学上应该采用美国疾病控制中心（CDC）或中华医学会检验分会推荐的操作方法。,编辑版ppt,87,一、血清（浆）静置试验,将患者空腹12h后采集静脉血分离出血清置4冰箱中过夜，然后观察其分层现象及清澈度。,正常空腹血清应清澈透明。,编辑版ppt,88,二、血清（浆）总胆固醇测定,TC至血液中各LP所含胆固醇之总和，分为酯化型胆固醇（CE）和游离型胆固醇（FC）,TC,FC（30-40%）,EC（60-70%）,决定性方法：同位素稀释-质谱法；常规方法：酶法,编辑版ppt,89,酶测定法,原理：,是用胆固醇酯酶(CEH)水解胆固醇酯生成脂肪酸和胆固醇，胆固醇被胆固醇氧化酶(cholesterol oxidase，COD)氧化生成4胆甾烯酮和H2O2，然后在过氧化物酶(POD)催化下， H2O2与4-氨基安替比林(4AAP)及酚(三者合称PAP)结合，生成红色醌亚胺。醌亚胺的最大吸收峰在500nm左右，吸光度与标本中的胆固醇含量成正比。反应式如下：,编辑版ppt,90,参考值,血清参考值：3.05.20mmolL；危险阈值： 5.206.20mmolL；高胆固醇血症：6.20mmolL,编辑版ppt,91,临床意义,1、生理变化（1）20岁以上，随年龄增加而升高，20岁至40岁，男性高于女性；50岁以上，女性高于男性。70岁以上，男女均有下降趋势；（2）城市人群高于农村人群，可能与饮食、生活环境等有关；（3）长期高脂、高蛋白饮食可使血清胆固醇升高；（4）脑力劳动者高于体力劳动者，精神紧张也可使血清胆固醇升高。,编辑版ppt,92,临床意义,2、病理变化（1）TC增高 肾病综合征，由于大量蛋白质从尿液中丢失，机体代偿性合成-脂蛋白增加的缘故；糖尿病，由于糖尿病患者体内乙酰CoA堆积，促进胆固醇合成增加；胆道梗阻，造成胆固醇排出减少；甲状腺功能减退，胆固醇转变为胆汁酸减少，血清胆固醇增高。（2）TC降低 常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝疾病、严重感染、营养不良、肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病，如癌症晚期等。,编辑版ppt,93,评价：,优点：特异性好、灵敏度高，线性范围宽。既可用于手工操作，也可自动化分析；既可作终点法检测，也可作速率法检测。缺点：某些胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，造成结果偏低；表面活性剂，如吐温-40可以干扰胆固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000可使结果提高1-2；易受一些还原性物质如尿酸、胆红素、维生素C和谷胱甘肽等的干扰。,编辑版ppt,94,三、血清（浆）甘油三酯测定,甘油三酯（TG）构成脂肪组织，参与TC、CE合成及血栓形成。由于其骨架上分别结合3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸，所以分别存在甘油三酯（TG）、甘油二酯（DG）和甘油一酯（MG）。血清中90-95%是甘油三酯。,编辑版ppt,95,决定性方法：同位素稀释-质谱法参考方法：二氯甲烷抽提，变色酸显色法常规方法：酶法,检测方法,编辑版ppt,96,酶测定法,1、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法）原理,评价优点：酶试剂较稳定，灵敏度高，线性范围较宽。缺点：胆红素和维生素C可使测定结果偏低,编辑版ppt,97,2 乳酸脱氢酶法,原理：,评价：优点：结果准确。缺点：灵敏度较低，试剂也不太稳定。,编辑版ppt,98,3甘油氧化酶法,原理：这是一种直接测定甘油的方法，分两步反应。第一步反应：,第二步反应：,评价：灵敏度高，结果准确。,编辑版ppt,99,参考值,正常参考范围：0.55-1.70mmol/L；临界阈值： 2.30mmol/L；危险阈值： 4.50mmol/L。,编辑版ppt,100,临床意义,1、血清TG增高：常见于家族性脂类代谢紊乱、肾病综合征、糖尿病、甲状腺机能减退、急性胰腺炎、糖原累积病、胆道梗阻、酗酒等。