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    动物细胞培养课件.ppt

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    动物细胞培养课件.ppt

    ,专题2.2动物细胞工程,1,t课件,动物细胞工程,其中,动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。,2,t课件,2.2.1动物细胞培养和核移植技术,3,t课件,教学目标,新课标要求简述动物细胞培养的过程、条件及应用。简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。教学重点动物细胞培养的过程及条件。用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。教学难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。,4,t课件,资料:烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人?,取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。,5,t课件,一、动物细胞培养,不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多。动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。,6,t课件,一、动物细胞培养,1.概念:动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,原理:细胞增殖,目的:获得细胞或细胞产品。,2.过程:,7,t课件,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,剪碎组织,分散成单个细胞,细胞悬液,1050代细胞,发生癌变无限传代,培养液,胰蛋白酶或胶原蛋白酶,原代培养,传代培养,不死性细胞,继续传代培养,(第1代细胞到第10代细胞),8,t课件,细胞的生长特性,细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。,9,t课件,细胞贴壁,10,t课件,培养器皿,返回,11,t课件,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液(原代细胞),10代细胞,无限增殖,单个细胞,加培养液,细胞株,细胞系,原代培养:第1代细胞传至10代左右传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养。细胞株:10到40、50代的细胞,遗传物质没发生改变。细胞系:超过50代的细胞,遗传物质发生改变,失去接触抑制,可无限增殖。,过程点拨:,等同于癌细胞,12,t课件,寻根问底,1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?,细胞间的成分主要是蛋白质。 不行,胃蛋白酶适宜的PH约为2,当PH6时,胃蛋白酶就会失去活性,而胰蛋白酶适宜PH为7.2-8.4,多数动物细胞培养的适宜PH为7.2-7.4。胃蛋白酶在此环境中没有活性,胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。,2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?,细胞膜成分:磷脂和蛋白质 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用。 因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。,3.目前使用的或冷冻保存的正常细胞为几代以内的?,10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。,13,t课件,5、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?,6、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?,成块组织不利于培养,分散了并制成细胞悬浊液,利于细胞与培养液充分接触,利于培养。,不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多。动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。,4、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?,分化程度低,分裂和增殖旺盛,易培养,思考,14,t课件,二、动物细胞培养条件,1、无菌、无毒的环境2、营养 3、温度和PH 温度36.5+0.5度,pH7.27.44、气体环境 O2和CO2(95%空气和5% CO2 ),维持培养液的PH,培养液和所有培养用具进行无菌处理措施:培养液中加一定量的抗生素。,葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子(维生素、激素等)和 动物血清,较植物组织培养基,动物细胞培养液的独特之处?,液体培养基 成分中有动物血清等,15,t课件,想一想,为什么对动物细胞进行培养时要添加血清?,血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白质为白蛋白和球蛋白;氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,有些动物细胞不能合成,必须由培养液提供;激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、增殖、贴附,还有很多未知的促细胞生长因子等其他活性物质。因此,细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖,一般要添加10%-20%的血清。,16,t课件,三、动物细胞培养技术的应用,1.生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等2.基因工程技术中的受体细胞。3.用于检测有毒物质。4.培养正常或病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究。可用于健康细胞的培养,如获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮;用于筛选抗癌药物等,为治疗和预防疾病提供理论依据,17,t课件,细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体或组织,培养结果,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物细胞和动物细胞培养的比较,18,t课件,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞() A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是 - ( ) A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-( ) A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培 养成植株。,A,学后巩固,19,t课件,作业,请预习课本47页以后的内容完成练习册相关练习,20,t课件,

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