ABO血型正反定型不课件.ppt

1,血型的认识,A total of 30 human blood group systems are now recognized by the International Society of Blood Transfusion (ISBT),国际输血协会已承认30种人类血型系统.,Almost always, an individual has the same blood group for life; but very rarely an individuals blood type changes through addition or suppression of an antigen in infection, malignancy or autoimmune disease.,通常人的血型终生不变,感染、恶性肿瘤及自身免疫性疾病造成红细胞表面抗原的增加或减少而引起血型改变是非常罕见。,Some blood types are associated with inheritance of other diseases; for example, the Kell antigen is sometimes associated with McLeod syndrome.某些血型与人类的遗传疾病有关，如K抗原相关的Mcleod综合征:主要表现各种运动障碍,但常有反射消失、肌病、心肌病、肌酸激酶活性增高和持久的溶血状态,红细胞表现Kell抗原及XK抗原的抗原性明显减弱或消失。,2,ABO blood group system,3,The ABO system is the most important blood group system in human blood transfusion. The associated anti-A antibodies and anti-B antibodies are usually Immunoglobulin M, abbreviated IgM, antibodies. ABO IgM antibodies are produced in the first years of life by sensitization to environmental substances such as food, bacteria and viruses. ABO血型系统是人类输血中最重要的血型系统，相关的抗体是抗A，抗B，通常是IgM抗体。ABO IgM抗体主要是在人出生的第一年对环境物质如食物、细菌、病毒产生。,4,5,ABO血型正定型,6,ABO血型反定型,7,一 ABO血型正反定型不符合原因 ABO血型正反定型不符合原因大致分为（一）生理性原因；（二）技术和操作原因；（三）红细胞标本原因；（四）血清标本原因。（一）生理性原因 由于新生儿血清中抗-A及抗B含量较少、效价太低，体内还含有母亲的血型抗体，而导致正反定型不符。6个月后这种现象会逐渐消失。因此，6个月内的婴儿一般不做反定性，即使正反定型不符也是正常的。,8,（二）技术和操作错误 这是主要原因。表现为实验者责任心不强，不认真按操作规程操作，不仔细核对，不细心观察，工作马虎，在具体工作中常常出现： 1. 试管中忘了加标准血清或待检血清。 2.把反定性中的溶血判断为阴性反应。 3.血清与红细胞的的比例太小（血清太多红细胞太少、或血清太少红细胞太多）。 4加血清或红细胞标本时或记录结果时张冠李戴。,9,5.离心速度太低、太高或时间太短、太长 6.使用了失效的、或细菌污染的、或错误的标准血清或标准红细胞. 7.使用了不干净的玻璃试管、滴管，造成溶血后被误认为是实验结果的溶血，而导致假阳性结果。 8.弱凝集时肉眼观察不细致，又不用显微镜观察。（三）红细胞标本原因（正定时出现） 1.病人近期接受过异型输血或ABO血型不合的骨髓移植，病人体内有其他血型的红细胞存在。,10,2.有些ABO亚型红细胞（如A亚型、B亚型），红细胞表面抗原太弱，正定型时出现假阴性结果. 3红细胞获得性抗原的影响（如获得性类B抗原），血型鉴定时使红细胞血型变为B型。 4.红细胞多凝集现象或自身凝集现象。红细胞因遗传性或获得性原因使红细胞表面出现异常，导致多凝集现象；或某些疾病导致自身凝集现象而出现假阳性结果。,11,5红细胞悬液中的血浆含有高浓度的血型物质A或B时，中和了抗-A及抗B血清，出现假阴性结果，如某些人因遗传、卵巢囊肿病人都可造成血型物质浓度很高，多次洗涤红细胞后在做试验可克服。6.红细胞悬液中的血浆含有针对抗-A及抗B血清中某些成分的抗体，出现假阳性反应。洗涤红细胞后再做试验可克服.7.脐带血中Wharton胶使脐带血红细胞发生非特异性凝集。因此，在用脐带血做血型鉴定时，脐带血红细胞应反复洗涤去除Wharton胶后，再做血型鉴定。,12,8.某些疾病会导致红细胞表面抗原减弱，正定时易出现假阴性结果。如白血病、难治性贫血或某些肿瘤病人。9.药物、防腐剂、抗凝剂对结果的影响。如右旋糖酐、静脉用造影剂等易引起红细胞聚集。