大量前瞻性的研究证实，富含TG的脂蛋白是CHD的独立的危险因子，TG增加表明患者存在代谢综合征，需进行治疗。2、血清TG降低：比较少见，甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能减退和肝功能严重损伤时可以见到甘油三酯降低。,编辑版ppt,101,四、血清(浆)脂蛋白测定,方法,超速离心分离纯化法,电泳分离法,血浆静置试验,血浆脂蛋白胆固醇测定法,因LP中胆固醇含量较为稳定，目前以测定LP中胆固醇总量的方法作为LP的定量依据，即测定HDL、LDL或VLDL中的胆固醇，分别称为高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。对于LP（a）主要为免疫学方法。,编辑版ppt,102,四、血清(浆)脂蛋白测定,(一)高密度脂蛋白测定HDL是血清中颗粒最小、密度最大的一组LP，被视为人体内具有抗动脉粥样硬化的LP。大量流行病资料显示，血清HDL-C水平与冠心病发病呈负相关。检测方法：参考方法超速离心法常规方法均相测定法,磷钨酸镁沉淀法直接测定法,编辑版ppt,103,1磷钨酸镁沉淀法原理： 用磷钨酸盐与镁离子沉淀血清中的LDL、VLDL和Lp(a)后，上清液中只含有HDL，然后用酶法测定其中的胆固醇含量(与酶法测TC相同)。以HDL中的胆固醇含量(即HDL-C)作为HDL的定量依据。评价：优点：标本用量少，操作简便易行，结果稳定，高TG血清不影响沉淀剂的沉淀效果，沉淀效果好，且不干扰酶法分析。批内CVl.87%，批间CV2.93%。缺点：对温度和pH改变很敏感，沉淀离心后放置时间不能过长，应于4h内立即检测，若放置过久会使结果偏高。,编辑版ppt,104,2 直接测定法,原理：分两步反应，第一试剂用聚阴离子及分散型表面活性剂(即反应抑制剂)，后者与LDL、VLDL和CM表面的疏水基团有高度亲和力，吸附在这些脂蛋白表面形成掩蔽层，但不发生沉淀，能抑制这类脂蛋白中的胆固醇与酶试剂起反应。第二试剂含胆固醇测定酶及具有对HDL表面的亲水基团有亲和力的表面活性剂(即反应促进剂)，使酶与HDL中的胆固醇起反应。评价：可用于自动分析。,编辑版ppt,105,参考值,HDL-C合适范围：1.04mmolL(40mgd1)；减低：0.91mmolL(35mgd1)。,编辑版ppt,106,临床意义,(1)HDL-C与冠心病发病呈负相关，HDL-C低于0.9mmolL是冠心病危险因素。(2)HDL-C下降还多见于脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。(3)高TG血症往往伴以低HDL-C。（4）肥胖者的HDL-C也多偏低。（5）吸烟可使HDL-C下降。（6）适量饮酒、长期体力劳动和运动会使HDL-C升高。,编辑版ppt,107,(二)低密度脂蛋白测定,参考方法：超速离心法其他可供选择的方法：表面活性剂清除法（SUR法）、过氧化氢酶清除法（CAT法）、杯芳烃法（CAL法）、可溶性反应法（SOL法）、保护性试剂法（PRO）等。 应用Friewald方程也可以得到LDL-C浓度，但Seyed-Ali Ahmadi的研究认为，血清TG低或TC过高的患者， Frieewald方程可能会过高估计LDL-C浓度。因此需用线性回归修正的公式计算。,常规方法:第三代均相测定法,编辑版ppt,108,1 Friedewald公式法 LDL-CTCHDL-CTG2.2(以mmolL为单位时)评价：Friedewald公式计算法是目前应用较广的估测LDL-C的方法，具有简便、直接、快速等优点。主要是利用血清TC、TG及HDL-C浓度测定结果，计算LDL-C的浓度。 但在血清中存在CM、血清TG4.52mmolL(400mgd1)、血清中存在异常-脂蛋白、型高脂血症等脂代谢异常的高脂血症时不宜采用Friedewald公式法计算。低密度脂蛋白水平通常以LDL-C含量表示，参考方法亦为超速离心法。,编辑版ppt,109,2 聚乙烯硫酸盐沉淀法(PVS沉淀法),原理：空腹血清中主要含有HDL、LDL、VLDL，用聚乙烯硫酸盐沉淀LDL，上清液中存有VLDL和HDL；同时测定血清和上清液中的胆固醇含量，以总胆固醇减去上清液中的胆固醇含量即为LDL-C的量。胆固醇的测定同前述的酶法测定胆固醇含量。