人工制备抗体ppt课件.pptx

人工制备抗体,多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体,人工抗体主要包括：,一、多克隆抗体,概念：以相应抗原免疫动物获得抗血清，通过接种动物所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物，简称多抗。,多克隆抗体的应用：,1、用于抗原物质的鉴别、定位、分析和提纯2、作为疾病的诊断、检疫试剂3、作为人和动物某些疾病的治疗制剂,二、单克隆抗体,概念：1975年，Kohler和Milstein在自然杂交基础上创建杂交瘤技术，其产生的抗体只针对单一抗原决定簇，简称单抗。,单抗制备过程示意图,单克隆抗体的特点：,高特异性高均质性,单克隆抗体的应用：,1、在血清学技术方面,2、在免疫学基础研究方面,3、在抗原纯化方面,4、在肿瘤治疗方面，如生物导弹,5、用于制备抗独特型抗体疫苗。,三、基因工程抗体,概念：又称重组抗体，利用基因工程技术制备抗体分子，这是分子水平的抗体。,基因工程抗体的优势：,去除或减少无关结构，保留或增加天然抗体特异性和生物学活性。,基因工程抗体包括：,（一）改造鼠源性抗体（二）噬菌体抗体（三）胞内抗体,（一）改造鼠源性抗体,1.人-鼠嵌合抗体2.改型抗体或人源化抗体3.小分子抗体,1.人-鼠嵌合抗体,是指在同一抗体分子中含有不同种属来源抗体分子片段的抗体。,人-鼠嵌合抗体的特点：,1.保留了鼠源单抗的特异性和亲和力；2. 其人源Fc 段能有效介导生物学效应功能；3.能自由地选择抗体，并有效地利用不同的生物学特点及理化特性；4.可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区，缩短操作和研制周期；操作相对简单。,2.改型抗体或人源化抗体,概念：指利用基因工程技术，将鼠单抗V区中互补性决定区（CDR）序列取代人源抗体CDR序列，重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持人抗体亲和力的CDR移植抗体。,改型抗体或人源化抗体的特点：,保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。,3.小分子抗体,概念：是指由Fab和Fv组成的抗体片段。,小分子抗体的优点：,a.仅含V区结构，免疫原性较弱，b.分子量小，易透过血管壁，可有效克服肿瘤灶组织对抗体的生理阻抗，c.无Fc段，不与非靶细胞的FcR结合，易渗透至病灶局部，d.有利于作为导向药物的载体。,小分子抗体的局限性：,与靶细胞表面抗原的结合力较弱，半寿期短，易从血液中被清除，从而影响到达肿瘤局部的抗体浓度。,小分子抗体的类型：,（1）Fcb片段，（2）单域抗体，（3）Fv片段，（4）单链抗体（ScFc），（5）最小识别单位（MRU），（6）双价小分子抗体（diabody），（7）双特异性小分子抗体，（8）微抗体（minibody）。,（二）噬菌体抗体,概念：是将克隆的人抗体V区基因与一种丝状噬菌体DNA上的基因或基因精确连接，转染细菌后在其膜表面表达Fab段-噬菌体外壳蛋白的融合蛋白。,噬菌体抗体的优点：,（1）无须免疫，可直接从非免疫动物抗体库中筛选出特异性抗体，（2）可供产生针对多种特异性抗原的人源抗体，以克服难以建立的人-人杂交瘤的困难，（3）细菌增殖快，培养成本低，适合大规模生产，为临床上大量应用抗体提供了可能性。,（三）胞内抗体,概念：指借助基因工程手段，获得仅在细胞内表达并仅作用于胞内靶分子的抗体或其片段，多为ScFc。,胞内抗体的特点：,可特异性作用于胞内靶分子，从而发挥特定的生物学效应。,Thank you ！,