血型鉴定时抗凝剂最好选用EDTA-Na2或EDTA-K2，该抗凝剂可防止某些物质遮蔽红细胞表面的A或B抗原位点，防止假阴性的发生。（四）血清标本的原因（反定型时出现） 1.纤维蛋白原凝块被认为时凝集。在使用血浆或凝集不好的血清做反定时易出现。,13,2.血清中蛋白比例失调、低免疫球蛋白血症或纤维蛋白含量过高，易造成假凝集，见于某些疾病和肿瘤等。 3.病人近期接受过异型输血或ABO血型不符的骨髓移植，刺激机体产生了不规则抗体。 4.ABO血型系统以外的其他血型不合，血清中含有相应的抗体，这些抗体会凝集相应的红细胞而出现凝集，输血时应找血型完全相配的血液输注。 5.血清中含有抗-A抗-B以外的其他凝集红细胞的抗体，这些抗体会凝集病人红细胞而出现假凝集。,14,6.病人血清中的冷凝集素造成的造成的自凝集现象，易造成假阳性结果。血型鉴定时作阴性对照（病人红细胞+生理盐水）可发现，37。C可克服。 7.免疫抑制疾病或经免疫抑制剂治疗的病人，血清中ABO抗体减少或消失。 8.老年人随着年龄增长ABO抗体减弱。 9.病人近期输入了异型血浆或输入了含高浓度ABO凝集素的血浆，以及大量血浆置换的病人血清中出现了意外抗体。,15,二、ABO血型正反定型不符原因查找及处理方法,最快捷的处理方法 弱抗原所致的ABO正反定型不符处理 非特异凝集所致ABO正反定型不符的鉴别与处理 正定型结果正确，反定型结果错误的分析和处理 反定型结果正确，正定性结果错误的分析处理,16,二、ABO血型正反定型不符原因查找及处理方法（一）最快捷的处理方法 1.先排除生理性原因 确定被检者是否是6个月内的婴儿；是否是免疫力低下的老人（做抗-A抗-B效价测定可知）。 2.排除操作错误 按照标准操作规程重新鉴定血型一次或换人操作。 3.排除不规则抗体或抗原 用生理盐水洗涤患者红细胞和和标准红细胞3次以上，去除不规则抗体或抗原后，再做血型鉴定。,17,4.排除标本错误或标准血清被污染或标准血清被污染引起的非特异性凝集重新取标本或更换标准血清后，再做血型鉴定。 5.排除冷凝急素 一种方法是37。C水浴5-10分钟，观察凝块是否减少或消失；第二种方法是正定型时用自身红细胞加生理盐水作对照，反定型时用自身血清加O型红细胞作对照，如对照管凝集，则血清中有非特异性冷凝集素存在。 6.排除弱抗原抗体反应 抗原抗体反应后室温（2024。C）放置30分钟或4。C放置30分钟，两种方法同时用更好，离心观察反应情况，反应结果孵育前明显者，说明弱抗原抗体反应，但要用O型和自身红细胞作对照，以排除非特异性冷凝集素的干扰。,18,7.排除H凝集 标准血清被污染时会产生抗H抗体，该标准血清会凝集所有人的红细胞，换一瓶标准血清重做试验。 8.其它 如果以上方法都不能排除正反定型不符，应作ABO亚型鉴定。 附注:（1）如是献血者的血型ABO正反定型不符，该血液不能用于临床输注，查清原因后报废。（2）如是病人正反定型不符，病人又急需输血时，该病人只能输Rh同型的O型悬浮红细胞或洗涤红细胞，然后再查原因。,19,（二）弱抗原所致ABO正反定型不符的处理 1试管凝集试验 抗原抗体反应后在室温（2024。C)放30min能增强抗原抗体结合；在4。C放30min更能增强抗原抗体结合，但要设O型和自身红细胞对照，确证阳性反应不是冷凝集反应。 2.酶处理红细胞 用木瓜酶、或无花果酶、或胰酶处理 3.用人血清抗-A及抗-B进行吸收放散试验，检测红细胞如A和弱B抗原。 4.检测唾液中A,B和H血型物质,20,（三）非特异性凝集所致ABO正反定型不符的鉴别处理 1.冷凝集素 健康人体内冷凝集素效价一般1:16，只在20。C以下反应，05。C反应最强。但在肺炎、自身溶血性贫血、肝硬化等疾病中效价很高，30。C也能产生反应，因此，严重干扰血型鉴定和配血试验。克服方法：交叉配血报告应注明，输注时放慢速度。 2.H凝集 每个人红细胞上都有H抗原，标准血清被污染时会产生H抗体鉴定方法：取多个已知O型人红细胞与该标准血清反应。克服方法：标准血清不用时放冰箱保存，防止细菌污染。,21,3.T凝集 每个人红细胞上都有不活动的T抗原，如红细胞悬液被细菌污染，或体内红细胞因疾病被细菌感染，不活动的T抗原可被激活。而每个人血清中都有T抗体，故这种红细胞能与所有人的血清凝集，但不凝集本人的血清（本人血清中T抗体已被红细胞吸收完了）。鉴定方法：取多个已知AB型人血清与被检红细胞反应，如被检红细胞与所有AB型人红细胞发生了凝集，则该被检红细胞表面含有活动的T抗原。,22,（四）正定型结果正确，反定型结果错误的分析和处理 1.抗体太弱或消失，如新生儿、老年人、免疫抑制疾病、免疫低下的病人。 2.被检血清抗-A抗-B浓度太高，引起前带现象，导致假阴性反应。消除方法：稀释血清，消除前带现象。 3.冷凝集素可导致反定型错误。消除.,23,4.血清中含有ABO系统以外的血型抗体，如抗-P,抗-M等，可出现反定错误。检测：用O型标准红细胞与被检血清反应，凝集有血型抗体存在，未凝集再取10人份O型红细胞与被检血清反应，一例凝集已有。处理：对含有不规则抗体的血清进行交叉配血时，必须用至少2种方法进行交叉配血试验，其中一种必须是抗球蛋白试验。 