评价：PVS沉淀法是中华医学会推荐的血脂测定方法。该法精密度中等水平，LDL-C的批内CV4.5mmolL时，有时会因LDL沉淀不完全而出现结果偏低。,编辑版ppt,110,3 直接测定法消除法,原理：在第一反应中，表面活性剂I使非LDL脂蛋白结构改变促进其与CEH和COD反应，并保护LDL不反应非LDL脂蛋白被消除；在第二反应中，表面活性剂促进未被消除的LDL-C与CEH和COD反应经Trinder反应显色测定。颜色深浅与LDL-C量呈正比。评价：方便、准确，可用于自动分析，目前在临床上使用最为广泛,编辑版ppt,111,参考值,正常范围：1.53.1mmol/L；临界范围：3.13.58mmol/L；高胆固醇血症：3.6mmol/L。,编辑版ppt,112,临床意义,目前以LDL中胆固醇(LDL-C)为定量LDL的依据，LDL-C水平与TC一样，是判断高脂血症、预防动脉粥样硬化的重要指标。并且近年来，许多学者认为LDL-C水平更能说明胆固醇的代谢状况，LDLC水平与冠心病发病率呈正相关，所以临床推荐LDLC为必查指标之一。,编辑版ppt,113,五、血清载脂蛋白测定,血清载脂蛋白包括AI、AII、B48、B100、CII、CIII、E和LP（a）等，血清中Apo结合于脂蛋白中，测定时要加用解链剂，使脂蛋白中Apo暴露在进行测定。检测方法：决定性方法：氨基酸分析常规方法：免疫透射比浊法临床主要检测：APoAI、APoB,编辑版ppt,114,免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白AI和载脂蛋白B原理：抗原抗体按一定比例反应时，在溶液内生成细小颗粒的抗原抗体复合物均匀分散在溶液介质内。当光线通过这一混浊液时，混浊液内的颗粒能吸收光线，光线被吸收的量与混浊颗粒的量成正比，这一定量方法称为免疫透射比浊法。血清ApoAI或ApoB与试剂中ApoA或ApoB抗体相结合，在一定条件下形成不溶性免疫复合物，使溶液混浊，混浊度与ApoAI或ApoB的量成正比，即浊度与吸光度成正比，以此作为定量测定ApoAI或ApoB的依据。,编辑版ppt,115,评价优点：简单快速，可以自动化批量分析缺点：对抗血清的质量要求高，且消耗抗血清较多。参考值ApoAI：1.001.50gL，ApoB：0.801.00gL。,编辑版ppt,116,临床意义,血清载脂蛋白主要配合血清甘油三酯和血清总胆固醇测定用于诊断和预测动脉粥样硬化。ApoAI是HDL的主要蛋白质，HDL的主要功能是将外周组织的胆固醇运往肝。ApoB是LDL的主要蛋白质，LDL的主要功能是将肝的胆固醇运向肝外组织。由于LDL浓度过高可引起动脉粥样硬化。因此，测定ApoAI、ApoB,及其两者比值较测定HDL-C和LDL-C更能直接反映血浆脂蛋白的变化，具有更大的临床价值。冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有ApoAI下降和ApoB升高。临床上常将ApoAI和ApoB比值作为冠心病的危险指标。,编辑版ppt,117,思考题：,1、什么是血脂,包括哪些？2 、试述血浆脂蛋白的分类3 、原发性高脂血症可分为哪几型?各型的生化特征?4、血脂分析标本,病人应空腹几小时?5、试述血清总胆固醇及甘油三酯测定原理及意义?6、什么叫载脂蛋白? APOA1 、 APOB100 、 APOC的主要作用?7、血清载脂蛋白测定有何意义？APOA1、APOB100与HDL、LDL的关系？,编辑版ppt,118,思考题：,1、简述血脂的超速离心法和电泳法的分类2、脂蛋白受体主要有 、 和 。3、高脂蛋白血症分类的方法主要有 、 和 三种。4、磷酸甘油氧化酶法测定TG的结果中包含了FG，若要去除FG得到真正的TG值，可用 法或 法。5、HDL-C测定的参考方法是用 法分离HDL，然后用 法或 法 测定其胆固醇含量。6、HDL-C与冠心病发病呈 相关。LDL-C增高是 发生发展的主要脂类危险因素。7 、正常人群的Lp（a）水平呈明显的 分布。8、脂蛋白按密度由低到高排列的正确顺序是如何?9、脂蛋白LDL分子中含量最多的是什么? 10、简述血清甘油三酯的磷酸甘油氧化酶法测定原理。11、哪一种脂蛋白是运输内源性甘油三酯的主要形式?,