5.血清中血浆蛋白过高或静脉输入大量大分子药物、血清蛋白比例失调或成分异常，可引起反定型时串钱状凝集。处理：将血清用生理盐水稀释3倍可消除。,24,（五）反定型结果正确，正定性结果错误的分析处理。 1.获得性类B抗原 正定型为AB型弱B，反定型为A型，提示该人有获得性类B抗原红细胞。产生原因：.处理:1）酸化单克隆抗-B血清PH值到6.0时，与获得性类B红细胞反应减少或消失；2）用乙酐处理获得性类B红细胞，能明显减弱其反应；3）如果病人是分泌型的，可通过唾液中的血型物质来鉴定血型，其唾液中只含A和H血型物质，无B血型物质。,25,2.获得性类A抗原 正定型为A型或AB型，反定型为O型或B型，提示该人有获得性类A抗原产生。产生原因：由于造血干细胞的体细胞突变造成部份红细胞持续性Tn抗原激活,Tn的抗原表位类同A抗原,当O型和B型红细胞Tn抗原被激活后，O型、B型红细胞就被误认为是A型、AB型。消除：用蛋白酶降解红细胞表面被激活的Tn抗原，正常A抗原不受影响。 3.混合视野凝集：肉眼观察时凝块小而少，显微镜观察有部分红细胞凝集，部分不凝集。产生原因：非O型人近期输了O型血，病人接受了与自己ABO血型不一致的骨髓移植，A亚型中A3红细胞与抗-A血清反应时呈典型的混合视野凝集。,26,4抗体包被红细胞 血型鉴定时出现非特异性凝集，该凝集是由于红细胞表面的IgG抗体与蛋白的反应引起，或红细胞表面的冷抗体在盐水中自凝引起。产生原因：1）患新生儿溶血病的婴儿、患自身免疫性疾病的人红细胞表面包被有很多IgG抗体，能与1822%的抗-D血清和612%的抗-A及抗-B血清中的蛋白质发生反应，导致这种红细胞发生非特异性凝集，致血型错误。2）红细胞表面被冷抗体IgM冷凝集素包被.。消除：1)红细胞表面IgG抗体，45。C做放散试验；2)红细胞表面冷抗体IgM:37。C孵育或37。C洗涤。,27,谢 谢 !,28,Transfusion medicine is a specialized branch of hematology that is concerned with the study of blood groups, along with the work of a blood bank to provide a transfusion service for blood and other blood products. Across the world, blood products must be prescribed by a medical doctor (licensed physician or surgeon) in a similar way as medicines. In the USA, blood products are tightly regulated by the Food and Drug Administration,Blood transfusion,Much of the routine work of a blood bank involves testing blood from both donors and recipients to ensure that every individual recipient is given blood that is compatible and is as safe as possible. If a unit of incompatible blood is transfused between a donor and recipient, a severe acute immunological reaction, hemolysis (RBC destruction), renal failure and shock are likely to occur, and death is a possibility. Antibodies can be highly active and can attack RBCs and bind components of the complement system to cause massive hemolysis of the transfused blood.,29,Patients should ideally receive their own blood or type-specific blood products to minimize the chance of a transfusion reaction. Risks can be further reduced by cross-matching blood, but this may be skipped when blood is required for an emergency. Cross-matching involves mixing a sample of the recipients serum with a sample of the donors red blood cells and checking if the mixture agglutinates, or forms clumps. If agglutination is not obvious by direct vision, blood bank technicians usually check for agglutination with a microscope. If agglutination occurs, that particular donors blood cannot be transfused to that particular recipient. In a blood bank it is vital that all blood specimens are correctly identified, so labeling has been standardized using a barcode system known as ISBT 128,30,Rare blood types can cause supply problems for blood banks and hospitals. For example Duffy-negative blood occurs much more frequently in people of African origin, and the rarity of this blood type in the rest of the population can result in a shortage of Duffy-negative blood for patients of African ethnicity. Similarly for RhD negative people, there is a risk associated with travelling to parts of the world where supplies of RhD negative blood are rare, particularly East Asia, where blood services may endeavor to encourage Westerners to donate blood.,31,Hemolytic disease of the newborn (HDN),A pregnant woman can make IgG blood group antibodies if her fetus has a blood group antigen that she does not have. This can happen if some of the fetus blood cells pass into the mothers blood circulation (e.g. a small fetomaternal hemorrhage at the time of childbirth or obstetric intervention), or sometimes after a therapeutic blood transfusion. This can cause Rh disease or other forms of hemolytic disease of the newborn (HDN) in the current pregnancy and/or subsequent pregnancies. If a pregnant woman is known to have anti-RhD antibodies, the RhD blood type of a fetus can be tested by analysis of fetal DNA in maternal plasma to assess the risk to the fetus of Rh disease.One of the major advances of twentieth century medicine was to prevent this disease by stopping the formation of Anti-RhD antibodies by RhD negative mothers with an injectable medication called Rho(D) immune globulin. Antibodies associated with some blood groups can cause severe HDN, others can only cause mild HDN and others are not known to cause HDN.,32,Red blood cell compatibility,33,Plasma compatibility,34,